In this study, it was tested whether lead intoxication could change thiamine content and the thiamine related biochemical factor such as activity of transketolase in the brain, and whether the changes of the myelin composition :s well as the seizure threshold induced by lead intoxication in rats be related to these changes of thiamine status and thiamine related biochemical factors. In addition, it was also tested whether administration of excessive thiamine can reverse the toxic manifestation of lead in lead intoxicated animals. Five groups of Wistar rats were prepared: 1)Control group, 2)lead treated group, 3)thiamine treated group, 4)lead plus thiamine treated group and 5)thiamine deficiency group. Each group of animals was divided into three subgroups based on ages: 3, 7 and 10 weeks of age subgroups. Lead concentration, thiamine content, the activity of transketolase and myelin composition in brain areas and threshold of electric shock seizure were tested in each group. Lead concentrations in all brain regions of lead treated group were higher than those of control group, and those of lead plus thiamine treated group were significantly lower than those of lead treated group. Thiamine contents in the brain regions of lead treated group were significantly lower than those of control group, and those of lead plus thiamine treated group were recovered back to those of control group. Activities of transketolase of lead treated group were significantly lower than those of control group, while those of lead plus thiamine treated group were recovered back to those of control group. The cases of which was observed with the concomitant changes of thiamine content and transketolase activity in myelin content or constituent of all the brain regions tested were total amount of myelin protein in the cerebellum of 3 week old rats, and phospholipid in the cerebellum of 3 week old rats and the telencephalon of 16 week old rats. Thresholds of the electroshock seizure of lead-treated group and thiamine-deficient group in 3, 7 week old rats were significantly lower than those of control group, while those of the lead plus thiamine-treated group were similar to those of control group. Changes of the electroshock seizure threshold induced by lead intoxication were observed in 3 week and 7 week old animals with the concomitant decrement of thiamine content in all the brain regions tested. These observations were reversed by the supplementation with thiamine to those animals. However, the changes of seizure threshold induced by lead intoxication corelated with the changes of thiamine contents as well as. transketolase due to lead intoxication. The changes of myelin phospholipid as one of myelin composition and those of myelin Protein content only in the cerebellum of 3 week old rats correlated with the changes of the seizure threshold as well as thiamine content due to lead intoxication. The results from the present study may indicate that neurotoxicity of lead in rats may be mediated at least in part through the changes of thiamine status. Such changes of thiamine status may induce the changes of myelin composition such as myelin phospholipid and those of myelin protein content especially in the cerebellum of 3 week old rats which may eventually affect the threshold of seizure.
Park, Yong-Cheol;Lee, Hae-Jin;Kim, Chang Sup;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권4호
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pp.560-564
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2013
${\small{D}}$-Ribose is a value-added five-carbon sugar used for riboflavin production. To investigate the effects of oxygen supply and mixed sugar concentration on microbial production of ${\small{D}}$-ribose, a transketolase-deficient Bacillus subtilis SPK1 was cultured batch-wise using xylose and glucose. A change of agitation speed from 300 rpm to 600 rpm at 1 vvm of air supply increased both the xylose consumption rate and ${\small{D}}$-ribose production rate. Because the sum of the specific consumption rates for xylose and glucose was similar at all agitation speeds, metabolic preferences between xylose and glucose might depend on oxygen supply. Although B. subtilis SPK1 can take up xylose and glucose by the active transport mechanism, a high initial concentration of xylose and glucose was not beneficial for high ${\small{D}}$-ribose production.
Thiamin has been considered as one of the most susceptible vitamin to be deficient marginally or severely. According to Korean national health and nutrition survey report, daily dietary intake of thiamin in Korea has been known to be enough, showing 126.6% of RDA. However, studies about specific groups have reported a slight difference, showing the distribution from 50 to 131% of RDA. (omitted)
By spectrophotometric assay method, the following enzymes could be detected in Dunaliella tertiolecta and Chlorella pyrenoidosa cell-free extracts: Hexokinase; Glucose-6-phosphate, 6-Phosphogluconate and Triosephosphate dehydrogenase; Transketolase; Phosphogluco and Ribosephosphate isomerase; Phosphoglucomutase; Phosphofructokinase; Fructosediphosphate aldorase and Ribulosephosphate 3-epimerase. Such enzymes are in accordance with the proposed pathway of glucose catabolism by D. tertiolecta as well as C. pyrenoidosa. Also, it could be estimated, under the presence of NADP, that pentose phosphate pathway were more active than glycolytic pathway in D. tertiolecta cell-free systems.
Kim, Tae-Hyun;Namgoong, Suk;Kwak, Joon-Hyeok;Lee, Se-Yong;Lee, Heung-Shick
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.789-796
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2000
In order to analyze the effects of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL expression in a tryptophan-producing Escherichia coli, a series of plasmids carrying the genes were constructed. Introduction of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL into the E. coli strain resulted in approximately 10-20 fold increase in the activities of transketolase, the feedback inhibition-resistant 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate synthase, and shikimate kinase. Expression of $aroF^{FBR}$ in the aroB mutant strain of E. coli resulted in the accumulation of 10 mM of 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate (DAHP) in the medium. Simultaneous expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in the strain further increased the amount of excreted DAHP to 20 mM. In contrast, the mutant strain which has no gene introduced accumulated 0.5 mM of DAHP. However, the expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in a tryptophan-producing E. coli strain did not lead to the increased production of tryptophan, but instead, a significant amount of shikimate, which is an intermediate in the tryptophan biosynthetic pathway, was excreted to the growth medium. Despite the fact that additional expression of shikimate kinase in the strain could possibly remove 90% of excreted shikimate to 0.1 mM, the amount of tryptophan produced was still unchanged. Removing shikimate using a cloned aroL gene caused the excretion of glutamate, which suggests disturbed central carbon metabolism. However, when cultivated in a complex medium, the strain expressing tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL produced more tryptophan than the parental strain. These data indicate that additional rate-limiting steps are present in the tryptophan biosynthetic pathway, and the carbon flow to the terminal pathway is strictly regulated. Expressing tktA in E. coli cells appeared to impose a great metabolic burden to the cells as evidenced by retarded cell growth in the defined medium. Recombinant E. coli strains harboring plasmids which carry the tktA gene showed a tendency to segregate their plasmids almost completely within 24h.
It was attempted in this study to assess the vitamin $B_{1},\;B_{2}$, and $B_6$ status in tissue by determination of erythrocyte transketolase (TK), glutathione reductase (GR), and aspartate aminotransferase (AST) activities, and their activation by their respective coenzymes, thiamine pyrophosphate, flavin-adenine dinucleotide, and pyridoxal-5-phosphate. The activities of erythrocyte enzymes were stable for more than 30 days when erythrocyte had been stored at $-20^{\circ}C$ and affirmed that the enzyme activities were more stable in the case of deep frozen sotrage of erythrocytes rather than hemolysates. The assay procedures involving ultraviolet kinetic analysis with continuous monitoring for each of enzymes have good within-batch and between-batch precisions and will be avalable in the routine laboratories for the nutritional and clinical surveys. Activity coefficient of TK, GR, and AST was studied in healthy medical students (fifteen men and twelve women, between 21 and 30 years old) on an unrestricted diet. The mean activity coefficient of TK, GR, and AST were 1.18, 1.35, and 2.01 for men, and 1.14, 1.33, and 1.83 for women, respectively. And the upper limit of normal (mean+2SD) were 1.52, 1.69, and 2.61 for men, and 1.50, 1.61, and 2.37 for women, respectively.
The purpose of this study is to evaluate the nutritional status of vitamin and minerals in the patients with alcoholic liver disease and to obtain the materials for nutritional education for alcoholics. The subjects consist of 80 patients with alcoholic liver cirrhosis(ALC) and 12 patients with alcoholic fatty liver(AFL). The control group included 57 alcoholics without liver disease(A), 32 patients with viral liver cirrhosis(VLC) and 194 normal men(NL). Biochemical evaluation of nutritional status was investigated by the analysis of blood samples. The frequency of vitamin B1 deficiency in the ALC, AFL and A groups as indicated by the erythrocyte transketolase activity coefficient were 46.0%, 66.7% and 57.9% respectively. The frequency of vitamin B2 deficiency in the ALC, AFL and A groups as indicated by the erythrocyte glutathione reductase activity coefficient were 9.8%, 8.3% and 38.6% respectively. Vitamin A deficiency was not detected in the alcoholic subjects. The frequency of vi tamin E deficiency in ALC, AFL and A were 96.3%, 66.7% and 86.0% respectively. The levels of plasma lipid peroxidation products were significantly higher in the alcoholic subjects than in the normal subjects. The frequency of subjects below normal range of hemoglobin were 85.0% in ALC, 50.0% in AFL and 31.6% in A. The frequency of copper deficiency in the ALC, AFL and A groups were 48.4%, 16.7% and 17.5% respectively. The frequency of zinc deficiency in the ALC, AFL and A groups were 83.8%, 41.7% and 66.7% respectively. Overall, the vitamin and minerals status of the alcoholic subjects in this study was evaluated to be very poor on the basis of biochemical assessments. The results suggest that alcohol abuse and poor dietary intake could cause malnutrition and may be important risk factors in causing alcoholic liver disease in alcoholics. In addition, vitamin B1, vitamin B2, Cu, Fe and antioxidant supplementation may be effective in nutritional therapy for chronic alcoholics.
Objectives : Hippocampus, a region of temporal lobe, plays an important role in the pathogenic mechanisms of brain diseases such as Alzheimer's disease, depression and temporal lobe epilepsy. This research is designed to investigate hippocampal changes after acupuncture stimulation at Shinmun(HT7) using 2-dimensional gel electrophoresis(2-DE). Methods : On postnatal-day 15, rat pups were randomly devided into Normal(NOR) or HT7 group. All of Pups kept with their mothers for 7 days, but pups in HT7 group received acupuncture stimulation at HT7 daily. On postnatal-day 21, hippocampus of each rat pup was dissceted 30 minutes after last acupuncture stimulation and the protein expressions were investigated using 2-DE. Results : After acupuncture stimulation at HT7, expression of 20 proteins were significantly increased. Succinate semialdehyde dehydrogenase, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase-like, transketolase, aconitate hydratase and phosphoglucomutase-1 were related to glucose methabolism. Eukaryotic initiation factor(eIF) 4A-II, eIF 4A-III, mitochondrial Tu translation elongation factor and chain A of crystal structure of the 70-Kda heat shock cognate protein involve in the protein synthesis in ribosome. Tubulin ${\beta}$-4 chain, tubulin T ${\beta}$-15 and tubulin ${\alpha}$-1B chain comprise cytoskeleton. Glutathione S-transferase(GST) ${\omega}$-1, GST P and GST Yb-3 can reduce oxidative stress. ${\beta}$-soluble N-ethylmaleimide-sensitive fusion protein attachment protein is required for vesicular transport between the endoplasmic reticulum and the Golgi apparatus, glycerol-3-phosphate dehydrogenase plays a major role in lipid biosynthesis, creatine kinase U-type catalyses the conversion of creatine and consumes adenosine triphosphate to create phosphocreatine and adenosine diphosphate. Platelet-activating factor acetylhydrolase IB subunit alpha and voltage depedent anion-selective channel protein 2 were also increased. Conclusions : The results suggest that acupuncture stimulation at HT7 may enhance glucose and lipid metabolism, protein synthesis, cytoskeletal substance and anti-oxidative stress in hippocampus.
Osmotic pressure is a critical factor for erythritol production with osmophilic yeast. Protein expression patterns of an erythritol-producing yeast, Yarrowia lipolytica, were analyzed to identify differentially-expressed proteins in response to osmotic pressure. In order to analyze intracellular protein levels quantitatively, two-dimensional gel electrophoresis was performed to separate and visualize the differential expression of the intracellular proteins extracted from Y. lipolytica cultured under low (3.17 osmol/kg) and high (4.21 osmol/kg) osmotic pressures. Proteomic analyses allowed identification of 54 differentially-expressed proteins among the proteins distributed in the range of pI 3-10 and 14.4-97.4 kDa molecular mass between the osmotic stress conditions. Remarkably, the main proteins were involved in the pathway of energy, metabolism, cell rescue, and stress response. The expression of such enzymes related to protein and nucleotide biosynthesis was inhibited drastically, reflecting the growth arrest of Y. lipolytica under hyperosmotic stress. The improvement of erythritol production under high osmotic stress was due to the significant induction of a range of crucial enzymes related to polyols biosynthesis, such as transketolase and triosephosphate isomerase, and the osmotic stress responsive proteins like pyridoxine-4-dehydrogenase and the AKRs family. The polyols biosynthesis was really related to an osmotic response and a protection mechanism against hyperosmotic stress in Y. lipolytica. Additionally, the high osmotic stress could also induce other cell stress responses as with heat shock and oxidation stress responses, and these responsive proteins, such as the HSPs family, catalase T, and superoxide dismutase, also had drastically increased expression levels under hyperosmotic pressure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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