A modified method is given for the precolumn derivatization and subsequent high-pressure liquid chromatographic seperation of 3-methylhistidine from urine. The elution contained isocratic solution with acetonirile and 10 M sodium phosphate(pH 7.5) requires less than 7 min. The recoveries of 3-methylhlstidine from urine control were 95% to 106%. 3-Methylhistidine determinations were performed on urine samples from volunteers who were both male trained and non-trained physical undergraduates. As the result, urinary .3-methylhistidine content of volunteers increased significantly after weight training.
George, S.K.;Dipu, M.T.;Mehra, U.R.;Verma, A.K.;Singh, P.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권9호
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pp.1291-1297
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2006
The potential of the spot urine sampling technique as an alternative to performing a total urine collection to predict the microbial nitrogen supply was evaluated in crossbred bulls. In a completely randomized design, 20 growing crossbred bulls were assigned four levels of feed intake (120, 100, 80 and 60% of voluntary dry matter intake) on diets comprised of wheat straw and concentrate mixture (50:50). After three months of experimental feeding, a metabolism trial was conducted for ten days, during which spot urine collections were performed every 6 h post feeding on days 9 and 10. The daily urinary excretion of allantoin (A) and purine derivatives (PD) decreased with the reduction in feed intake while creatinine (C) excretion remained similar in animals fed at different levels. The microbial nitrogen (MN) supply calculated from the PD excreted in total urine (35.08 to 72.08 g/d) was higher at increased levels of feed intake. PD concentration in spot urine samples had poor correlation with feed intake except at 12 h post feeding. A/C ratio and PD/C ratio in spot urine samples remained similar irrespective of sampling time and significantly (p<0.01) correlated with daily urinary PD excretion, digestible organic matter intake and dry matter (DM) intake. However, no significant differences were evident in these ratios among animals fed at levels 120, 100 and 80% of voluntary dry matter intake (VDMI) at different times post feeding. These results suggests that the spot urine sampling technique to predict the microbial protein supply is not suitable for detecting small differences in MN supply and hence, estimation of PD excreted in total urine (mmol/d) is necessary to assess precisely the MN supply in crossbred bulls.
Kim, Kyeong-Ho;Park, Young-Hwan;Park, Hyo-Kyung;Kim, Ho-Soon;Lee, Min-Hwa
Archives of Pharmacal Research
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제19권5호
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pp.396-399
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1996
High-performance liquid chromatographic method with UV detecction was developed for the determination of theophylline and its metabolites in human urine using ${beta}$-hydroxyethyl theophylline$({beta} -HET)$ as an internal standard. For extraction of urine sample, quality control sample and xanthine-free blank urine were mixed with decylamine (ion-paring reagent) and ${beta}$-HET. After saturation with ammonium sulfate, the mixture was then extracted with organic solvent at pH values of 4.0-4.5. All separations were performed with ion-pair chromatography using decylamine as an ion-pairing reagent and 3mM sodium acetate buffered mobile phase (pH 4.0) containing 1% (v/v) acetonitrile and 0.75 mM decylamine. The detection limits of theophylline, 1, 3-DMU, 1-MU, 3-MX and 1-MX in human urine were 0.17, 0.17, 0.39, 0.19 and 0.19 ${\mu}g$/ml, based on a signal-to-noise ratios of 3.0. The mean intraday coefficients of variation (C.V.s) of each compound on nine replicates were lower than 2.0%, while mean interday C.V.s on three days were lower than 1.6%. All separations were finished within 40miutes.
본 연구는 양돈액비의 비료성분 및 유해정도를 분석하고 아울러 전기전도도나 건물 함량을 이용하여 중요 비료성분 함량을 쉽게 추정하는 방벙을 구명하기 위해 2001년 제주도내 109개 양돈 농가를 방문하여 액비를 수집,$4^{\circ}C$냉장고에 보관해 두었다가 꺼내어 pH, BOD, DM, SS, OM, EC, T-N, T-P, K, Ca, $NH_4$-N. Mg 및 Na 등을 분석하였다. 조사대상 농가의 돈분 액비 중 슬러리(70 농가)는 가축분뇨, 사료 및 청소수가 혼합된 것이고 요(19 농가)는 분뇨를 고액분리 시킨 후에 저장해둔 요(20 농가)를 말하며 돈분 발효액은 slurry를 발효, 폭기 및 살수 등의 과정을 거친 액비를 뜻한다. 돈분 액비 중 slurry로 저장한 액비가 요나돈분 발효액 보다 여러 가지 비료 성분함량($NH_4$-N, K, P, Ca, Mg 및 Na)이 높았고 전기 전도도나 건물함량도 마찬가지로 slurry 상태로 저장한 액비가 다른 상태의 액비 보다 높았다. EC, $NH_4$-N, Ca, Mg 및 Na의 함량은 요와 발효액 간에 비슷하였으나 발효 액비의 L 함량이나 건물함량은 요 보다 약 2배 정도 높았다. 한편 P 함량은 반대로 발효 액비보다 요에서 높았다. Slurry의 전기전도도(EC)와 여러 비료 성분간에 상관관계를 통계 분석한 결과, $NH_4$-N와 Na 함량만이 유의적인 상관관계가 인정되었고 slurry의 DM 함량은 $NH_4$-N, P, Ca 및 Mg 함량간에 유의성이 인정되었다 (P<0.05). 고액분리요의 전기전도도와 비료성분간에 상관관계 분석에서 $NH_4$-N만 유의적 상관관계가 있었고 DM 함량에서는 $NH_4$-N와 Ca 간에만 유의적 상관관계가 인정되었다(P<0.05). 발효 액비는 전기전도도와 $NH_4$-N, P 및 Ca 간에만 유의적 상관관계가 있었으며 DM 함량은 K, P, Ca, Mg 및 Na 간 통계적으로 유의적 상관관계가 있었다(P<0.05). 돈분 액비의 종류별로 유해 또는 오염물질 농도를 살펴보면 슬러리의 BOD 농도는 22,520mg/L로 요 및 발효 액비 4,763, 2,701 mg/L보다 크게 높았다. 결론적으로 비료효과는 slurry가 요 및 돈분발효액 보다 좋았지만유해 또는 오염물질농도는 반대로 slurry에서 높았다. 그러나 일반기준치와 비슷한 수준으로 유해위험은 없다고 생각된다.
This study evaluates the pretreatment for analysis of benzidine metabolites in urine by measuring the recovery rates according to the temperature and periods of storage of the urine. By the solid phas e extraction, the recovery rates of basic hydrolysis are benzidine 67.4 %, monoacetylbenzidine 105.1 %, and diacetylbenzidine 115.8 %, respectively. By the liquid extraction, the recovery rates of back-extraction into 0.1 M perchloric acid are benzidine 105.7%, monoacetylbenzidine 94.2 %, diacetylbenzidine 72.8 %, respectively. The difference of the recovery rates between the back-extraction into 0.1 M HCl and 0.1 M perchloic acid after basic hydrolysis are 101 % and 98.8 %, respectively. When the recovery rates of the urinary s amples of pH 3, pH 7, pH 12 at $25^{\circ}C$ and $-76^{\circ}C$ are compared for four weeks, there are no differences according to the temperature and the periods of storage. The above results show that the solid phase extraction and back-extraction by 0.1 M perchloric acid after basic hydrolys is are suitable for the analysis of benzidine metabolites. There are no difference of the recovery rates of the urinary samples stored at $25^{\circ}C$ and $-76^{\circ}C$ at pH 3, pH 7, pH 12, respectively for 28 days.
Ethylene glycol (EG) intoxication in dogs can pose a diagnostic challenge. We investigated the effect of a lethal dose of EG to the Shepherd on blood, urine test, and histopathologic observation. Shepherds were treated orally with EG at $10\;m{\ell}/kg$ body weight. Clinically, EG caused the vomition, depression of central brain. Anion gap was increased, which was decreased pH of blood, The blood osmorality was increased at 3 hours, and BUN and creatinine was increased at 24 hour significantly. The pH of urine decreased. The crystal of calcium oxalate appeared at 6 hours. The amount of crystals increased at 12 and 24 hours. Microscopically, the degeneration of proximal tubules were shown at 1 hour and finally progressed as acute tubular nephrosis at 24 hours. These results suggest that the blood and urine test accompanied with histopathological examination be helpful to investigate the EG intoxication.
Kim, I.B.;Ferke, P.R.;Powers, W.J.;Stein, H.H.;Van Kempe, T.A.T.G.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권8호
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pp.1131-1138
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2004
The objective of this study was to investigate the effects of different sources of Ca and P on urine and ileal digesta pH, and ammonia ($NH_{3}$), methane ($CH_{4}$), and odor emission. In experiment 1, eight pigs (commercial three-way cross; initial BW 67$\pm$3 kg) were arranged in a repeated 4$\times$4 Latin Square design. All pigs were equipped with a T-cannula in the distal ileum. Four corn-soybean meal based diets were formulated. Diet 1 was the control in which dicalcium phosphate (DCP) and limestone ($CaCO_{3}$) were used as the sources of inorganic P and Ca. In Diets 2 and 3, ${H_{3}}{PO_{4}}$, monocalcium phosphate (MCP), and $CaSO_{4}$replaced DCP and $CaCO_{3}$ as the inorganic sources of P and Ca. Diet 4 was similar to Diet 1 except that it was fortified with HCl to provide an acid load similar to that of diet 2. Urine and ileal digesta pH were determined in pigs fed each of these diets. In Exp. 1, urine pH decreased (p<0.05) in animals consuming diets containing ${H_{3}}{PO_{4}}$-$CaSO_{4}$ (5.85$\pm$0.38) and MCP-$CaSO_{4}$(5.73$\pm$0.30) compared with the DCP-$CaCO_{3}$ diet (6.89$\pm$0.24). In the pigs consuming ${H_{3}}{PO_{4}}$-$CaSO_{4}$, ileal digesta pH decreased compared with the control (5.52$\pm$0.28 vs. 6.66$\pm$0.17; p<0.05). Based on the results of Exp. 1, a total of four trials were performed in environmental chambers for determining how $NH_{3}$, $NH_{4}$, and odor were affected by the different dietary Ca and P sources (Exp. 2). In Exp. 2, pigs fed the ${H_{3}}{PO_{4}}$-$CaSO_{4}$ diet had decreased (30%) $NH_{3}$ emissions compared with the control (p<0.05). Also, a combination of MCP-$CaCO_{3}$-$CaCl_{12}$ decreased $NH_{3}$ emission by 15% (p<0.05). Emission of $CH_{4}$ was decreased only with the ${H_{3}}{PO_{4}}$-$CaSO_{4}$ diet with 14% (p<0.05). Odorant emission of phenolics and volatile fatty acids increased roughly three-fold with the DCP-$CaSO_{4}$ diet but was not affected by other test diets. In conclusion, acidogenic Ca and P sources in swine diets can decrease the urinary pH and reduce $NH_{3}$ and $CH_{4}$ emission from swine facilities.
Uremia is associated with defective protein binding of weakly acidic drugs, whereas the protein binding of basic drugs tends to be normal. The exact chemical nature of compound(s) and mechanism for these changes as yet is unknown, and has not been defined. Organic solvent extraction of pooled normal human urine following hydrolysis by hydrochloric acid produced an extract, which when added to normal human serum, was capable of inducing binding defects similar to those in uremia. Binding defects were observed with the weakly acidic drugs such as nafcillin, salicylate, sulfamethoxazole and phenytoin while the binding of the basic drugs such as trimethoprim and quinidine were unaffected. The binding defects induced by the hydrolyzed urine extract could readily be corrected by same organic solvent extraction of acidified serum and the defects could be transferred to the normal human serum using the organic solvent layer at the physiologic pH (7.4). Followed by reacidification ind extraction of the binding defects induced serum with the same solvent, separated several fractions were obtained on thin-layer chromatography. One of these fractions could reinduce the binding defects and this factor(s) is apparently weakly acidic compounds and tightly bound to serum at physiologic pH, but extractable at acidic pH, and its molecular weight range is approximately 500 or less similar to those seen in uremia. These findings strongly support the hypothesis that the drug binding defect in uremia is due to the accumulation of endogenous metabolic products which arc normally excreted by the kidneys but accumulate in renal failure.
An analytical method the determination of benzo(a)pyrene (BaP) and its hydroxylated metabolites, 1-hydroxybenzo(a)pyrene (1-OHBaP), 3-hydroxybenzo(a)pyrene (3-OHBaP), benzo(a)pyrene-4,5-dihydrodiol (4,5-diolBaP) and benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol (7,8-diolBaP), in rat urine and plasma has been developed by HPLC/FLD and GC/MS. The derivatization with alkyl iodide was employed to improve the resolution and the detection of two mono hydroxylated metabolites, 1-OHBaP and 3-OHBaP, in LC and GC. BaP and its four metabolites in spiked urine were successfully separated by gradient elution on reverse phase ODS $C_{18}$ column (4.6 mm I.D., 100 mm length, particle size 5 ㎛) using a binary mixture of MeOH/H₂O (85/15, v/v) as mobile phase after ethylation at 90 ℃ for 10 min. The extraction recoveries of BaP and its metabolites in spiked samples with liquid-liquid extraction, which was better than solid phase extraction, were in the range of 90.3- 101.6% in n-hexane for urine and 95.7-106.3% in acetone for plasma, respectively. The calibration curves has shown good linearity with the correlation coefficients (R²) varying from 0.992 to 1.000 for urine and from 0.996 to 1.000 for plasma, respectively. The detection limits of all analytes were obtained in the range of 0.01-0.1 ng/mL for urine and 0.1-0.4 ng/mL for plasma, respectively. The metabolites of BaP were excreted as mono hydroxy and dihydrodiol forms after intraperitoneal injection of 20 mg/kg of BaP to rats. The total amounts of BaP and four metabolites excreted in dosed rat urine were 3.79 ng over the 0-96 hr period from adminstration and the excretional recovery was less than 0.065% of the injection amounts of BaP. The proposed method was successfully applied to the determination of BaP and its hydroxylated metabolites in rat urine and plasma for the pharmacokinetic studies.
육성비육돈의 분뇨배설량 및 분뇨특성을 조사한 결과 시험기간중 사료섭취량은 3.07 kg/일.두, 음수량은 3.84kg/일.두였으며, 평균 분뇨 배설량은 각각 1.80kg/일.두, 2.76kg/일 .두로 총 4.57kg의 분뇨를 배설하는 것으로 조사되었다. 이화학적 특성에서 돈분의 수분 함량은 74.1%, pH 6.5, 질소 0.89%, $P_2O_5$ 0.46%였으며, BOD 및 SS는 각각 74,224m/l, 261,089mg/l였다. 돈뇨의 경우에는 수분 98.2%, pH 7.5, 질소 0.83%, P$_2$O$_{5}$ 0.05% 였으며, BOD 및 SS는 각각 6,054mg/l, 453mg/l였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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