Pectate lyase isoenzymes을 분비하는 Erwinia carotovorn subsp. carotovora LY34는 식물조직을 연화시키는 연부균이다. 이 균주로부터 게놈 DNA를 분리하여 Sau3Al 제한효소로 부분 절단한 다음 pBluescript $SK^+$ 벡터에 클로닝하여 pectate Iyase를 분비하는 클론을 분리하였다 분리 결과 4.2 kb크기의 DNA 단편을 가지고 있었으며 이를 다시 재클로닝하여 3.1 kb크기의 pelCI유전자를 함유하는 pLYPA100을 구하였다. 이 유전자의 DNA 염기서열을 분석한 결과 374 개의 아미노산을 구성하는 1,122 bp의 ORF를 확인하였다. 시작코돈과 종결코돈은 ATG와 TAA였으며 초기 서열 22개의 아미노산으로 구성된 전형적인 원핵세포의 signal peptide가 존재하였다. PeICI의 단백질 염기서열을 다른 단백질과 유사성을 분석한 결과 Erwinia carotovera subsp. carotovora Er 균주의 PelIII, Erwinia carotevora subsp. carotovora SCR193 균주의 PeIC 및 Erwinia caretovora subsp. atroseptica C18 균주의 Pel3과 유사하였으며 PLbc family에 속하였다. PeICI의 분자량은 40,507, pI는 7.60으로 계산되었다.
H. cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV) 의 polyhedrin 아미노산 및 polyhedrin gene 의 염기서열을 분석하였다. Polyhedrin 은 SDS-PAGE 상에서 3개의 polypeptide band 가 나타났고 주요 polypeptide 는 약 25 Kd 의 분자량을 갖고 있었다. 또한 polyhedrin 은 17 개의 다른 아미노산으로 구성되어 있었다. HcNPV DNA를 EcoRI 효소로 절단하여 $\alpha^{32}P$로 labelling 된 Autographa californica (AcNPV) polyhedrin gene cDNA 의 probe DNA를 이용하여 hybridization 한 결과 polyhedrin gene은 EcoRI 절편들중 H 절편에 양성반응을 나타냈다. 또한 polyhedrin gene 을 포함하고 있는 EcoRI-H 절편을 pUC8 벡터에 cloning한 다음 이를 hPE-H라고 이름하였다. HcNPV genome DNA 의 promoter 부위를 sequence한 결과 TATA box의 염기배열은 polyhedrin gene 전사 개시위치로부터 위쪽으로 -79 bp 의 5' flanking 부위에서 발견되었다. polyhedrin gene 내 CAAT box는 TATA box 측면 염기 배열에서 나타나지 않았고, 4개의 tandem repeat 5'-CTAATAT-3' 와 5'-TAAATAA-3'의 염기는 polyhedrin gene내 전이 개시 위치로 부터 위쪽으로 -141 과 -108 bp 또는 -83 bp 부위에 존재하였으며, 다른 하나는 전이 개시위치로 부터 아래쪽으로 -52 bp 부위에서 발견되었다. 그리고 polyhedrin gene 내 전이 개시위치로 부터 위쪽으로 -141 bp 부위는 다량의 AT (78%) 염기가 존재하였다. 또한 polyhedrin 의 개시 coding region 은 ATG 였고 종결 coding region은 TAA 였다.
KSII Transactions on Internet and Information Systems (TIIS)
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제14권4호
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pp.1520-1542
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2020
Traditional software testing typically uses many physical resources to manually build various test environments, resulting in high resource costs and long test time due to limited resources, especially for small enterprises. Cloud computing can provide sufficient low-cost virtual resources to alleviate these problems through the virtualization of physical resources. However, the provision of various test environments and services for implementing software testing rapidly and conveniently based on cloud computing is challenging. This paper proposes a multilayer cloud testing model based on cloud computing and implements a hybrid cloud testing system based on virtual machines (VMs) and networks. This system realizes the automatic and rapid creation of test environments and the remote use of test tools and test services. We conduct experiments on this system and evaluate its applicability in terms of the VM provision time, VM performance and virtual network performance. The experimental results demonstrate that the performance of the VMs and virtual networks is satisfactory and that this system can improve the test efficiency and reduce test costs through rapid virtual resource provision and convenient test services.
A gene (xynA) encoding the endo-xylanase (E.C.3.2.1.8) from Bacillus stearothermophilus was cloned in E. coli, and its complete nucleotide sequence was determined. The xynA gene consists of a 636 base pairs open reading frame coding for a protein of 212 amino acids with a deduced molecular weight of 23, 283 Da. A putative signal sequence of 27 amino acid residues shows the features comparable with the Bacillus signal sequences; namely, the signal contains a positively charged region close to the N-terminus followed by a long hydrophobic string. The coding sequence is preceded by a possible ribosome binding site with a free energy value of -16.6 kcal/mol and the transcription initiation signals are located further upstream. The translation termination codon (TAA) at the 3 end of the coding sequence is followed by two palindrome sequences, one of which is thought to act as a terminator. The xynA gene has a high GC content, especially in the wobble position of codons (64%). Comparison of the primary protein sequence with those of other xylanases shows a high homology to the xylanases belonging to family G.
To develope the novel baculovirus transfer vector, the p10 gene was cloned from the Bombyx mori nuclear polygedrosis virus (BmNPV) vB2 strain isolated from the B. mori larvae of sericultural farms. The novel transfer vector was constructed by using the p10 gene of BmNPV vB2 strain was 210 bp. The TAAG sequence at the -71 bp of upstream from translation initiator ATG and two polyadenylation signal site at the downstream from terminator TAA were also detected in the p10 gene. The 5' and 3' flanking region of the p10 gene amplified by PCR was cloned into pBluescriptII SK(+) and then transfer vector pBm10 was construceted. The 7.9 kb pBm10 was analysed by restriction enzymes and the map was confirmed. In order to determine the expression of foreign gene of pBm10, $\beta$-galactosidase gene was inserted in the SmaI site of foreign gene cloning site of pBm10. The pBm10 containing $\beta$-galactosidase gene was cotranfected wth genomic DNA of BmNPV vB2 into BmN-4 cells. The recombinant baculovirus expressing $\beta$-galactosidase was also produced polygedra in the infected cells. The results indicated that pBm10 is functional, suggesting that in the baculovirus expression vector system, the recombinant virus produced by pBm10 was effective by oral infection for the producing recombinant proteins in in vivo expression.
Zinc oxysulfide nanocrystals (ZnOS NCs) were synthesized by forming ZnS phase on a ZnO matrix. ZnO nanocrystals (NCs) with a diameter of 10 nm were synthesized by forced hydrolysis in an organic solvent. As-synthesized ZnO NCs aggregated with each other due to the high surface energy. As acetic acid (AA) was added into the milky suspension of the aggregated ZnO NCs, transparent solution of well dispersed ZnO NCs formed. Finally ZnOS NCs were formed by adding thioacetic acid (TAA) to the transparent solution. The effect of recrystallization on the structural, optical and electrical properties of the ZnOS NCs were studied. The results of UV-vis absorption confirmed the band gap tunability caused by increasing the curing temperature of ZnOS thin films. This may have originated from the larger effective size due to the recrystallization of zinc sulfide (ZnS). From XRD result we identified that ZnOS thin films have a zinc blende crystal structure of ZnS without wurtzite ZnO structure. This is probably due to the small amount of ZnO phases. These assertions were verified through EDS of FE-SEM, XPS and EDS mapping of HR-TEM results; we clearly proved that ZnOS were comprised of ZnS and ZnO phases.
Extrinsic connections between the cortex of the superior temporal sulcus (STS) and the ventral striatum in pigtail macaque monkeys (Macacca nemestrina) were studied by injection of retrograde tracers into the ventromedial caudate nucleus, the ventral and central shells of the nucleus accumbens (NA), the dorsal core of the NA, and the ventrolateral putamen. In the present study, we demonstrate that the projections from the unimodal (area TAa, IPa, TEa, and TEm) and the multimodal (area TPO and PGa) sensory association areas in the STS mainly terminate in the ventromedial caudate nucleus as well as in the ventral and central shells of the NA. However, there are only few projections to the dorsal core of the NA and the ventrolateral putamen from the sensory association cortex in the STS. Based on these differential neural connections between the subterritories of the ventral striatum and the sensory association areas, the ventromedial caudate nucleus and the shells of NA appear to be major integration sites for sensory input from the STS and functionally different from the dorsal core of NA and the ventrolateral putamen.
Fishes in genus Sardinella are small pelagic species, which plays an important role in marine ecosystem as the first consumer. Those species are also commercially important, whose total catch reaches 278,600 tons in 2011 in Indonesia, but their identification has been difficult for their morphological similarity. In this study, we reported Sardinella jussieu for the first time in Indonesian coastal area (Banten Bay, Indonesia, $6^{\circ}\;0^{\prime}\;50.00^{{\prime}{\prime}}\;S-106^{\circ}\;10^{\prime}\;21.00^{{\prime}{\prime}}\;E$). We were able to confirm the species by both its morphological characteristics including the black spot at dorsal fin origin, the dusky pigmentation at caudal fin, 31 total scute numbers, and DNA sequence identity in the GenBank database by the molecular analysis. Its total mitochondrial genome was determined by the combination of next-generation sequencing and typical PCR strategy. The total mitochondrial genome of Sardinella jussieu (16,695 bp) encoded 13 proteins, 2 ribosomal RNAs, 22 transfer RNAs, and the putative control region. All protein-coding genes started with ATG and typical stop codon and ended with TAA or TAG except for ND4 in which AGA is used. Phylogenetic analyses of both COI region and full mitochondrial genome showed that S. jussieu is most closely related to Sardinella albella and Sardinella gibbosa
Triglopsis quadricornis Linnaeus, 1758 (Cottidae) is distributed in the Atlantic and Arctic and has four unique bony protuberances on its head. Here, we report the complete, circular, and annotated mitochondrial genome of T. quadricornis. The complete T. quadricornis mitochondrion was sequenced by high-throughput Illumina HiSeq platform. The sequences are 16,736 bp in size and contains 13 protein-coding genes (PCGs), 22 transfer RNA (tRNA) genes, a control region, and large and small ribosomal subunits. The overall genomic structure of T. quadricornis mitochondrion was conserved with the gene arrangement of Megalocottus and Myoxocephalus species, and phylogenetic analysis supports their sister relationships. Most PCGs consist of TAA or TAG as a termination codon, whereas COII, ND4, and CYTB have T-- as a stop codon. This complete mitochondrial DNA information of T. quadricornis will provide an essential genomic resource to elucidate the phylogenetic relationship and evolutionary history of the family Cottidae.
To develop a convenient promoter analysis system for fungi, a null-pigment mutant (NPG) of Aspergillus nidulans was used with the 4'-phosphopantetheinyl transferase (PPTase) gene, npgA, which restores the normal pigmentation in A. nidulans, as a new reporter gene. The functional organization of serially deleted promoter regions of the A. nidulans trpC gene and the Cryphonectria parasitica crp gene in filamentous fungi was representatively investigated to establish a novel fungal promoter assay system that depends on color complementation of the NPG mutant with the PPTase npgA gene. Several promoter regions of the trpC and crp genes were fused to the npgA gene containing the 1,034-bp open reading frame and the 966-bp 3' downstream region from the TAA, and the constructed fusions were introduced into the NPG mutant in A. nidulans to evaluate color recovery due to the transcriptional activity of the sequence elements. Serial deletion of the trpC and crp promoter regions in this PPTase reporter assay system reaffirmed results in previous reports by using the fungal transformation step without a laborious verification process. This approach suggests a more rapid and convenient system than conventional analyses for fungal gene expression studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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