During the screening or antiviral substances having inhibitory effect on tobacco mosaic virus(TMV) infection to tobacco plants, we found that a bacterial isolate, KTB61, which was identified as a Pseudomonas sp., strongly inhibited the formation of TMV local lesions. When the culture filtrate from KTB61 was applied on the upper surface of leaves of N. tabaccum Xanthi-nc tobacco at the same time of or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Incidence of systemic TMV infection to the susceptible tobacco cultivar, NC82, was reduced by 95% when TMV was inoculated onto the upper surface of leaves 24 hours after spraying the culture filtrate. Also 75∼80% of inhibitory effect was obtained by the inoculation of TMV onto the under surface of the leaves treated with culture filtrate 24 hours beforehand. In field trials, the TMV infection was reduced by 96.5% when the tobacco seedlings, N. tabaccum cv. NC82, were soaked with culture filtrate before transplanting.
$AOS(\alpha-olefin),$ LAS(linear alkyl benzene), OSS(dioctyl sulfosuccinate) 및 SAS (dodecyl benzene sulfonic acid)등 4종 계면활성제의 TMV 감염저지 효과를 잎담배 품종 Xan-thi-nc 및 NC 82를 이용하여 조사하였다. 각 계면활성제를 2,500ppm 농도로 담배잎에 처리한 경우 바이러스(TMV) 또는 TMV RNA를 접종했을 때 모두 98% 이상의 감염저지 효과를 나타냈다. 그러나 이들을 담배 근권토양에 처리 3일후 잎에 Virus를 접종하여 병징 및 엽중 Virus 농도를 조사한 결과 무처리구와 차이가 없어 침투이행에 의한 TMV 감염저지 효과는 인정되지 않았다. 순화된 바이러스를 각 계면활성제 2,500ppm 용액과 혼합한 후 초고속원심분리에 의해 다시 Virus를 회수하여 활성을 조사한 결과 LAS는 96% 이상 Virus를 불활성화시켰으며, 이 외는 바이러스 활성에 영향을 미치지 못했다. 또 각 계면활성제가 처리된 Virus 입자의 형태는 무처리입자와 차이가 없었다. 이같은 결과들로 미루어 4종의 계면활성제가 나타낸 TMV 감염저지 효과는 바이러스 입자의 파괴 또는 감염초기 바이러스 입자의 외피 단백질 탈피억제에 의한 것이 아닌 것으로 판단된다.
Induction of systemic acquired resistance (SAR) against phytophthora blight and pathogenesis-related (PR) protein accumulation by TMV infection in pepper plant (Capsicum annuum cv. Nockwang) were examined to understand the mechanism of the systemic acquired resistance in pepper plant. The zoospore suspension of Phytophthora capsici was inoculated on stem of pepper plant in which TMV-pepper strain had been inoculated on fully expanded upper leaves, and thephytopha blight incidence was examined. Both disease severity and lesion length of phytophthora blight were much smaller in TMV pre-inoculated pepper plant than in uninoculated control plants. The phytophthora blight incidence was decreased about 50% in the TMV pre-inoculated pepper, compared to the uninoculated control plant at 10 days after P. capsici inoculation. Accumulation of PR1 and PR5 proteins in intercellular fluid of TMV-inoculated and uninoculated upper leaves were monitored by immuno-blot with tobacco P1b and PR5a, antibody during induction of SAR. PR1 and PR5 were detected from 24 hours after TMV inoculation in both TMV-inoculated and uninouclated upper leaves, and increased rapidly in TMV-inoculation in uninoculated upper leaves were defoliated. PR5 could be detected upto 20 days after TMV inoculation in uninoculated upper leaves. These results suggest that TMV infection induces SAR against phytophthora blight in pepper plant, and that PR proteins are accumulated very rapidly during induction of SAR and maintained for quite long time in pepper plant.
Wasabies showing mosaic symptoms were collected and extracted for virus purification. Tobacco mosaic virus (TMV) was identified as causal agent by electron microscopy and nucleic acid and coat protein analyses. TMV strains were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). TMV was identified as W and C strain in wasabi. The results of host reaction indicated that this virus induced local lesions on Nicotiana tabacum cv. Bright Yellow and N. glutinosa, leaf spots on Chenopodium amaranticolor and mosaic symptoms on wasabi. Rot shape virus particles were observed and was about 300 nm in length. About 6.5 kb single RNA molecule was observed from extracted viral RNA sample and 26 KDa coat protein was detected in denatured acrylamide gel. Infection ratio of TMV was 8% for the first cultivation year, but was 22% for the second year when TMV-W antiserum was used. The results of this experiment showed that infection ratios of both TMV-W and TMV-C strains were higher compared to that of TMV-P strain.
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on tobacco mosaic virus (TMV) infection to tobacco plants, we found a bacterial isolate KTGBP10, which was identified as a Stenotrophomonas sp., strongly inhibited the infection of TMV. When the culture filtrate from KTGBP10 was applied on the upper surface of leaves of Xanthi-nc tobacco plants at the same time or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition of TMV infection was achieved. And $40\%$ inhibition was shown with application of the culture filtrate to the under surface of leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to the healthy ones during transplanting work was reduced by $87.1\~92.6\%$ when the culture filtrate or cell suspension was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. When the broth filtrate of KTGBP10 was supplied by soaking through the cut-leaves before and/or after virus inoculation, the TMV infection was also inhibited by $50.4\~65.3\%$.
Kim, Young-Sook;Hwang, Eui-ll;O, Jeong-Hun;Kim, Kab-Sig;Ryu, Myong-Hyun
The Plant Pathology Journal
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제20권4호
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pp.293-296
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on Tobacco mosaic virus (TMV) infection on tobacco plants, we found a bacterial isolate KTB3, and identified it as Acinetobacter sp. which strongly inhibited the infection of TMV When the culture filtrate from KTB3 was applied on the upper surface of the Xanthi-nc tobacco leaves at the same time, or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Likewise, 86% inhibition was achieved, when the culture filtrate was applied on the underside of the leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to healthy ones during transplanting work was reduced by 92%, when the culture filtrate was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. Antiviral substance from the culture filtrate was purified by ethanol precipitation, dialysis, DEAE-cellulose, and Sephadex G75 gel column chromatography. The partially purified active material which showed positive color reaction to sugar and protein inhibited TMV infection by 60% at 1 ${\mu}$g/ml.
Out of various fungi and bacteria tested for inhibition of Tobacco mosaic virus(TMV) infection using Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc, a bacterial isolate JB-l, identified as Pseudomonas putida had a strong direct inhibitory activity against the TMV infection. Its systemic or indirect activity was also noted at more than a half level of the direct control efficacy. Disease severity was reduced significantly in the susceptible tobacco N. tabacum cv. NC 82 by the treatment of the bacterial culture filtrate, somewhat more by the pretreatment than by simultaneous treatment, probably by inhibiting the TMV transmission and translocation in the plants, showing negative serological, which responses in the viral detection by DAS-ELISA. TMV-inhibitory substances from P. putida JB-1 were water-soluble, stable to high temperature(even boiling), and to a wide range of pH. As proteinase K nullified their antiviral activity, the TMV inhibition activity of P. putida may be derived from proteinaceous materials. In electron microscopy, TMV particles treated with the JB-1 culture were shown to be shrunken with granule-like particles attached on them. All of these aspects suggest that P. putida JB-1 may be developed as a potential agent for the control of TMV.
비름과 식물즙액에 의한 TMV 감염억제효과는 공시한 6종의 비름식물중 비름이 $94.6\%$로 가장 높은 효과를 나타냈다. 비름즙액의 물리화학적성질중, 내열성은 $60^{\circ}C$, 내보존성은 1일, 내희석성은 1/4 희석농도까지 높은 효과를 나타냈다. 한편 수소이온 농도의 변화에는 매우 안정된 성질을 보였으며, 특히 산성영역에서는 모두 $90\%$ 이상의 억제효과를 보였다. 그러나 비름즙액을 활성탄으로 처리하였을 경우는 TMV에 대한 억제효과는 거의 소실되었다. 비름즙액에서 추출한 단백질은 전기영동결과, 3종의 주성분으로 분리되었고 이들 중 top 성분에서 TMV 억제효과가 나타났다. 비름즙액의 실용화를 위한 도말액 효과특속성은 2회 관수에서 $80\%$ 정도의 억제능을 보였다.
우리나라 煙草耕作地의 담배모자이크 바이러스(TMV)病의 時期別 感染率 變化를 調査하고 傳染源 究明을 爲하여 越冬後 담배와 고추뿌리, 雜草類, 담배 果皮에서 生物學的 및 血淸反應에 따라TMV를 檢定하였던바 그 結果를 要約하면 다음과 같다. 1. 本國에서 TMV 初期感染은 改良말칭栽培의 경우 移植 및 一般말칭으로의 轉換時, 一般말칭栽培의 의 경우는 移植 및 1次 腋弟除去時가 가장 重要한 時期로 判斷된다. 2. 越冬後 土壤中의 담배 및 고추뿌리에서 活性 TMV가 檢出되었으며, 부기된 뿌리일수록 그 濃度가 낮았다. 3. 22科 38種의 雜草를 檢定한 結果 TMV에 自然感染되어 있는 것은 까마중과 꽈리 2種이었다. 4. 담배의 果皮에서 TMV가 檢出되었으며 어린 葯에서는 感染이 認定되지 않았다.
The culture filtrate of Streptomyces sp. B25, which was identified in this experiment, was tested for the control of tobacco mosaic virus (TMV) with the susceptible tobacco cultivar, NC 82, under the field conditions following the preliminary examination of its characters for TMV control. Control efficacy of the culture filtrate against TMV infection continued over 50% up to 6 days after treatment, and its systemic effect was about 30% of the direct effect. In field conditions control efficacy of the culture filtrate against TMV infection was 95.3 % at 2 weeks after TMV inoculation, and decreased to 58.3 % at 3 weeks after inoculation. Five fold-dilution of the culture filtrate showed about half of the control efficacy by the stock culture filtrate. Analysis of the antibiotic material responsible for the inhibition of TMV infection through nuclear magnetic resonance experiments revealed that the antibiotic is antimycin $A_1$, which is firstly reported as an anti-phytoviral antibiotic in this experiment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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