During the screening or antiviral substances having inhibitory effect on tobacco mosaic virus(TMV) infection to tobacco plants, we found that a bacterial isolate, KTB61, which was identified as a Pseudomonas sp., strongly inhibited the formation of TMV local lesions. When the culture filtrate from KTB61 was applied on the upper surface of leaves of N. tabaccum Xanthi-nc tobacco at the same time of or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Incidence of systemic TMV infection to the susceptible tobacco cultivar, NC82, was reduced by 95% when TMV was inoculated onto the upper surface of leaves 24 hours after spraying the culture filtrate. Also 75∼80% of inhibitory effect was obtained by the inoculation of TMV onto the under surface of the leaves treated with culture filtrate 24 hours beforehand. In field trials, the TMV infection was reduced by 96.5% when the tobacco seedlings, N. tabaccum cv. NC82, were soaked with culture filtrate before transplanting.
Inhibition of tobacco mosaic virus (TMV) infection by 4 surfactants, sodium salts of alpha olefin (AOS), linear alkylbenzene (LAS), dioctyl sulfosuccinate (OSS), and dodecyl benzene sulfonic acid (SAS), was examined on tobacco cv. Xanthi-nc and NC 82. Infection of virions or TMV RNA was inhibited over 98% by the surfactants (2500 rpm). However, symptom development and viral concentration in tobacco plants treated with the surfactants into the rhizosphere soil 3 days before inoculation with TMV on leaves were not different from those in untreated tobacco plants. This indicates no significant systemic effects of the surfactants on the inhibition of TMV infection. The surfactants, except LAS, had no effect on the inhibition of viral infection when purified virions mixed with each surfactant and ultracentrifuged were inoculated on the tobacco plants. The virus was almost inactivated by LAS, showing that the viral infection was reduced more than 96%. The virus particles treated with the surfactants were not distinguishable in size and dimension from untreated normal particles, suggesting that the inhibitory action of the surfactants to TMV infection may not involve disintergration or uncoating of the virus at the early stage of infection.
Induction of systemic acquired resistance (SAR) against phytophthora blight and pathogenesis-related (PR) protein accumulation by TMV infection in pepper plant (Capsicum annuum cv. Nockwang) were examined to understand the mechanism of the systemic acquired resistance in pepper plant. The zoospore suspension of Phytophthora capsici was inoculated on stem of pepper plant in which TMV-pepper strain had been inoculated on fully expanded upper leaves, and thephytopha blight incidence was examined. Both disease severity and lesion length of phytophthora blight were much smaller in TMV pre-inoculated pepper plant than in uninoculated control plants. The phytophthora blight incidence was decreased about 50% in the TMV pre-inoculated pepper, compared to the uninoculated control plant at 10 days after P. capsici inoculation. Accumulation of PR1 and PR5 proteins in intercellular fluid of TMV-inoculated and uninoculated upper leaves were monitored by immuno-blot with tobacco P1b and PR5a, antibody during induction of SAR. PR1 and PR5 were detected from 24 hours after TMV inoculation in both TMV-inoculated and uninouclated upper leaves, and increased rapidly in TMV-inoculation in uninoculated upper leaves were defoliated. PR5 could be detected upto 20 days after TMV inoculation in uninoculated upper leaves. These results suggest that TMV infection induces SAR against phytophthora blight in pepper plant, and that PR proteins are accumulated very rapidly during induction of SAR and maintained for quite long time in pepper plant.
Wasabies showing mosaic symptoms were collected and extracted for virus purification. Tobacco mosaic virus (TMV) was identified as causal agent by electron microscopy and nucleic acid and coat protein analyses. TMV strains were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). TMV was identified as W and C strain in wasabi. The results of host reaction indicated that this virus induced local lesions on Nicotiana tabacum cv. Bright Yellow and N. glutinosa, leaf spots on Chenopodium amaranticolor and mosaic symptoms on wasabi. Rot shape virus particles were observed and was about 300 nm in length. About 6.5 kb single RNA molecule was observed from extracted viral RNA sample and 26 KDa coat protein was detected in denatured acrylamide gel. Infection ratio of TMV was 8% for the first cultivation year, but was 22% for the second year when TMV-W antiserum was used. The results of this experiment showed that infection ratios of both TMV-W and TMV-C strains were higher compared to that of TMV-P strain.
Kim Young-Sook;Hwang Eui-Ii;Oh Jung-Hoon;Kim Kab-Sig;Yeo Woon-Hyung
Journal of the Korean Society of Tobacco Science
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v.26
no.2
s.52
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pp.79-84
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on tobacco mosaic virus (TMV) infection to tobacco plants, we found a bacterial isolate KTGBP10, which was identified as a Stenotrophomonas sp., strongly inhibited the infection of TMV. When the culture filtrate from KTGBP10 was applied on the upper surface of leaves of Xanthi-nc tobacco plants at the same time or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition of TMV infection was achieved. And $40\%$ inhibition was shown with application of the culture filtrate to the under surface of leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to the healthy ones during transplanting work was reduced by $87.1\~92.6\%$ when the culture filtrate or cell suspension was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. When the broth filtrate of KTGBP10 was supplied by soaking through the cut-leaves before and/or after virus inoculation, the TMV infection was also inhibited by $50.4\~65.3\%$.
Kim, Young-Sook;Hwang, Eui-ll;O, Jeong-Hun;Kim, Kab-Sig;Ryu, Myong-Hyun
The Plant Pathology Journal
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v.20
no.4
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pp.293-296
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on Tobacco mosaic virus (TMV) infection on tobacco plants, we found a bacterial isolate KTB3, and identified it as Acinetobacter sp. which strongly inhibited the infection of TMV When the culture filtrate from KTB3 was applied on the upper surface of the Xanthi-nc tobacco leaves at the same time, or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Likewise, 86% inhibition was achieved, when the culture filtrate was applied on the underside of the leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to healthy ones during transplanting work was reduced by 92%, when the culture filtrate was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. Antiviral substance from the culture filtrate was purified by ethanol precipitation, dialysis, DEAE-cellulose, and Sephadex G75 gel column chromatography. The partially purified active material which showed positive color reaction to sugar and protein inhibited TMV infection by 60% at 1 ${\mu}$g/ml.
Out of various fungi and bacteria tested for inhibition of Tobacco mosaic virus(TMV) infection using Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc, a bacterial isolate JB-l, identified as Pseudomonas putida had a strong direct inhibitory activity against the TMV infection. Its systemic or indirect activity was also noted at more than a half level of the direct control efficacy. Disease severity was reduced significantly in the susceptible tobacco N. tabacum cv. NC 82 by the treatment of the bacterial culture filtrate, somewhat more by the pretreatment than by simultaneous treatment, probably by inhibiting the TMV transmission and translocation in the plants, showing negative serological, which responses in the viral detection by DAS-ELISA. TMV-inhibitory substances from P. putida JB-1 were water-soluble, stable to high temperature(even boiling), and to a wide range of pH. As proteinase K nullified their antiviral activity, the TMV inhibition activity of P. putida may be derived from proteinaceous materials. In electron microscopy, TMV particles treated with the JB-1 culture were shown to be shrunken with granule-like particles attached on them. All of these aspects suggest that P. putida JB-1 may be developed as a potential agent for the control of TMV.
Crude sap, which was extracted from six Amaranthaceae plants, inhibited local lesion formation on Nicotiana glutinosa by tobacco mosaic virus(TMV) infection. Especially the remark. able inhibitory effect to TMV infection was shown on leaves of N. glutinosa precoated with the sap from Amaranthus mangostanus. The inhibitory activity of the sap from A. mangostanus was stable to storage in vitro for I day and to dilution 1/4 of the sap with distilled water. However, its activity was lost when the sap was heated at $70^{\circ}C\;to\;100^{\circ}C$ for 10 minutes. When the leaves of N. glutinosa precoated with the sap were sprayed with water, the inhibitory effect to TMV infection was maintained for 2 days. The A. mangostanus sap readjusted pH 3, pH 5, or pH 9 with 1 N HCl or 1 N NaOH did not decline the inhibitory action but the sap absorbed with $5\%\;to\;15\%$ charcoal completely lost their action. The protein components purified from A. mangostanus sap revealed three major bands by $5\%\;to\;15\%$ polyacrylamide gel electrophoresis and the top component of which showed the inhibitory action to TMV infection.
Biological and serological assays were conducted with overwintered roots of tobacco and red pepper, capsule of tobacco, and several species of weeds in order to check whether those tissue could serve as a natural source of effection of tobacco mosaic virus (TMV) to field tobacco plants in the spring. Also in this study TMV occurrence was surveyed at several different stages of tobacco growth to see if a natural source discussed above has anything to do with actual appearance of TMV at fields. The results are as follows 1) The most critical period for TMV infection was the time when tobacco plants were handled with human hands; in the case of the modified polyethylene film mulching system it was at transplantation and when this modified system was changed to the regular system, and, in the case of the regular polyethylene film mulching system, the time was at transplanting and at primary sucker control by hands. 2) Roots of tobacco and red pepper were found to carry infective TMV even after overwintering in the soil. 3) Out of 38 weed species belonging to 22 families examined, only two species, Solanum nigrum and Physalis alkekengi var. franchetii were shown to be naturally infected with TMV. 4) TMV was isolated from capsule tissue, but not from immature anther of tobacco.
The culture filtrate of Streptomyces sp. B25, which was identified in this experiment, was tested for the control of tobacco mosaic virus (TMV) with the susceptible tobacco cultivar, NC 82, under the field conditions following the preliminary examination of its characters for TMV control. Control efficacy of the culture filtrate against TMV infection continued over 50% up to 6 days after treatment, and its systemic effect was about 30% of the direct effect. In field conditions control efficacy of the culture filtrate against TMV infection was 95.3 % at 2 weeks after TMV inoculation, and decreased to 58.3 % at 3 weeks after inoculation. Five fold-dilution of the culture filtrate showed about half of the control efficacy by the stock culture filtrate. Analysis of the antibiotic material responsible for the inhibition of TMV infection through nuclear magnetic resonance experiments revealed that the antibiotic is antimycin $A_1$, which is firstly reported as an anti-phytoviral antibiotic in this experiment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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