• 미생물학회지
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• 제28권2호
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• pp.104-108
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• 1990

Ti-plasmid에 의하여 식물체에 종양이 형성되기 위해서는 맨먼저 Agrobacteriuin tumefariens가 식물세포에 부착되어야 하는데, 이에 필요한 유전자들은 세균의 염색체 DNA내에 존재한다. 이들 유전자를 클로닝하기 위하여 transposon 쑤5를 사용하여 A. tumefaciens A5512에 돌연변이를 유발시켰다. 그 결과 식물세포에 부착하지 못하며, 종양을 유발시키지 못하는 두개의 돌연변이체를 얻었다. 이 두 돌연변이체 중 하나로부터 세균이 식물세포에 부착하는데 관여하는 염색체 DNA내의 종양 유발 지역을 클로닝하였다.

• 한국식물병리학회지
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• 제11권1호
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• pp.80-86
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• 1995

The cDNA of CMV-As satellite RNA was introduced into tobacco plants (Nicotiana tabacum cv. Samsun NN) using a binary Ti plasmid vector system of Agrobacterium tumefaciens. The cDNA of satellite RNA introduced into tobacco plants was detected by polymerase chain reaction (PCR) and molecular hybridization analyses. Symptom development was distinctly suppressed in the transgenic tobacco plants when inoculated with CMV-Co. CMV concentration in the transgenic tobacco plants was decreased to 1/40 of non-transgenic tobacco plants. The kanamycin resistance gene of the transgenic tobacco plants was also detected in the progeny.

• 한국식물학회:학술대회논문집
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• 한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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• pp.51-62
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• 1987

Higher plant transformation vector systems are mainly developed based on the natural biosystems which infecting higher plants. Two major groups attracting much of the research are Cauliflower mosaic virus and Agrobacterium tumefaciens. Cauliflower mosaic virus has a double stranded genome, and a portion of the genome can be substituted for a foreign DNA segment without loosing the ability of infection. A. tumefaciens carries a large plasmid. Ti plasmid whose portion can be substitute and trasferred into the plant chromosome.

• 한국토양비료학회지
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• 제33권4호
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• pp.253-260
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• 2000

Agrobacterium tumefaciens에 존재하는 Ti 플라스미드의 virulence(vir)유전자들은 상처난 식물세포에서 분비되는 페놀화합물에 의해서 발현이 유도된다. 본 연구에서는 3종류의 A. tumefaciens들을 대상으로 8종의 페놀화합물들 중에서 vir유전자의 발현에 영향을 미치는 페놀 화합물들의 종류와 이들 균주에서 발현되는 vir유전자의 활성을 조사하였다. A. tumefaciens MW102에 존재하는 vir유전자는 4-hydroxyacetophenone, phenol, catechol, resorcinol과 vanillin등 5종류의 페놀화합물들에 의해서 높게 발현된 반면, 다른 A. tumefaciens Mw105와 Mw108의 vir유전자들은 이들 페놀화합물들에 의해서 매우 낮게 발현되거나 또는 발현되지 않았다. 또한 A. tumefaciens Mw102는 A. tumefaciens Mw105와 Mw108의 vir유전자를 매우 높게 발현시키는 acetosyringene에 의해서는 매우 낮게 발현되었다. 따라서 vir유전자의 발현을 유도시키는 능력은 Ti 플라스미드들의 종류와 페놀화합물들의 종류에 따라서 서로 다르다는 결과를 얻었다. 결과적으로 vir유전자 유도능력의 차이는 vir A 유전자에서 발현되는 sensor단백질의 차이 때문일 것으로 사료된다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제2권1호
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• pp.175-181
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• 1985

Polyethylene glycol(PEG) 처리에 의한 Agrobacterium tumefaciens spheroplast와 연초 엽육 protoplast의 상호작용을 연구하기 위하여, 효소적 방법으로 분리한 연초엽육 protoplast와 carbenicillin 및 lysozyme의 처리에 의해 제조된 Agrobacterium tumefaciens ATCC 15955 spheroplast를 섞어서 polyethylene glycol (PEG) 및 high pH-high $Ca^{2+}$ buffer를 처리한 후 시료를 취하여 전자현미경으로 관찰한 결과, spheroplast는 초기 단계에서 protoplast membrane에 부착하고, 시간이 경과함에 따라 endocytosis에 의해 protoplast의 세포질 내부로 도입된 다음, 점차로 그 형체(cell integrity)가 파괴되어지는 것을 관찰할 수 있었다. 이러한 관찰 결과로부터 spheroplast는 polyethylene glycol(PEG)에 의해 protoplast내부로 endocytosis되어짐을 알 수 있었다.

• 식물조직배양학회지
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• 제21권6호
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• pp.353-356
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• 1994

사람 B형 간염 바이러스의 pre-S2 표면항원에 결합하는 키메라 항체 유전자(카파 및 감마사슬의 cDNA클론)를 식물체에서 발현시키기 위해 식물체 발현벡터인 pBKS-1에 XbaI 자리를 이용하여 클로닝하였다. 이들 유전자를 포함하는 대장균의 플라스미드 핵산을 추출하여 아그로박테리움에 형질전환 시켰다. 다음 담배의 조직절편과 아그로박테리움을 공동배양함으로써 담배의 형질 전환을 시도하였다. 카나마이신이 포함된 신초유기배지에서 나온 신초를 시료로 하여 Western blot을 실시함으로써 이들 유전자가 형질전환 담배에서 안정하게 발현됨을 확인하였다.

• 고려인삼학회:학술대회논문집
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• 고려인삼학회 2004년도 추계 학술대회 및 정기총회
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• pp.50-52
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• 2004

Introduce of gene connected with disease and transformation system of ginseng, Squalene systhase(PSS) gene cloned from and disease resistant gene were carried out for expression and transformation of plant using Agrobacterium. PSS of 35S-35S-AMV-PSS-Tnos, has been constructed which were mobilized into Agrobacterium tumefaciens strain MP 90 disarmed Ti-plasmid. PSS gene were introduced into the binary vector pRD 400. The transgenic ginseg plants were propagated using repetitive secondary embryogenesis and introduced NPTII and PSS genes of the transgenic ginseng were successfully indentified by the PCR and survival test on the medium.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.822-828
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• 2004

Nopaline-type Agrobacterium tumefaciens strain C58 cannot utilize octopine (Oct) as the sole carbon and nitrogen sources. This strain harbors two plasmids; a virulent plasmid, pTiC58, and a megaplasmid, pAtC58. From strain NT1, which is a derivative of C58 harboring only pAtC58, we isolated spontaneous mutants that utilize Oct as the sole nitrogen source. These Oct-catabolizing mutants, however, could not utilize the opine as the sole carbon source. In contrast, strain UIA5, a plasmid-free derivative of C58, could not give rise to such mutants. The mutations isolated from NT1 were mapped to socR in pAtC58, which is a negative regulator of the soc operon responsible for the uptake and catabolism of an Amadori opine, deoxyfructosyl glutamine (Dfg). A derivative of UIA5 carrying a clone of the soc operon with a transposon inserted in socR also utilizes Oct as the sole nitrogen source. However, UIA5 harboring the operon with mutations in each of the structural genes in the soc operon, socA, B, C, and D, lost the ability to generate spontaneous Oct-utilizing mutants, suggesting that soc genes in pAtC58 are required for the utilization of Oct as a nitrogen source, and that derepressed expression of these genes allows cells to utilize Oct. In contrast, Oct-catabolizing mutants derived from C58, which grew using Oct as the sole nitrogen source, could also utilize the opine as the sole carbon source. These mutants did not carry any detectable mutations in socR or the region upstream to the gene in pAtC58, suggesting that mutations occurring elsewhere in the genome, most likely in pTiC58, allow the uptake and catabolism of the opine.

• Applied Biological Chemistry
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• 제28권2호
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• pp.92-97
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• 1985

Agrobacterium tumefaciens A 136에 자외선은 조사(照射)하여 Ti-plasmid 숙주로 이용할 수 있는 arginine 영양요구주를 선발하고자 하였다. A. tumefaciens의 생육을 600nm에서의 흡광도(吸光度)로 측정할 때 TY배지에서 2% 접종시 7시간 부터 16시간 사이에 대수기를 보였고 generation time은 4.8시간이었다. $800{\mu}w/cm^2$의 자외선 강도로 $30{\sim}50$초 조사(照射)에서 $1{\sim}0.1%$의 생존율을 보였다. 자외선 조사(照射)로 mutation을 유도한 다음 5,000개의 colony에서 15개의 mutants를 얻었으며 그 중 2개는 arginine 영양요구주였고 3개는 asparagine 영양요구주였다.

• KSBB Journal
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• 제7권3호
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• pp.191-200
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• 1992

토양 시료로부터A. tumefaciens를 분리 동정하고 이를 옥수수의 형질전환에 이용하기 위하여 binary vector를 이용하여 형질전환시킨 후 옥수수의 중배축 조직과 공존배양을 실시하였다. Schroth의 선택배지에서 선별된 colony들은 단일 형태를 나타내었다. 분리 균주는 해바라기 유식물의 잎조직에 종양을 형성하였으며, 거대 plasmid를 가지고 있었는데 이는 대조균주인 C58이나 Ach5의 plasmid와는 다른 종류였다. 분리균주들에 의해 형성된 tumor의 형태 및 균주의 생리, 생화학적 특성들에 의하여 공시균주를 A. tumefaciens biovar 1으로 동정하였으며 nopaline 형으로 추정하였다. 분리 균주중 AK204를 사용하여 옥수수 조직을 형질전환시키기 위하여 선택maker를 가지고 있는 binary vector(pGA642)를 균주내로 전이 시켰다. 이로 인하여 형질전환된 AK204를 옥수수 중배축 조직과 공존배양하므로서 옥수수 조직세포를 형질전환 시킨 결과, 1차적으로 Km에 저항성을 띠는 형질전환체를 선발할 수 있었으며, 그들의 가용성 단백질의 PAGE pattern이 변화되었음을 확인하였다.