• 한국수산과학회지
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• 제56권5호
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• pp.626-633
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• 2023

Vibrio spp. are aquatic bacteria that are ubiquitous in warm estuarine and marine environments. Especially, V. vulnificus and V. cholerae are currently known to cause potentially fatal infections in humans. This study investigated the distribution and antibiotic resistance of V. vulnificus and V. cholerae isolated from coastal areas of Gyeongsangnam-do in 2022. A total of 252 samples of water, shellfish and coastal sediment were collected from 7 locations along the coast, and 124 samples of fishery products were collected from markets. Among the 252 samples, forty-four V. vulnificus (11.7%) and fourteen V. cholerae non-O1/non-O139 (3.7%), none of which carried the ctx gene, were isolated. Out of the 124 samples, 6 (4.8%) tested positive for V. vulnificus and V. cholerae was not detected. The isolation rates of V. vulnificus and V. cholerae showed a significant correlation with environmental factors such as seawater temperature and salinity. In an antibiotic resistance test, V. vulnificus was susceptible to amikacin, gentamicin, imipenem trimethoprim/sulfamethoxazole, and ciprofloxacin, but resistant to cefoxitin (100.0%), followed by tetracycline (9.1%). Multidrug resistance was also observed. Continuous monitoring of Vibrio pathogens with water temperature and salinity is expected to help reduce the outbreaks, and rational use of antibiotic agents is needed to prevent the accession of antibiotic-resistant microorganisms in aquatic ecosystems.

• KSBB Journal
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• 제5권3호
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• pp.247-253
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• 1990

고등식물의 형질전환용 유전자운반체로써 가장 많이 사용되고 있는 Ti-plasmid를 이용해서 당근세포를 형질 전환시키기 위한 연구의 일환으로 Agrobacterium spp를 helper로 이용하여 NPT II gene를 함유하고 있는 binary vector GA472를 당근세포에 삽입시켜 kanamycin에 대해 저항성을 나타내는 세포주를 선발하고자 본 연구를 수행하였다. 국내 토양에서 선발한 A.tumefaciens 2종과 disarmes된 PC2760 그리고 hypervirulent균주인 A281에 tri-parental mating 방법에 의해서 binary vector인 pGA472을 도입하여 transconjungants인 A. tumefaciens c-23-1/pGA472,K29-1/pGA472, PC2760/PGA472 그리고 A281/pGA472를 획득하였다. Transconjungants는 plasmid의 분리, 정제방법에 의해서 추출한 후 0.7% agarose gel 상에서 관찰해 본 결과 4균주 공히 NTPII gene이 삽입된 pGA472와 Ti-plasmid를 함유하고 있는 것을 확인 하였다. 확인된 conjugant와 당근정상조직을 동시배양방법에 의해서 형질전환을 유도한 후 정상조직은 전혀 생존이 되지않은 kanamycin에 대해서 저항을 나타내는 callus를 선발할 수 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제51권4호
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• pp.267-275
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• 2011

Methicillin-resistant Staphylococcus (S.) aureus (MRSA) is one of the most important nosocomial pathogens worldwide and the emergence of this strain has become a major clinical problem. In this study, we investigated the prevalence of MRSA and their genetic characteristics in 69 S. aureus isolated from humans and animals. In human isolates, higher antimicrobial resistance rates were observed against penicillin (80.6%), followed by erythromycin (11.9%) and tetracycline (9.0%). All of them were susceptible to clindamycin, enrofloxacin, novobiocin, pirlimycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and vancomycin. The resistance patterns in animal isolates were similar to those of human isolates. Two (2.9%) MRSA strains were isolated from human (n = 1) and animal (n = 1), and these isolates were confirmed as carrying the mecA gene. One isolate originating from human was resistant to 7 drugs and the other isolate derived from animal was resistant to 11 drugs. Staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) variant IIIB was identified in animal isolate but SCCmec type of an isolate from human was not exactly determined. Two MRSA isolates showed unrelated PFGE pattern between them. Our results indicated although the frequency of MRSA isolates from humans and animals was low, a continuous surveillance and monitoring should be called for to prevent the contamination and spread of MRSA in the community. To our knowledge, this is the first time that SCCmec type variant IIIB was detected from animals in Korea.

• 한국수산과학회지
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• 제47권3호
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• pp.220-226
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• 2014

Sixty-seven Vibrio parahaemolyticus isolates from surface seawater from the Wando area, on the southern coast of Korea, were analyzed for their susceptibility to 15 different antimicrobials and the presence of virulence genes. According to the disk diffusion susceptibility test, all of the strains studied were resistant to ampicillin and oxacillin, while decreasing percentages were resistant to vancomycin (64.2%), streptomycin (56.7%), amikacin (31.3%), kanamycin (22.3%), cephalothin (20.9%), erythromycin (10.4%), ciprofloxacin (4.5%), and tetracycline (3.0%). All of the strains were susceptible to five antimicrobials: chloramphenicol, gentamycin, nalidixic acid, sulfamethoxazole/trimethoprim, and trimethoprim. Fifty-nine isolates (88.1%) were resistant to three or more classes of antimicrobial and defined as multidrug resistant, and two strains were resistant to seven antimicrobial agents. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the 67 V. parahaemolyticus isolates to ampicillin and oxacillin ranged from 512-2,048 and $64-512{\mu}g/mL$, respectively. All 67 isolates were also examined for the presence of the tdh and trh virulence genes using the polymerase chain reaction (PCR). However, no isolates possessed either tdh or trh. The VPA0477 (${\beta}$-lactamase) gene, present in all of the tested strains, was validated as a new specific marker gene in PCR assays for the accurate detection and identification of V. parahaemolyticus.

• 한국동물위생학회지
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• 제47권1호
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• pp.27-33
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• 2024

At the present study, it was aimed to explore the states of antimicrobial resistant Staphylococcus aureus isolates from 1,360 chickens, pigs and cattle carcass (400 chickens, 480 pigs and 480 cattle) in Daegu province from January 2022 to December 2022. Among 1,360 samples, 81 of S. aureus were isolated cattle (1.4%), pigs (7.7%) and chickens (9.2%). In antimicrobial susceptibility test, all of the isolates were demonstrated susceptibility to rifampin. But the isolates were showed resistance other antibiotics in order of tetracycline (62.9%), ciprofloxacin (62.9%), tobramycin (58.0%), gentamicin (51.8%), amikacin (40.7%), penicillin (39.5%), clindamycin (35.8%), enrofloxacin (33.3%), trimethoprim/sulfamethoxazole (30.8%), oxacillin (30.8%), minocycline (29.6%), erythromycin (25.9%), quinupristin/dalfopristin (20.9%), chloramphenicol (12.3%), cefoxitin (9.8%). Among the 81 S. aureus isolates, 25 (30.8%) methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) were observed. Seven (28.0%) of 25 MRSA harbored mecA gene. About 96% of MRSA were multidrug resistance to at least 3 more drugs. A continuous monitoring and surveillance program to prevent antimicrobial resistance in livestock products is demanded.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제39권3호
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• pp.231-238
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• 2024

국내에서 V. parahaemolyticus로 인한 식중독 사고가 지속적으로 보고되고 있으며, 최근 국내 수산물 판매량 및 수산물 양식에 사용되는 항생제 판매량은 증가하는 추세이다. 따라서 본 연구는 국내에 유통되는 수산물에서 분리한 V. parahaemolyticus의 분포, 항생제 감수성, 유전적 특성 및 유전학적 통계를 조사하였다. 79건의 유통 수산물로부터 47건(59.5%)에서 V. parahaemolyticus가 분리되었다. 항생제 내성 양상의 경우, 총 47균주의 분리 균주에서는 ampicillin에 2균주(4.3%)가 내성을 보였으며, 이외 균주는 모든 항생제에 대해 감수성을 보였다. 항생제 내성 유전자의 경우, 모든 균주(100%)로부터 bla_CAR family gene, tet(35), catC가 확인되었으며, 1균주(2.1%)에서는 fos가 확인되었다. 병원성 유전자 여부의 경우, 모든 분리 균주에서 tdh, trh 유전자는 확인되지 않았으나, T3SS1은 모든 균주(100%), T3SS2는 1균주(2.1%)에서 확인되었다. MLST의 경우, 17균주로부터 15가지의 ST가 확인되었으며, ST 658가 3균주, 이외 14가지 ST는 1균주씩 확인되었다. 확인된 ST는 대부분 중국, 태국 등의 환경 분리주로 확인되었으며, ST 396, ST 3042는 중국 임상 분리주로부터 확인되었다. 이로써, 최근 국내에 수산물과 관련한 식중독, 유통량, 항생제 판매량 등의 추세에 따른 위험성에 V. parahaemolyticus에 대한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료되며, 본 연구는 그에 대한 도움이 될 것이라 사료된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제15권3호
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• pp.241-247
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• 2000

국내 유통식품에서 verotoxin(VT)을 생성하는 대장균의 오염도를 조사하고 이로 인한 식중독의 발생을 사전에 예방하기 위하여 1997년부터 1999년 사이 햄버거. 식육 및 채소류에서 VT생성 대장균의 분포조사를 실시하였으며, 이 결과 분리된 대장균에 대한 분자생물학적 특성을 조사하였다 식육, 햄버거 및 채소류 총 1,700건의 식품 중에서 VT를 생성하는 대장균이 검출된 것은 3건으로 매우 낮은 검출율을 보였는데, 분리주의 혈청형은 각각 026 : H4, 0157 : H7 및 055 : Hl2였다. 혈청형 026 : H4 분리주는 VT I과 VT II를 생성하였고,055 : Hl2주는 VT I을 각각 생성하였으며, 두 분리주에서 eae유전자와 60 MDa plasmid DNA는 검출되지 않았다. 혈청형 0157 : H7주는 VT II를 생성하였고 60 MDa plasmid DNA는 검출되었으나 eae유전자는 확인되지 않았다. 따라서 분리된 VT생성 대장균들은 eae 유전자가 검출되지 않아 질병유발 가능성은 낮은 것으로 추정되었다. 항생제 내성능에서 혈청형 0157 : H7 분리주는 ampicillin과 streptomycin에 내성을 나타낸 반면, 혈청형 026 : H4주와 혈청형 055 : Hl2주는 ampicillin, carbenicillin, cephalothin, trimethoprim/sulfamethoxazole과 tetracycline에 내성을 보여 분리주의 다재내성능을 확인하였다 세포배양액으로 실시한 vero cell과 HeLa cell에 대한 세포독성능은 3주의 분리주에서 확인되었다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제48권3호
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• pp.202-209
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• 2016

본 연구는 methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)로부터, 독소 유전자형과 항생제 내성의 상관 관계를 결정하는 것을 목표로 하였다. 2014년 1월~12월까지 전남 순천의 한 병원 중환자실의 임상검체 2,664건에서 얻어진 MRSA 52균주를 분리하였다. 유전자들이 암호화하고 있는 mecA, 장독소(staphylococcal enterotoxins; sea, seb, sec, seg, seh, sei, sej), 독성 쇼크 증상독소-1 (toxic shock syndrome toxin-1; tst-1), 표피박탈성독소(exfoliative toxin; eta, etb), 백혈구 용해 독소(Panton-Valentine leukocidin; pvl)를 특이적 프라이머를 이용한 multiplex PCR로 증폭 검출 하였다. 독소 유전자 seg와 sei 유전자가 각각 40균주(76.9%)로 가장 많은 보유율을 나타냈으며 다음으로 tst 34균주(65.4%) 순으로 검출 되었으며 eta, etb, sea, sed, see, seh, sej와 pvl 유전자들은 검출 되지 않았다. 2개 이상의 독소 유전자를 동시에 보유한 조합의 MRSA는 40균주(76.9%) 였는데 5개 유전자(seb, sec, seg, sei, tst)를 동시 보유한 조합이 28균주(53.8%)로 가장 많은 분포를 보였으며 다음으로 seg, sei 유전자 동시 보유 조합으로 6균주(11.5%)에서 나타났다. 유전자들 간의 동시 보유율은 72.5~100%로서 특정한 독소 유전자 seb, sec, seg, sei와 tst 유전자간의 상관성이 높게 나타났다. 특정 다수의 독소유전자(seb, sec, seg, sei, tst)를 동시에 보유한 균주들이 개별적 독소 유전자를 보유한 균주(seb, sec, tst)와의 항생제 내성의 상관성은 ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin 항생제에 100% 내성을 보임으로서 공통적으로 포함된 seb, sec, tst 유전자와 이 항생제의 내성과는 밀접한 연관이 있음을 알았다.

• 한국어병학회지
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• 제32권2호
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• pp.97-104
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• 2019

본 연구에서는 2017년 4월부터 12월 사이에 여수수산시장에서 구입한 수산물로부터 분리된 Vibrio parahaemolyticus와 Morganella morganii의 내성특성을 알아보고 장내세균인 Escherichia coli와 어류 병원균인 Edwardsiella tarda와의 내성전이 가능성을 알아보았다. Broth mating 법으로 실시한 conjugation에서 형성된 transconjugants를 분리하기 위하여 ampicillin(AMP) 50 ㎍/ml와 streptomycin (SM) 150 ㎍/ml 또는 oxytetracycline(OT) 30 ㎍/ml이 첨가된 TSA배지를 사용하였다. AMP, amoxicillin (AML), colistin(CT)에 낮은 감수성을 보였던 V. parahaemolyticus와 달리 M. morganii는 AMP, AML, CT, erythromycin, OT, tetracyclin등에 감수성이 낮았다. V. parahaemolyticus와 M. morganii를 E. coli와 conjugation을 실시한 결과 transconjugants인 E. coli는 분리되지 않은 반면 SM내성을 획득한 V. parahaemolyticus와 M. morganii가 분리되었다. 한편 V. parahaemolyticus와 E. tarda의 broth mating에서는 AMP와 AML 내성을 획득한 E. tarda transconjugant가 분리되었다. 그러나 V. parahaemolyticus의 β-lactamase 유전자인 VPA 0477의 전이는 확인되지 않았으며, E. tarda의 내성이 전달된 V. parahaemolyticus나 M. morganii는 검출되지 않았다. 이와 같은 결과는 생물 위해성 세균들 간의 내성전이가 양방향성이며 매우 다양한 패턴으로 진행되고 있음을 시사한다.

• 미생물학회지
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• 제26권2호
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• pp.73-81
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• 1988

$\alpha$-Amylase (EC.3.2.1.1) of Neurospora crassa (ATCC9279) was cloned in E. coli HB101 using shotgun method, and the enzymes isolated from both N. crassa and E. coli were compared. Chromosomal DNA isolated from the spores of N. crassa was partially digested with PstI restriction endonuclease and rejoined to pBR322 which had been digested with the same enzyme. The resulting recombinant DNA were introduced into E. coli HB101 which had competancy by treating with $CaCl_{2}$. As the result, about 8000 colonies which showed tetracycline resistance were selected and two of the colonies which had 13.5Kb recombinant plasmid exhibit starch degrading activity on starch-containing plate when treated with D-cycloserine. $\alpha$-Amylases from both N.crassa and E. coli were isolated by using ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Bio-Gel P150 gel foltration column. As the result, about 81.3 fold and 5.6 fold purifications in specific activities were obtained respectively, and specific activities of the gel filtrates were 6.1u/mg and 85u/mg respectively. The properties of both enzymes were compared and they showed quite the similar patterns in optimal temperature, optimal pH and had same molecular weight about 100,000 daltons on gel filtration method. Optimal temperatures for both enzymes were $70^{\circ}C$ and optimal pH were about 6 and 10.