Competitive polymerase chain reaction (cPCR) was used to develop a direct enumeration method of Listeria monocytogenes in pork meat. Pork meat was artificially inoculated with L. monocytogenes and DNA was extracted using guanidine thiocyanate-phenol-chloroform and subjected to PCR amplification. Sixteen primer sets for L. monocytogenes hlyA gene were tested for sensitive detection and the DG69/DG74 primer set was selected. The detection limit achieved with this primer set was as low as 860 colony-forming units (cfu) per 0.1 g of pork meat. When the samples were cultured at $30^{\circ}C$ for 16 hr in Brain Heart Infusion (BHI) medium, even a single bacterium could be detected with this primer set by PCR. For cPCR, the hlyA gene, which features a 148 bp-deletion, was cloned in the pGEM-4Z vector. A known amount of competitor DNA which has the same primer binding sites was co-amplified with L. monocytogenes total DNA from the artificially inoculated pork meat. The cell-number determined by cPCR was approximately equal to cfu from the Most Probable Number (MPN) method. The whole procedure took only 5 hr.
Chon Han Kim;Chan Ho Jee;Ki Tae Sung;Chang Ung Joung
Journal of the Korean Chemical Society
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v.33
no.2
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pp.208-214
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1989
A method for the simultaneous determination of copper and cobalt by spectrophotometry has been described. The procedure involves the co-extraction of Cu(Ⅱ) and Co(Ⅱ) from 0.3M HCl into methyl isobutyl ketone as the ion-pairs formed between their thiocyanate complexes and high molecular alkylamines such as Amberlite LA1, Alamine 336, and Aliquat 336. The extract shows the color development to have the maximum absorbances at two different wavelengths i.e., 480 nm for copper and 625 nm for cobalt. Since the spectra of the ion-pairs overlap each other, two simultaneous equations are used to obtain the concentrations from absorbances. Even small amount of Fe(Ⅲ) and Ni(Ⅱ) interferes with the determination of copper. The results of the analysis of samples are in good agreement with the results determined by separate methods within RSD 5.9%.
Green crystalline salts of substituted pyridinium oxopentachloromolybdates(V) were obtained from concentrated hydrochloric acid solution of molybdenum(V)-thiocyanate extract. $MoOCl_3(X-py)_2$ (X-py were 4-and 3-cyanopyridine, 2-amino-4-picoline and 4-acetylpyridine) were obtained by reflux of the corresponding substituted pyridinium salts of oxopentachloromolybdates(Ⅴ) in absolute ethanol. ($X-pyH_2$)[$MoOCl_5$]$H_2$O containing the $MoO^{3+}$ group are dissolved and hydrolysed in water but $MoOCl_3(X-py)_2$ are insoluble in water, alcohol and acetone. The complexes are paramagnetic compounds.
Phuc, Bui Huy Nhu;Lindberg, Jan Erik;Ogle, Brian;Thomke, Sigvard
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.14
no.7
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pp.994-1002
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2001
In a balance experiment with rats either 0, 25 or 50% of the crude protein (CP) provided as casein in the control diet was replaced with cassava leaves (CL) (Manihot esculenta Crantz) or sweet potato vines (SPV) (Ipomoea balala). CL were either sun-dried or oven-dried at $60^{\circ}C$ or $105^{\circ}C$ or ensiled, while the SPY were either sun-dried or ensiled. The experiment included 3 blocks with 30 rats in each and six individuals per treatment group. Drying at $105^{\circ}C$ resulted in a reduction of the lysine (Lys) content, suggestive of the occurrence of Maillard reactions. Ensiling CL and SPV slightly decreased the CP. content as well as the sum of essential amino acids. The apparent fecal CP digestibility (dCP) and nitrogen retention were negatively affected by increasing the level of replacement (p<0.01 and p<0.001, respectively). The impaired amino acid profile observed when drying CL at $105^{\circ}C$ was found to be related to a slight decrease in dCP (p<0.001) as well as N retention (p<0.005). The effects of sun-drying and oven-drying in reducing the HCN content in CL were more potent than when ensiling. By increasing the total dietary HCN supply serum thiocyanide level, as well as urinary thiocyanate and linamarin output, were increased, with a weak relationship between them. Sun-drying and ensiling with cane molasses as additive successfully preserved the nitrogenous constituents and could be a means of preserving fresh green feed under tropical conditions.
Rheological behavior of natural hydrogel produced from seeds of three Salvia spp. (S. miltiorrhiza (SM), S. sclarea (SS), S. viridis (SV)) was investigated by using a Rheometer equipped with a cone and plate geometry measuring system under never-dried condition. Different chemical contents of such hydrogels give significant effects on their rheological properties. Because of incomplete penetration of water inside the hydrogels after drying before-dried hydrogels were used for rheological analysis. To know molecular interactions which predominated in the gel formation, some constituents were externally added to the 1.0% (w/w) hydrogel. Addition of urea to disrupt hydrogen bonds reduced 3.4-67% viscosity of the untreated hydrogels and changed viscoelastic properties from gel to liquid-like behavior. Neutral salts added to the hydrogel solution at 0.1 M also lowered the viscosity in a manner related with increase in size of cations and temperature. Changing from gel state to liquid-like state was also easily confirmed by oscillation measurement (storage, G', and loss, G", modulii) typically observed in the cases of potassium sulfate and potassium thiocyanate. Influence of pH variation on the viscosity explained that weak alkaline condition (pH 8-9) creates a higher resistance to flow due to increasingly electrostatic repulsions between negative charges ($COO^-$) Importance of calcium bridges was also demonstrated by recovery of viscosity of the hydrogels by addition of calcium after acidification. The summarized results indicate that electrostatic repulsion is a major contributor for production of hydrogel structure.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.22
no.3
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pp.266-272
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1993
Some compounds including flavonoids were tested as scavenger of nitrite which is believed to participate in the formation of N-nitroso compound. Many were found to be potent scavengers and the most potent ones were ascorbic arid, potassium thiocyanate, chlorogenic acid, catechin, morin, luteolin, luteolin-7-glucoside, and naringenin. To evaluate the influence of the above compounds on the endogenous formation of N-nitroso compound, the amount of nitrosoproline (NPRO) was examined by co-incubation of nitrite, proline, and test compounds at various concentrations. The analysis of NPRO by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) was newly developed. Most compounds except ascorbic acid and chlorogenic acid were found to be no effects or activatory effects on NPRO formation. From the results obtained, it was suggested that most flavonoids which are contained in our customary diets were not associated with the inhibition of NPRO formation.
Erythrina stricta, a deciduous tree widely used traditionally in indigenous system of medicine for various ailments such as rheumatism, fever, leprosy, epilepsy etc. The leaves of Erythrina stricta was extracted with ethanol (70%) and used for the evaluation of various in vitro antioxidant assays which includes H - donor activity, nitric oxide scavenging, superoxide anion scavenging, reducing ability, hydroxyl radical, hydrogen peroxide scavenging, total phenolic content, total flavonoid content, total antioxidant activity by thiocyanate and phosphomolybdenum method, metal chelating, $\beta$-carotene bleaching, total peroxy radical assays. The pro-oxidant activity was measured using bleomycin-dependent DNA damage. Ex vivo models like lipid peroxidation and erythrocyte haemolysis were also used to study the antioxidant property of the extract. The various antioxidant activities were compared with suitable standard antioxidants such as ascorbic acid, butylated hydroxyl toluene, $\alpha$-tocopherol, curcumin, quercetin and Trolox. The generation of free radicals viz. $O_2^{{\cdot}-}$, $OH^{\cdot}$, $H_2O_2$, $NO^{\cdot}$ and peroxyl radicals were effectively scavenged by the ethanolic extract of Erythrina stricta. In all the methods, the extract offered strong antioxidant activity in a concentration dependent manner. The total phenolic content, flavonoid content and total antioxidant activity in Erythrina stricta were determined as microgram (g) pyrocatechol, quercetin and $\alpha$-tocopherol equivalent/mg respectively. The extract did not exhibit any prooxidant activity when compared with ascorbic acid. The results obtained in the present study clearly indicates that Erythrina stricta scavenges free radicals and reduces lipid peroxidation, ameliorating the damage imposed by oxidative stress in different disease conditions and serve as a potential source of natural antioxidant.
To enhance the utilization of apple pomace for the functional food resources, we analyzed the useful components and examined the antioxidant activity of apple pomace. The contents of total dietary fiber, total flavonoid, total phenolic acid and vitamine C were 55.56%, 458 mg%, 1048 mg% and 19.8 mg%, respectively. Protocatechuic acid, cinamic acid, caffeic acid, ferulic acid, syringic acid, vanillic acid and phydroxybenzoic acid were identified in the apple pomace extract by GC-MS. Phloridzin and quercetin-3-glucoside were identified in the apple pomace extract by HPLC. Ethyl acetate fraction showed the highest antioxidative ability by ferric thiocyanate method. Malondialdehyde(MDA) formation in normal rat liver tissue also showed the lowest in ethyl acetate fraction.
Lee, Kyungmi;Kang, Dong Hyeon;Choe, Ju Eun;Yun, Mira;You, Jung-Min;Go, Min Jeong;Lee, Junseong;Jeon, Seungwon
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.35
no.11
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pp.3175-3180
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2014
A potentiometric sensor based on the 1-benzyl-3-(4-nitrophenyl) thio-urea was synthesized and tested as an ionophore in PVC based membrane sensor towards $SCN^-$ ions. This membrane exhibits a linear stable response over a wide concentration range ($1.0{\times}10^{-5}$ to $1.0{\times}10^{-2}M$) with a slope of -59.2 mV/dec., a detection limit of ${\log}[SCN^-]=-5.05$, and a selectivity coefficient for thiocyanate against perchlorate anion of ${\log}K^{pot}_{SCN^-j}=-0.133$. The selectivity series of the membrane is as follows: $SCN^-$ > $ClO_4{^-}$ > $I^-$ > $NO_3{^-}$ > $HSO_3{^-}$ > $Cl^-$ > $HSO_4{^-}$ > $F^-$ > $CH_3COO^-$ > $HCO_3{^-}$ > $Br^-$ > $H_2PO_4{^-}$ > $SO{_3}^{2-}$ > $SO{_4}^{2-}$ > $CO{_3}^{2-}$. The proposed electrode showed good selectivity and a good response for the $SCN^-$ ion over a wide variety of other anions in pH 6.0 buffer solutions and has a fast response time of about < 5s. The influences of the membrane by pH, ionophore, and plasticizer were studied.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.1
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pp.28-33
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2004
This study was performed to examine in vitro biological activities such as antioxidative, nitrite scavenging effect, tyrosinase inhibitory effect and antithrombotic activity of a Korean traditional prescription, Nogyong-daebotang, composed of oriental medical herbs and antler, nourishing the blood, helthiness, strengthening of vital power and promotion of growth. The concentration of total phenolic compounds of the prescription sample was 151.3$\pm$2.6 mg%. The electron donating abilities (EDA) by reduction of 2.2'-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) was 80.9%, inhibition rate of lipid peroxidation in thiocyanate method used linoleic acid was 88.1%. Nitrite scavenging effects of the sample were more than 70% at acidic pH, but it was pH dependent, showing the highest at pH 1.2 and the lowest at pH 6.0. Inhibition rate against tyrosinase of the sample was above 80%. Platelet aggregation induced by ADP (adenosine-5'-diphosphate) was inhibited up to 30% and the inhibitory effect was dependent on concentration of the sample.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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