대장균 트립토판 생성효소는 ${\alpha}_2{\beta}_2$ 복합체로 구성되며, 트립토판 생합성에서 최종 2 단계의 반응에 관여한다. 두 개의 소단위체는 분자 터널로 연결되어 있어, 기질 채널링이 일어난다. 활성 부위간 상호 조절하는 정교한 조절 기작에는 ${\alpha}$-루프 L6(${\alpha}L6$), ${\alpha}L2$, ${\alpha}L3$이 관여한다. 본 연구에서는 이 자리의 잔기치환체를 써서 소단위체에 특이적으로 결합하는 리간드의 영향을 조사하여 소단위체간 상호 조절기작에 따른 구조 변화를 살펴보았다. ${\alpha}TS$의 활성부위에 결합하는 D,L-${\alpha}$-glycerophosphate(GP)는 모든 잔기치환체를 야생형 수준으로 회복시켰다. ${\beta}TS$의 기질인 L-Ser는 다양한 효과를 나타낸다. 야생형과 NS104에서는 속도가 감소한 반면, GD51과 PH53에서는 거의 영향이 없었고, PT53와 DG56은 증가하였다. 이는 반응 중간 화학종의 분포의 변화와 연관될 가능성을 제시한다. GP와 L-Ser를 동시에 처리했을 때는 특이하게도 PH53는 가장 안정한 잔기치환체였다. 이는 Pro53가 소단위체간의 조절기작에서 중요한 역할을 하는 것을 시사한다.
A macromolecular fraction from fresh ginseng root containing mainly polysaccharide showed mild mitogenic activity in human cord blood lymphocytes. 2) When lymphocytes were transformed by Con A or PHA, this fraction could greatly enhance the activity of these lectin mitogens, thus showing a potentiation effect. 3) Although this macromolerular fraction contains saponin and is susceptible to trypsin digestion, it is probably a peptido-glycan in nature on account of its important carbohydrate content and thermal stability. 4) This fraction could not support cancer cell (EAT, K562) growth : its inhibitory effect on these cells remains to be explored.
Native and acetylated soybean protein with acetylation percentage of $25\%$ were incubated with glucose to induce Maillard reaction. Acetylation of ${\varepsilon}$-amino group of lysine residues changed the conformation of soybean protein. The direct uv spectrum of native and acetylated soybean protein showed conformational changes with accessibility of tyrosine and tryptophan residues increased. Acetylation suppressed Maillard reaction between soybean protein and glucose. Acetylated soybean protein showed improved water sorption, fat binding, foam formation, and emulsion activity of the protein, but depressed brown pigment development and trypsin digestion. Thus aceylation prevented deterioration of certain functional characteristics that occurred during storage, besides causing functional characteristics to be improved on its own.
Fibrinolytic proteases, piscivorase I (PI) and piscivorase II (PII), were isolated from Agkistrodon piscivorus piscivorus (eastern cotonmouth moccasin) venom using gel filtration on Bio-Gel P100 and ion-exchange chromatography on CM-Sepharose. The molecular welghts of two proteases were approximately 23400 and 29000. Their isoelectric points 6.6 and 8.5, respectively. The partial amino acid sequences of PI were characterized by tryptic digestion. PI readily cleaves the A${\alpha}$-and B${\beta}$-chaln of fibronogen, but PII rapidly cleaves A${\alpha}$-chain and more slowly the B${\beta}$-chain, They were activated by Ca$\^$2+/, Mg$\^$2+/ and Ba$\^$2+/, but inhibited by Zn$\^$2+/, Cu$\^$2+/ and Mn$\^$2+/. Two enzymes were also inhibited by cysten, ${\beta}$-mercapto -ethanol, and by metal chelators such as EDTA and EGTA, but not by benzamidine, PMSF, soybean trypsin inhibitor and aprotinin. They did not act like thrombin, plasmin and kallikrein, using specific chromogenllc substrates. Two protease did not induce platelet aggregation. PI showed low hemorrhagic activity at dosage of 50 $\mu\textrm{g}$.
This study was undertaken to determine whether dehulled defatted flour has an effect on postprandial plasma lipoprotein composition, hepatic lipid composition, enzyme and hormone levels in rats. Control(casein) and experimental (dehulled defatted soy flour)diets were fed to rats for 7 weeks. all animals (S. D. rats, male) were sacrificed 2 hrs after the feeding of 5g of each diet. Defatted soy flour feeding significantly lowered postprandial plasma total cholesterol, chylomicron/VLDL-cholesterol, hepatic cholesterol and triglyceride(TG) as compared with casein feeding, whereas no significant effect on plasma TG was observed. Intestinal kipase activity was elevated , whereas trypsin activity was suppressed in the dehulled defatted soy flour group. Plasma glucagon, thyroid hormone and hepatic HMG-coA reductase levels were not affected by diet treatment. These results hypothesize that dehulled defatted soy flour affects cholesterol digestion and absorption in guts, thus delaying the appearance of chylomicron cholesterol in plasma or affecting the disappearance of chylomicron remnant to high-density-lipoprotein(HDL).
A preliminary survey of Sarcocystis species in the slaughtered cattle in Seoul was undertaken during October through December 1987, using digestion diagnostic technique for the heart muscle specimens digested in 0.5% trypsin solution. Results indicated that 41.5% of 159 bovine hearts were infected with Sarcocystis proliferative forms. High frequencies in the exotic dairy cattle(42.2%) and the Korean native cattle(41.7%) were noticed in comparison with low frequency in the cross breed(25.0%). No differences were indicated between the sexes of the host animals, although an age difference was noticed as 48.9% in cattle older than four years in comparison with 39.0% and 37.1% in younger than two years and in two to four years, respectively.
Male-specific protein (MSP) is a soluble protein which is accumulated in high amounts In the hemolymph and other organs of adult male wax moth. The MSP was purified from adult male wax moth by gel filtration and reversed Phase column chromatography, and its amino acid sequence was determined. Three internal amino acid sequences of MSP were obtained by the in-gel digestion method using trypsin because of its blocked N-terminus. (omitted)
The synergistic effect of fetal calf serum (FCS) and chicken embryo extract (CEE) on protein synthesis of chicken embryo myoblasts was examined. Myoblasts were derived from chicken embryo cultured for 14 days by trypsin digestion and cultured in 5% $CO^2/95%$ air at $37^{\circ}C$. When myoblasts were cultured at the low level of cell density (20-50% of well), CEE enhanced the ability of FCS to stimulate protein synthesis of myoblasts. However, there was no significant effect of CEE to stimulate protein synthesis of myoblasts cultured at high level of cell density (100% of well).
Bacillus amyloliquefaciens의 extracellular $\alpha$-amylase는 세포질막에 결합된 ribosome에서 합성되며 이 때 ribosome은 nascent polypeptide쇄에 의해 막에 부착된 것으로 추측된다. $\alpha$-amylase 생산균주인 E. amyioiiquefaciens 야생주의 정상단백(MW, 58kDa)과 이 균주의 $\alpha$-amylase 구조유전자에 변이가 일어나 carboxy 말단이 결실된 변이주의 이상단백 (33kDa)은 동일조건하의 배양외액에서 그 효소활성이 검출됨을 볼 때, $\alpha$-amylase의 carboxy 말단에는 막 투과의 신호가 없는 것으로 생각된다. 그러나 이들 양균주의 대수증식기 세포에 puromycin을 20$\mu\textrm{g}$/$m\ell$까지 가하여 6시간 동안 처리한 결과 균의 사멸에는 영향을 미치지 않았으나 extracellular $\alpha$-amylase 활성은 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서도 동일양상으로 감소하였다. 이 감소요인은 puromycin 처리시 막결합 ribosome에서의 막과 ribosome의 가교로 작용할 것으로 예상되는 nascent poly peptide 합성이 중단되므로 막으로부터 ribosome이 해리되어 $\alpha$-amylase의 분비가 억제된 것으로 추측된다. 이 현상은 50mM의 magnesium의 첨가효과 가 약하게 나타났기 때문에 ribosome은 nascent Polypeptide의 가교로 막에 부착되어 있는 것으로 생각된다. 또 Iysozyme 처리에 의해 세포벽을 분해한 protoplas가 trypsin을 함께 처리하므로서 세포외액의 $\alpha$-amylase 활성이 상실됨은 막의 외부로 protruding되는 nascent polypeptide가 trypsin에 의해 분해되기 때문으로 생각된다. 3차 구조를 형성한 extracellular $\alpha$-amylase의 경우 trypsin 내성임을 감안할 때 이 분자가 세포막 통과 직후, 세포벽을 통과하기 이전에 folding이 이루어져서 그 후 성숙된 단백으로서 세포벽을 통과하는 것으로 믿어진다.
가열 및 동결저장이 오징어, 굴, 새우 및 명태의 in vitro 소화율과 trypsin indigestible substrate (TIS) 함량 변화에 미치는 영향을 실험한 결과는 다음과 같다. Boiling 했을 때 최고의 운 in vitro 소화율을 나타내는 시간은 오징어 1분, 내장을 제거한 굴 0.5분, 내장을 제거하지 않은 굴은 1분이었고, 명태는 5분 이었으며, 오징어와 굴은 부위에 따라 소화율은 다르게 나타났다. 최고의 in vitro 소화율을 나타내는 steaming 조건은 오징어는 $100^{\circ}C$에서 1분, 굴은 $88^{\circ}C$에서 1분이었으며, 명태는 $100^{\circ}C$에서 $1{\sim}2.5$분이었다. TIS는 진시료에서 in vitro 소화율과 역상관관계를 가지며 변화하였다. 동결건조한 시료가 다른 건조품보다 현저하게 높은 in vitro 소화율을 보였으나, 내장을 제거했거나 지방함량이 낮은 시료를 천일건조했을 때도 동결건조시료에 버금가는 in vitro 소화율을 나타내었다. 동결저장은 지방함량이 낮은 시료의 in vitro 소화율의 저하 및 TIS함량 증가에 효과적이었으나, 지방함량이 높아 산패가 심하게 진행된 시료에는 현저한 효과를 볼 수 없었다. 지방함량은 수산식품단백질을 가열처리했거나 저장했을 때의 소화율 변화에 결정적인 영향을 미침을 알 수 있었으며, 4가지의 효소를 이용한 multi-enzyme digestion technique은 수산식품단백질의 소화율 변화를 측정함에 있어 아주 민감하고 유용한 방법으로 판명되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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