• 생명과학회지
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• 제30권4호
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• pp.359-369
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• 2020

많은 면역 소재 연구에서 RAW 264.7 세포를 이용한 결과는 많이 보고되어 있으나 T 세포 유래 TK-1 세포를 활용한 연구결과는 거의 보고되어 있지 않다. 또한 식물 유래 성분인 β-sitosterol의 효능 연구에 비하여 그 유사체인 daucosterol의 면역 활성 조절 기능에 관한 연구도 매우 부족하다. 본 연구에서는 산약, D. batatas, 에서 β-sitosterol과 daucosterol을 추출하여 분리하고 NMR 방법으로 동정하였다. 이후 분리된 phytosterols의 면역 증강 또는 억제 효능을 규명하기 위해 lipopolysaccharide로 염증반응이 유도된 RAW 264.7 세포와 TK-1 세포에 β-sitosterol과 daucosterol을 각각 농도별로 12시간 동안 처리한 후에 염증관련 유전자인 COX-2, TNF-α, IL-6, iNOS의 상대적인 발현양을 RT-PCR 방법으로 분석하였다. 대식세포주인 RAW 264.7에 β-sitosterol을 처리하였을 때, LPS만을 처리한 대조군의 발현 증가량과 비교하여 TNF-α와 iNOS의 상대적인 발현양이 3 fold 이상 증가하였다. TK-1 세포의 경우에서는 β-sitosterol의 처리 농도의존적으로 TNF-α의 발현양은 감소하고 iNOS의 발현양은 증가하였다. Daucosterol을 RAW 264.7 세포에 처리한 경우 COX-2, TNF-α, IL-6의 발현양이 0.7~1.2 fold 정도로 변화하였으며 iNOS의 경우는 특이하게 0.8~0.18 fold로 발현양이 농도의존적으로 감소하였다. TK-1 세포에 daucosterol을 처리한 경우에는, 놀랍게도 LPS만 처리된 경우와 비교하여 상대적으로 TNF-α, IL-6, iNOS의 발현량이 급격하게 감소하는 것을 확인하였다. 결과적으로, β-sitosterol의 처리는 RAW 264.7 세포에서 TNF-α, iNOS의 발현증가를 유도하여 면역 상승 효과에 관여하였다. TK-1 세포에서는, iNOS 발현 수준이 증가하였고, 반면에 TNF-α 발현수준은 감소하여, β-sitosterol의 면역 억제 활성을 보여주었다. Daucosterol은 RAW 264.7 세포의 iNOS 발현양을 억제하고 TK-1 세포에서 TNF-α, IL-6, iNOS의 발현을 크게 억제함으로써, 대식세포와 T 세포주에서 모두 면역 억제 효능을 보이는 것으로 판단된다.

• Journal of Forest and Environmental Science
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• 제27권2호
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• pp.81-91
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• 2011

An exploratory study was conducted in Gopalganj, a southern district of Bangladesh to explore the role of wild date palm (Phoenix sylvestris Roxb.) husbandry in the rural economy. A total of 36 households in the study area were interviewed using a semi-structured questionnaire. A multistage sampling method with 10% intensity and a semi-structured questionnaire were used for the study. Based on the land holding capacity of the households, the farmers were categorized into five groups as landless, marginal, small, medium, and large. The date palm was distributed over seven different habitats of which roadside support the highest value (31%) followed by agricultural field and orchard (25% each). Though the large category farmers own most of the palms (43%), a considerable portion (562 individuals out of 1980) of it is managed by the landless farmers, who earn a substantial livelihood from the palms. The farmers manage the palm mainly for juice production; juice is either used fresh as drink or after some sort of processing as molasses and/or alcoholic beverage. Date palm husbandry contributes 32,601 Tk., 21,107 Tk., 20,626 Tk., 29,574 Tk. and 35,335 Tk. respectively to the five group seasonally and 50,980 Tk., 77,556 Tk., 90,208 Tk., 112,560 Tk., 140,675 Tk. respectively annually (1 US$ = 70 Tk.). Date palm trees contribute 65.48% of mean annual income to landless farmers followed by 27.21% to marginal farmers. However the poor marketing system result in decreasing the annual return from palm trees. Palm husbandry could be a promising source of rural incomes in Bangladesh if the farmers' traditional management knowledge was linked to more scientific management practices.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제22권2호
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• pp.114-121
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• 2014

Refractoriness of acute myeloid leukemia (AML) cells to chemotherapeutics represents a major clinical barrier. Suicide gene therapy for cancer has been attractive but with limited clinical efficacy. In this study, we investigated the potential application of herpes simplex virus thymidine kinase/ganciclovir (HSV-TK/GCV) based system to inhibit chemoresistant AML cells. We first generated Ara-C resistant K562 cells and doxorubicin-resistant THP-1 cells. We found that the HSV-TK/GCV anticancer system suppressed drug resistant leukemic cells in culture. Chemoresistant AML cell lines displayed similar sensitivity to HSV-TK/GCV. Moreover, HSV-TK/GCV killing of leukemic cells was augmented to a mild but significant extent by all-trans retinoic acid (ATRA) with concomitant upregulation of Connexin 43, a major component of gap junctions. Interestingly, HSV-TK/GCV killing was enhanced by expression of vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G), a fusogenic membrane protein, which also increased leukemic cell fusion. Co-culture resistant cells expressing HSV-TK and cells stably transduced with VSV-G showed that expression of VSV-G could promote the bystander killing effect of HSV-TK/GCV. Furthermore, combination of HSV-TK/GCV with VSV-G plus ATRA produced more pronounced antileukemia effect. These results suggest that the HSV-TK/GCV system in combination with fusogenic membrane proteins and/or ATRA could provide a strategy to mitigate the chemoresistance of AML.

• 미생물학회지
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• 제48권1호
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• pp.16-21
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• 2012

여러 식물의 근권에서 세균 균주들을 분리하여 이들의 항진균성 물질 생성능을 조사하였다. 분리균주 중 Fusarium oxysproum을 포함한 5가지 주요 식물병원성 진균에 대한 생장저해가 우수한 7개 균주를 16S rRNA 유전자 염기서열로 동정하였다. 이들 중 Paenibacillus peoriae RhAn32, Pseudomonas otitidis TK1과 Bacillus cereus TK2가 가장 넓은 생장 저해범위를 나타내었으며 항진균성 물질 중 siderophore 생성능은 P. otitidis TK1이 3.21 mM/ml로 가장 높았고 HCN은 Pseudomonas koreensis Rh2와 Rh7 균주만이 생성하였으며 Brevibacterium frigoritolerans EnA9와 P. peoriae RhAn32는 각각 1558.9와 $1436.7{\mu}M$ glucose/min/mg protein의 높은 chitinase 활성을 나타내었다. P. otitidis TK1과 P. peoriae RhAn32의 항진균능을 진균과의 공동배양을 통해 정량분석한 결과 세 종류의 Fusarium oxysproum의 생장을 유의성 있게 저해하였다. P. otitidis TK1은 식물생장을 촉진하는 호르몬인 auxin의 생성능도 가장 높았는데 이 균주를 4주 자란 토마토 유묘에 F. oxysporum f. sp. lycopersici와 동시에 접종하여 8주간 재배하였을 때 줄기와 뿌리 길이 및 습윤 중량이 비접종 대조군에 비해 각각 45.7, 64.9와 118%로 유의성 있게 증가하였다. 따라서 이 균주들은 유기합성농약을 대체하면서 식물생장을 촉진하는 미생물제로서의 적용이 가능할 것으로 기대된다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제45권3호
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• pp.354-361
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• 2002

목 적: 본 연구에서는 in vitro 및 in vivo에서 HSV-TK 유전자 치료의 bystander 효과 및 기전을 관찰하고, 싸이토카인 유전자의 병합 치료가 bystander 효과를 증폭시킬 수 있는지 조사하여 그 결과를 향후 신경모세포종 치료에 적용하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법: A/J 마우스 신경모세포종 모델에서, neuro-2a/TK 세포와 unmodified neuro-2a세포를 여러 비율로 혼합하여 접종한 후 GCV를 투여하여 종양의 크기 변화 및 생존 유무를 관찰하였다. 마우스 신경모 세포종에서 bystander 효과의 기전을 알아보기 위해 neuro-2a/TK 세포를 주입한 마우스의 조직을 절개하여 connexin 43, CD4+ 및 CD8+ 세포 침윤을 관찰 하였다. 10% 및 25% HSV-TK 투여 군에서 neuro-2a/IL-2 세포의 투여가 bystander 효과를 증폭시키는 지 조사하였다. 결 과 : 1) in vitro 및 in vivo에서 bystander 효과는 뚜렷하게 관찰되었다. 2) 마우스 신경모세포종의 면역 조직 화학 염색 검사에서 connexin 43 발현은 관찰되지 않았으나 많은 수의 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 침윤이 관찰되었다. 3) 10% 및 25% HSV-TK 투여군의 마우스에서 neuro-2a/IL-2 세포의 투여는 대조군과 비교하여 종양의 성장을 더 억제 시켰다. 결 론: In vitro 및 in vivo에서 HSV-TK/GCV 유전자 치료의 bystander 효과는 뚜렷하였으며, 그 기전으로 면역 세포가 중요한 역할을 할 것으로 추측된다. 그리고 bystander 효과는 IL-2 투여에 의해 증폭됨을 확인하였다. 이는 향후 신경모세포종의 수술 후 잔존암 치료에 HSV-TK/GCV 유전자 치료가 이용 가능할 것으로 생각된다.

• 미생물학회지
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• 제51권2호
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• pp.177-180
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• 2015

Bordetella bronchiseptica에 의한 돼지위축성비염과 Salmonella gallinarum에 의한 가금티푸스 방지 방법을 찾기 위해서 두 세균병원체에 항균활성을 갖는 세균 균주를 축산농가의 여러 시료로부터 분리하였다. 분리균주 372개 중 TK3 균주가 두 병원체에 대해 가장 우수한 항균활성을 나타내었으며, 16S rRNA 염기서열 분석 결과 Bacillus amyloliquefaciens로 동정되었다. B. amyloliquefaciens TK3는 siderophore, rhamnolipid와 antimicrobial peptide 같은 항균물질을 분비하여 두 병원체의 생장을 저해할 수 있었다. TK3 균주는 Chrome azurol S 한천 평판에서 siderophore 생성반지름이 14일 배양 후 0.53 cm이었으며, King's B 배지에서 1.06 mmol/ml의 siderophore를 생성하였다. 또한 82.4 mg/L의 rhamnolipid를 분비하였으며, LB배지에 $30{\mu}l/ml$ 농도의 추출된 antimicrobial peptide 첨가 시 두 병원체의 생장을 완전히 저해하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권5호
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• pp.541-547
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• 1999

Constructions of a transfer vector and a recombinant baculovirus using the thymidine kinase gene of the Herpes simplex virus type 1 strain F (HSV -1) were carried out. Newly cloned transfer vector, pHcgXIIIB, was constructed by insertion of the glycoprotein gX gene signal peptide sequence of Pseudorabies virus into the baculovirus vector pHcEV-IV. The gX sequence was inserted just downstream from the promoter for the polyhedrin gene of the Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV). HSV-1 thymidine kinase(tk) gene (1.131 kb) was used as a candidate gene for transferring into the baculovirus expression system. The tk gene was inserted into a BamHI site downstream from the gX sequence-promoter for the polyhedrin gene in the pHcgXIIIB transfer vector and was transferred into the infectious lacZ-HcNPV expression vector. Recombinant virus was isolated and was named gX-TK-HcNPV. The recombinant virus produced a 45 kDa gX-TK fusion protein in Spodoptera frugiperda cells, which was confirmed by Western blot analysis. Microscopic examination of gX-TK-HcNPV-infected cells revealed normal multiplication. Fluorescent antibody staining indicated that the gX-TK fusion protein was present in the cytoplasm. These results indicated that the transfer vector successfully transferred the gX-tk gene into the baculovirus expression system.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제31권11호
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• pp.3309-3312
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• 2010

D-[$^{18}F$]FMAU and L-[$^{18}F$]FMAU are F-18 labeled nucleoside analogue which have been efficiently synthesized in order to be a PET imaging probe. D-[$^{18}F$]FMAU and L-[$^{18}F$]FMAU were compared as PET imaging agents using HSV1-TK gene expressing tumor-bearing mice. Their cellular uptake profiles were also compared using MCA and MCA-TK cell lines. D-[$^{18}F$]FMAU demonstrated higher cellular uptake and higher accumulation in MCA-TK tumor regions than L-[$^{18}F$]FMAU. On the other hand, L-[$^{18}F$]FMAU showed higher MCA-TK/MCA ratio of %ID/g than that of D-[$^{18}F$]FMAU. L-[$^{18}F$]FMAU can be utilized as a good candidate for HSV1-TK PET imaging. It can be used for antiviral drug evaluation.

• 말소리와 음성과학
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• 제3권2호
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• pp.29-35
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• 2011

This paper examines several articulatory properties of /k/, known as a trigger of place assimilation as well as the object of post-obstruent tensing (/tk/), in comparison to non-assimilating controls (/kk/ and /kt/). Using EMMA, tongue body articulation in the place assimilation context robustly shows greater spatio-temporal articulation and lower jaw position. Results showed several characteristics. Firstly, constriction duration of the tongue body gesture in C2 of the assimilation context (/tk/) was longer than non-assimilating controls (/kk/ and /kt/). Secondly, constriction maxima also demonstrated greater constriction in the /tk/ sequences than in the control /kk/, but similar values with the control /kt/. In particular, results showed a significant relationship between the two variables - the longer the constriction duration, the greater the constriction degree. Lastly, jaw height was lower for the assimilating context /tk/, intermediate for the control /kk/, and higher for the control /kt/. Results suggest that speakers have lexical knowledge of place assimilation, producing a greater tongue body gesture in the spatio-temporal domains with lower jaw height as an indication of anticipating reduction of C1 in /tk/ sequences.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.83-89
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• 1990

토양으로부터 세포의 adcnosinedeaminase를 생산하는 두종의 방선균 J-845S주와 J-326TK 주름 분리하여 각각 Streptomycs sp. J-845S와 Nocardioides sp. J326TK로 동정하였다. Streptomyces sp. J-845S는 그람염색 양성, 비항산성균으로 기균사의 흰색계열의 간상형의 비운동성의 포자를 형성하였으며, 포자의 표면은 평할하였고 나선상의 포자연쇄를 형성하였다. 균사체의 분자는 양호하였다. 세포벽 구성성분을 분석한 결과 LL-diaminopimelic acid를 함유하는 cell wall type I 이었으며, phospholipid type II였다. Nocardioides sp. J-326TK는 그람염색반응 양성, 항산성염색반응 음성이었으며, 균사체는 불규칙한 간상 또는 구사으이 절편으로 분절되었다. 기균사의 분자는 그다지 인정되지 않았으며, 포자형태의 긴 elements의 표면은 평할하였다. 세포벽 구성성분을 검토한 결과 cell wall type I과 phospholipid type I으로나타났다.