본 연구는 다시마 가공식품과 증간소재를 개발하기 위하여 다시마의 연화방법을 검토하였다. 그 결과 가열하면서 sodium triphospto를 0.3%첨가한 것이 연화에 가장 좋은 효과를 나타내었으며 이 때 다시마의 유연성과 퍼짐성도 좋은 것으로 나타났다. 다시마의 블랜칭은 microwave를 사용하는 것이 연화에 좋았으며, 그 정도는 microwave>스팀>끓는 물 순이었다. 또한 블랜칭할 경우 sodium triphosphate를 0.3% 첨가하면 연화에 시너지효과가 나타났다. 색깔의 변화는 p<0.05 수준에서 블랜칭 방법과 연화제 첨가량에 대한 유의성은 확인되었다.
A one-pot process of enzymatic synthesis of deoxythymidine-5'-triphosphate (5'-dTTP) employing whole cells of recombinant Escherichia coli coexpressing thymidylate kinase (TMKase) and acetate kinase (ACKase) was developed. Genes tmk and ack from E. coli were cloned and inserted into pET28a(+), and then transduced into E. coli BL21 (DE3) to form recombinant strain pTA in which TMKase and ACKase were simultaneously overexpressed. It was found that the relative residual specific activities of TMKase and ACKase, in pTA pretreated with 20 mM ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) at 25℃ for 30 min, were 94% and 96%, respectively. The yield of 5'-dTTP reached above 94% from 5 mM deoxythymidine 5'-monophosphate (5'-dTMP) and 15 mM acetyl phosphate catalyzed with intact cells of pTA pretreated with EDTA. The process was so effective that only 0.125 mM adenosine-5'-triphosphate was sufficient to deliver the phosphate group from acetyl phosphate to dTMP and dTDP.
A hypothetical 21.0 kDa protein (ORF O197) from Escherichia coli K-12 was cloned, purified, and characterized. The protein sequence of ORF O197(termed EcO197) shares a 33.5% identity with that of a novel NTPase from Methanococcus jannaschii. The EcO197 protein was purified using Ni-NTA affinity chromatography, protease digestion, and gel filtration column. It hydrolyzed nucleoside triphosphates with an O6 atom-containing purine base to nucleoside monophosphate and pyrophosphate. The EcO197 protein had a strong preference for deoxyinosine triphosphate (dITP) and xanthosine triphosphate (XTP), while it had little activity in the standard nucleoside triphosphates (dATP, dCTP, dGTP, and dTTP). These aberrant nucleotides can be produced by oxidative deamination from purine nucleotides in cells; they are potentially mutagenic. The mutation protection mechanisms are caused by the incorporation into DNA of unwelcome nucleotides that are formed spontaneously. The EcO197 protein may function to eliminate specifically damaged purine nucleotide that contains the 6-keto group. This protein appears to be the first eubacterial dITP-and XTP-hydrolyzing enzyme that has been identified.
Arissawa, Marcia;Felcman, Judith;Herrera, Juan Omar Machucca
BMB Reports
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제36권3호
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pp.243-250
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2003
In this paper we investigate (using AM1 semi-empirical as well as HF methods at the STO-3G, 3-21G, 6-31G, 6-$31G^*$ and 6-31+$G^{**}$ level) the conformations, geometrical parameters, Mulliken charges, and solvation effects of the triphosphate form of AZT (AZTTP), as well as the thymidine nucleotide (dTTP) structure. Our calculated geometrical parameters and Mulliken charges, with and without solvation effects, are correlated with recent experimental results.
물리적 항균효과를 나타내는 4차 암모늄 화합물을 치과 진료실 미생물 주요 오염 구역에 도포 후 시기별 오염도의 변화를 측정하고자 하였다. 4개의 국내외 치과병의원에서 미생물 감염이 쉬운 유닛체어 핸들, 타구대 표면, 핸드피스 거치대 등에 ATP (adenosine triphosphate) 모니터링 시스템과 ATP 표면검사 테스트 키트를 사용하여 항균제 도포 전과 후 시기별 오염도를 비교 측정하였다. 4차 암모늄 화합물 도포 전 구역별 미생물 오염도는 치과의사가 주로 사용하는 핸드피스 거치대가 가장 높았다. 도포 후 시기별 오염도의 변화를 분석한 결과 대부분의 진료실에서 현저한 오염도의 감소를 보였으며, 대략 4-6개월 정도 효과가 지속되는 양상을 보였다. 항균효과의 지속성과 최소량의 화학성분 노출이라는 장점으로 향후 대단위 후속연구를 통해 4차 암모늄 화합물이 치과 진료실에서 효과적으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
본 연구에서는 $BH_4$를 대체할 수 있는 유용물질인 세피아프테린의 생산성 증대를 위하여 GTP 생합성 경로의 유전자들을 동시에 발현할 수 있는 재조합 대장균을 제작하였다. 세피아프테린을 생산할 수 있는 재조합 대장균에서 gmk, ndk 및 guaA-guaB 유전자를 동시에 발현함으로써 세포 내 GTP의 농도가 대조구에 비해 약 200% 이상 증가하였고 $126.1{\pm}9.3mg/l$의 세피아프테린이 생산되었는데 이 결과는 대조구보다 세피아프테린의 생산량이 약 43% 증가된 것이다. GTP 생합성에 관여하는 개별 유전자의 단독 발현 또는 두 가지 유전자의 동시 발현은 세포 내 GTP 농도 향상 큰 영향을 미치지 못했지만 네 가지 유전자 모두를 동시에 발현하는 경우는 세포 내 GTP 농도를 유의적으로 증가시킨다는 것이 확인되었다. 결론적으로 세포 내 GTP 생합성에 관여하는 guaA-guaB, gmk 및 ndk 유전자를 동시에 발현함으로써 재조합 대장균에서 세피아프테린의 생산성 증가를 달성하였다.
Kim, Joo-heon;Jeon, Je-cheol;Lee, Sang-kil;Lee, Su-jin;Lee, Younggeon;Won, Jinyoung;Kang, Jae seon;Hong, Yonggeun
대한수의학회지
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제47권4호
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pp.371-378
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2007
To understand the role of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptor in cortex region of kidney and renal artery, molecular and functional analysis of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptor by pharmacophysiological skill in conventional swine tissues were performed. In functional analysis of $P_{2Y}$ receptor for vascular relaxation, 2-methylthio adenosine triphosphate, a strong agonist of $P_{2Y}$ receptor, induced relaxation of noradrenaline (NA)-precontracted renal artery in a dose-dependent manner. Strikingly, relaxative effect of ATP, 2-msATP, agonists of $P_{2Y}$ receptor, abolished by treatment of reactive blue 2, a putative $P_{2Y}$ receptor antagonist. In contrast, no significant differences of gene encoding $PM_{2X}/P_{2Y}$ and protein expression in immortalized suprachiasmatic nucleus from brain, primary isolated vascular smooth muscle cells from renal artery of pigs and HEK293 from human embryonic kidney under with/without adenosine triphosphate were observed. Taken together, the relationship between molecular and functional characteristic of $PM_{2X}/P_{2Y}$ receptors in conventional pig should be considered that they are another important factor which regulate the kidney function in swine. Based on this study, we propose the purinergic receptor as well as adrenergic and cholinergic receptors is an essential component of the renal homeostasis.
The aims of this study were to investigate the effect of adenosine triphosphate (ATP), which has been known as the neurotransmitter of nonadrenergic, noncholinergic nerves, and the source of $Ca^{\sharp}$ in the effect of ATP on the isolated renal artery of pig. The results of this study were summarized as follows: 1. ATP caused the contraction and the contractile responses were increased in a dose-dependent manner between the concentration of ATP $2{\times}10^{-3}M$ and $10^{-2}M$ on the isolated renal artery of pig. 2. The contractile responses induced by ATP $(5{\times}10^{-3}M)$ were not blocked by pretreatment with cholinergic receptor blocker (atropine, $10^{-6}M$), $\alpha$-adrenergic recptor blocker(phentolamine, $10^{-6}M$) or $\beta$-adrenergic receptor blocker (propranolol, $10^{-6}M$), and $H_1$-receptor blocker (pyrilamine, $10^{-6}M$) or $H_2$-receptor blocker (cimetidine, $10^{-6}M$) on the isolated renal artery of pig. 3. The contractile responses induced by ATP $(5{\times}10^{-3}M)$ were not appeared in $Ca^{\sharp}$-free medium. As the concentration of $Ca^{\sharp}$ in $Ca^{\sharp}$-free medium was increased, the contractile responses induced by ATP $(5{\times}10^{-3}M)$ were enhanced but were completely inhibited by pretreatment with $Ca^{\sharp}$-channel blocker, papaverine $(5{\times}10^{-5}M)$ or verapamil $(5{\times}10^{-5}M)$ on the isolated renal artery of pig.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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