Bacillus megaterium KL39, an antibiotic-producing plant growth promoting rhizobacterium (PGPR), was selected from soil. The antifungal antibiotic, denoted KL39, was purified from culture filtrate by column chromatography using Dion HP-20, Silica gel, Sephadex LH-20, and prep-HPLC. Thin layer chromatography, employing the solvent system of ethanol:ammonia:water=8:1:1, showed the $R_{f}$. value of 0.32. The antibiotic KL39 showed a negative reaction with ninhydrin solution, positive with iodine vapor, and also positive with Ehrlich reagent. It was soluble in methanol, ethanol, butanol, and acetonitrile, but insoluble in chloroform, toluene, hexane, ethyl ether, or acetone. Its UV spectrum had the maximum absorption at 208 nm. Amino acid composition, FAB-mass, $^{1}H-NMR,\;^{13}C-NMR$, and atomic analyses showed that the antibiotic KL39 (MW=1,071) has a structure very similar to iturin E. The antibiotic KL39 has a broad antifungal spectrum against a variety of plant pathogenic fungi including Rhizoctonia solani, Pyricularia oryzae, Monilinia froeticola, Botrytis cinenea, Altenaria kikuchiana, Fusarium oxysporum, and F. solani. An MIC value of $10\;{\mu}g/ml$ was determined for Phytophthora capsici. Macromolecular incorporation studies with P. capsici using radioactive [$^{3}H-adenine$] as the precursor, indicated that the antibiotic KL39 strongly inhibits the DNA biosynthesis of the fungal cell. Microscopic observation of the antifungal action showed abnormal hyphal swelling of P. capsici. The purified antibiotic KL39 was very effective for the biocontrol of in vivo Phytophthora-blight disease of pepper.
Background: Tobacco smoking is considered a risk factor for cervical cancer development due to the presence of tobacco based carcinogenic metabolites in cervical cells of female smokers. In this study, we investigated the role of the T3801C (MspI) polymorphism of CYP1A1, a gene encoding an enzyme necessary for the initiation of tobacco based carcinogen metabolism, on cervical cancer risk. The T to C substitution may alter CYP1A1 activities, potentially elevating cervical cancer risk. Since results of gene-disease association studies vary according to the study population, the multi-ethnic population of Malaysia provides an excellent representative cohort for identifying and comparing the cervical cancer risk among the 3 major ethnics in Southeast Asia in relation to CYP1A1 MspI polymorphism. Materials and Methods: A total of 195 Thin Prep Pap smear samples from HPV negative and cancer free females were randomly selected as controls while 106 formalin fixed paraffin embedded samples from females with invasive cervical cancer were randomly selected for the cases group. The polymorphisms were identified using restriction fragment length polymorphism (RFLP) PCR. Results: We found no significant associations between CYP1A1 MspI polymorphism and cervical cancer in the general Malaysian female population. However, upon ethnic stratification, the variant C/C genotype was significantly associated with a 4.66-fold increase in cervical cancer risk in Malay females (95% CI= 1.21-17.9; p=0.03). No significant association was observed in the Chinese and Indian females. Additionally, there were no significant associations in the dominant model and allele frequency model analysis in both the general and ethnically stratified female population of Malaysia. Conclusions: Our findings suggest that the C/C genotype of CYP1A1 MspI polymorphism is associated with the development of cervical carcinoma in the Malay females of Malaysia.
Othman, Nor Hayati;Zaki, Fatma Hariati Mohamad;Hussain, Nik Hazlina Nik;Yusoff, Wan Zahanim Wan;Ismail, Pazuddin
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권7호
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pp.3489-3494
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2016
Background: A major problem with cervical cancer screening in countries which have no organized national screening program for cervical cancer is sub-optimal participation. Implementation of self-sampling method may increase the coverage. Objective: We determined the agreement of cytological diagnoses made on samples collected by women themselves (self-sampling) versus samples collected by physicians (Physician sampling). Materials and Methods: We invited women volunteers to undergo two procedures; cervical self-sampling using the Evalyn brush and physician sampling using a Cervex brush. The women were shown a video presentation on how to take their own cervical samples before the procedure. The samples taken by physicians were taken as per routine testing (Gold Standard). All samples were subjected to Thin Prep monolayer smears. The diagnoses made were according to the Bethesda classification. The results from these two sampling methods were analysed and compared. Results: A total of 367 women were recruited into the study, ranging from 22 to 65 years age. There was a significant good agreement of the cytological diagnoses made on the samples from the two sampling methods with the Kappa value of 0.568 (p=0.040). Using the cytological smears taken by physicians as the gold standard, the sensitivity of self-sampling was 71.9% (95% CI:70.9-72.8), the specificity was 86.6% (95% CI:85.7-87.5), the positive predictive value was 74.2% (95% CI:73.3-75.1) and the negative predictive value was 85.1% (95% CI: 84.2-86.0). Self-sampling smears (22.9%) allowed detection of micro-organisms better than physicians samples (18.5%). Conclusions: This study shows that samples taken by women themselves (self-sampling) and physicians have good diagnostic agreement. Self-sampling could be the method of choice in countries in which the coverage of women attending clinics for screening for cervical cancer is poor.
우리나라 전국 산지에서 쉽게 구할 수 있는 노루발풀을 건조시켜 80% ethanol 추출물과 여러 가지 용매 분획물의 미생물 증식 억제 효과에 대해서 검색하였다. 노루발풀의 80% ethanol 추출물은 그람 양성균 B. subtilis에서 농도 의존적으로 항균활성을 나타내는 반면 그람 음성균 E. coli에서는 활성이 나타나지 않았다. 노루발풀의 80% ethanol 추출물을 용매 분획하여 얻은 분획물 중 hexane층에서 항균활성이 나타나는 것을 확인하였다. 노루발풀의 항균활성 물질을 검색하기 위한 목적으로 hexane 분획물을 silica gel column chromatography, prep. TLC 및 HPLC를 실시하였으며 그 결과, peak I의 단일 물질이 노루발풀의 B. subtilis에 대한 항균활성을 나타내는 물질임을 확인할 수 있었다.
오미자 열매로부터 항균활성물질을 분리하기 위하여 methanol 조추출물의 용매분획의 항균력을 측정하였다. 항균활성을 나타낸 methanol 조추출물은 다시 여러 가지 용매로 순차적으로 분배하여 n-hexan층, dichloromethane층, ethyl acetate층, buthanol층과 water층을 얻은 다음, 이들 분배층에 대해 항균활성을 검색한 결과, ethyl acetate층에서 가장 활성이 높게 나타났다. 활성이 높게 나타난 ethyl acetate층은 감압증류한 후, 여러 가지 chromatography를 이용하여 분리, 정제한 다음, MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR,\;$, DEPT 및 2D NMR등을 이용하여 항균활성물질의 구조를 동정하였다. 그 결과 오미자의 약리기능을 나타내는 주요성분인 lignan계통의 화합물인 gomisin C로 추정되는 compound를 분리하였고, 다른 하나는 오미자의 정유성분인 trimethylcitrate로 동정하였다. 또한 오미자추출물의 균증식도와 분쇄육의 저장성에 미치는 효과를 검토하기 위하여 식품보장실험을 수행하였다. 그 결과 Salmonella typhimurium에 의해 문제시되는 식품에 천연보존료로서의 이용가능성을 시사하였다.
Background: Fine-needle aspiration cytology serves as a safe, economical tool in evaluating thyroid nodules. However, about 30% of the samples are categorized as indeterminate. Hence, many immunocytochemistry markers have been studied, but there has not been a single outstanding marker. We studied the efficacy of CD56 with human bone marrow endothelial cell marker-1 (HBME-1) in diagnosis in the Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology (TBSRTC) category III. Methods: We reviewed ThinPrep liquid-based cytology (LBC) samples with Papanicolaou stain from July 1 to December 31, 2016 (2,195 cases) and selected TBSRTC category III cases (n=363). Twenty-six cases were histologically confirmed as benign (six cases, 23%) or malignant (20 cases, 77%); we stained 26 LBC slides with HBME-1 and CD56 through the cell transfer method. For evaluation of reactivity of immunocytochemistry, we chose atypical follicular cell clusters. Results: CD56 was not reactive in 18 of 20 cases (90%) of malignant nodules and showed cytoplasmic positivity in five of six cases (83%) of benign nodules. CD56 showed high sensitivity (90.0%) and relatively low specificity (83.3%) in detecting malignancy (p=.004). HBME-1 was reactive in 17 of 20 cases (85%) of malignant nodules and was not reactive in five of six cases (83%) of benign nodules. HBME-1 showed slightly lower sensitivity (85.0%) than CD56. The specificity in detecting malignancy by HBME-1 was similar to that of CD56 (83.3%, p=.008). CD56 and HBME-1 tests combined showed lower sensitivity (75.0% vs 90%) and higher specificity (93.8% vs 83.3%) in detecting malignancy compared to using CD56 alone. Conclusions: Using CD56 alone showed relatively low specificity despite high sensitivity for detecting malignancy. Combining CD56 with HBME-1 could increase the specificity. Thus, we suggest that CD56 could be a useful preoperative marker for differential diagnosis of TBSRTC category III samples.
본 연구에서는 국내 자생식물 7종의 정유 중 우수한 항산화 효과가 있는 온주밀감, 육계나무 정유 2종을 선별하였고, 피부염을 유발하는 Candida albicans에 대한 항미생물 활성 평가를 통해 식물정유의 항미생물 활성성분을 구명하고자 하였다. 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거활성 측정 결과 SC50값이 온주밀감 정유 0.010 mg/mL, 육계나무 정유 0.09 mg/mL을 나타냈으며, 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) 라디칼 소거활성 측정 결과 온주밀감 정유 0.09 mg/mL, 육계나무 정유 0.06 mg/mL로 높은 항산화 활성을 나타냈다. Minimum Inhibitory Concentration는 육계나무 정유 1.25 mg/mL, 온주밀감 정유 5 mg/mL 값으로 육계나무 정유에서 뛰어난 항미생물 활성이 나타났다. Thin layer chromatography (TLC) bioassay를 통해 2종 정유의 성분 분획에 따른 C. albicans에 대한 항미생물 활성을 평가하였고, preparative TLC (prep. TLC)를 통해 활성분획을 획득하고, 동일 Rf값을 가지는 성분들에 대해서 GC/MS 분석을 수행하여 항미생물 활성성분을 구명하였다. 그 결과 항산화 및 항미생물 활성을 나타내는 주성분은 각각 육계나무 정유의 경우 cinnamyl acetate, eucalyptol, linalool, citral 온주밀감 정유의 경우 linalool이었다. 2종 정유에 공통적으로 항산화 및 항미생물 활성을 나타낸 분획부 성분분석 결과 linalool은 항산화, cinnamyl acetate, eucalyptol, citral, geranyl acetate은 항산화와 항미생물 능력이 있다고 사료된다.
황백(Cortex Phellodendri: CP)은 황벽나무(Phellodendron amurense)의 건조된 수피로부터 얻어진다. 이 수피는 한국의 전통 한약제로서 설사, 황달, 무릎과 발의 통증, 요도관 및 피부 감염증에 폭넓게 사용되어 왔다. 이들 기능성 성분의 분리 및 정제는 박층 크로마토크래피, 컬럼 액체 크로마토크래피 및 HPLC와 같은 여러 분석법들이 동양의 약초연구에 이용되어 왔다. 본 연구는 CP로부터 berberine을 분리하기 위해 향류분배 크로마토크래피법(CPC)으로 효과적으로 수행하였다. 두 용매의 CPC 최적조성은 n-butanol: acetic acid: water(4:1:5 v/v/v)이었다. 이동상의 유속은 1,000 rpm 회전력에서 상승법으로 분당 3 mL 속도로 전개시켰다. CPC에서 분리된 분획분은 prep-HPLC로 정제하였다. $^1H$-NMR 스펙트럼은 4.10과 4.20 ppm에서 $3H(-OCH_3)$, 6.10 ppm에서 2H의 ($-OCH_2O-$) proton signal의 공명이 관찰되었다. 2개의 방향족 proton은 이중결합 패턴을 보였다. H-11과 H-12 doublet은 각각 7.98과 8.11에서 나타났다. $^{13}C$-NMR 스펙트럼에서는 C2와 C3의 methylenedioxy group($-OCH_2O-$), C9과 C10에 methoxy group($-OCH_3$)이 4개의 치환된 형태로 보였다. 분리 정제된 berberine의 화학구조는 $^1H$, $^{13}C$-NMR, ESI-MS 데이터 분석으로 확인하였다.
스테로이드 함유 표시가 없는 화장품에서 항염증 효과가 있는 글루코코티코스테로이드인 베타메타손프로피오네이트 성분이 검출되었다. 이 화장품은 외용스프레이 및 샴푸로서 주성분으로 아연피리치온을 함유하는 것으로 표기되어 있었다. 화장품에서 스테로이드 구조와 활성을 갖는 물질의 존재를 확인하기 위하여 실리카겔 박층판을 이용한 박층크로마토그래프를 사용하였으며 이 성분을 분리하기 위해 high-performance liquid chromatography (HPLC)를 이용하여 확인 및 정량을 수행하였다. 분취용 HPLC를 이용하여 스테로이드를 함유한 것으로 판단되는 분획을 모은 다음 nuclear magnetic resonance (NMR) 및 mass spectrometry (MS)를 이용하여 스테로이드 성분을 확인하였다. 스테로이드 표준물질로 베타메타손 17-프로피오네이트 및 베타메타손 21-프로피오네이트를 합성하여 사용하였고 이 표준물질과 HPLC 크로마토그램을 비교하여 스테로이드 성분의 함량을 분석하였다. 이 방법으로 아연피리치온 제제와 같은 일부 시판 화장품에서 스테로이드 성분을 확인하였고 reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP HPLC) 상의 유지시간 비교를 통하여 스테로이드 성분을 정량한 결과 시험한 총 8종의 화장품 시료 중 2개 제품에서 0.005 ${\sim}$ 0.02%의 베타메타손프로피오네이트가 검출되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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