In the previous report, we described the in vivo antitumor activity of PJ-4, a protein-polysaccharide fraction prepared from the culture filtrate of an insect-born fungus, Paecilomyces tenuipes DGUM 32001. In the present study, we elucidated the immunomodulating activity of PJ-4 on the BALB/c mouse splenic lymphocytes using flow cytometrical techniques. As a result, PJ-4 was found to stimulate the lymphocytes not only to form lymphoblasts but also to express CD25 (IL-2 receptor $\alpha$ chain) molecule, which is well known as a T cell activation marker. More interestingly, its T cell stimulatory activity was more strongly exerted on CD8$^{+}$ T cells than on CD4$^{+}$ T cells. All these data suggest that PJ-4 exerts its antitumor activity at least partly through stimulation of T cells which play major roles in the cell-mediated immune system.tem.
New protein secretion system was developed using Type III Secretion System of Salmonella. N-terminal region of SlrP and SptP effector proteins were fused with TliA and EstA-P lipases by overlapping PCR. Lipase activity of Salmonella with SptP-TliA fusion system increased by 2.6 fold compare with wild type Salmonella strain. This result showed that lipase secretion via the T3SS would be a useful protein secretion machinery.
The backbone molecular dynamics of the C-terminal part of the mouse Cdt1 protein (tCdt1, residues 420-557) was studied by high field NMR spectroscopy. The Secondary structure of this protein was suggested by analyzing of chemical shift of backbone atoms with programs TALOS and PECAN, together with NOE connectivities from 3D $^{15}N-HSQC-NOESY$ data. Measurement of dynamic parameters $T_1,\;T_2$ and NOE and limited proteolysis experiment provided information for domain organization of tCdt1(420-557). Analysis of the experimental data showed that the C-terminal part of the tCdt1 has well folded domain for residues 455-553. The residues 420-453 including ${\alpha}-helix$ (432-441) are flexible and probably belong to other functional domain in intact full length Cdt1 protein.
The present was undertaken to establish a model for the control of adipocytes differentiation by using antibody from egg yolk. The emulsion of membrane protein of 3T3L-1 cell membrane protein with the complete Freund's adjuvant was firstly immunized in layer. Second and third boosting were undertaken with two weeks intervals by injection of the emulsion of the same antigen with the incomplete Freund's adjuvant. After 4 week of the first immunization, eggs were collected and antibody (IgY) was purified from egg yolk. The purity of IgY was 60-98% determined by single radial immunodiffusion (SRID) methods. Titer value of the antibody showed high reactiviy for the preadipocytes membrane protein measured by ELISA. When the IgY was added in the test media containing either 2.5% porcine serum or 10% FBS(control), the differentiation of 3T3L-1 cells and Glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) activities was significantly decreased compared to the control cells(p〈0.05). When mice were subcutaneously injected with IgY raised against membrane protein of 3T3L-1 cells for 3 weeks, adipose tissue mass around ovary was tended to be decreased in female mice compared to those of control mice. It is suggested that a potential for manipulating of lipid accumulation through decrease in 3T3L-1 cell differentiation and fat accumulation in female mice by IgY treatment.
Lim, An Suk;Jeong, Hae Jin;Kim, So Jin;Ok, Jin Hee
ALGAE
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v.33
no.3
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pp.279-290
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2018
Microalgae have been utilized in diverse industries including aquaculture. Among the microalgae, dinoflagellates are known to have various bioactive compounds, and thus the interest in their application to industry has increased. In order to test their potential as food materials for aquaculture animals, the crude protein contents and compositions of amino acids of six dinoflagellates Heterocapsa rotundata (family Heterocapsaceae), Ansanella granifera (Suessiaceae), Alexandrium andersonii (Ostreopsidaceae), Takayama tasmanica (Brachidiniaceae), Takayama helix, and Gymnodinium smaydae (Gymnodiniaceae) belonging to diverse families were analyzed. The percentage of the amount of the crude protein relative to dry weight of T. tasmanica was the highest (65%) and that of A. andersonii was the lowest (26%). However, the highest percentage of total detected amino acids in crude protein was found in A. andersonii (98.2%). In all six dinoflagellates, glutamic acid was the most dominant amino acid in crude protein. However, the second main amino acid was aspartic acid for H. rotundata, A. granifera, T. helix, and G. smaydae, but were arginine and leucine for A. andersonii and T. tasmanica, respectively. Furthermore, T. tasmanica and T. helix did not have taurine and gamma-aminobutyric acid, whereas the other dinoflagellates possessed them. The percentages of essential amino acid contents of the dinoflagellates met the requirement levels for juvenile shrimps. In addition, the dinoflagellates were not toxic to the brine shrimp Artemia salina. Compared with the other microalgae reported so far, H. rotundata and A. andersonii can be used for arginine-rich diets, T. tasmanica for valine and leucine-rich diets, A. granifera for histidine-rich diets, T. helix for threonine-rich diets, and G. smaydae for lysine-rich diets. Therefore, based on their biochemical composition and toxicity to Artemia, the dinoflagellates could be used as essential amino acid sources for cultivating animals in the aquaculture industry.
Fifteen lactating crossbred cows were randomly allotted to three groups of 5 each, and fed three isoproteinous concentrate mixture varying in RDP and UDP ratios, viz. 71: 29 (T1) and 58: 42 (T2) and 44: 56 (T3), along with green maize and wheat straw given as 2/3 and 1/3 of total roughage respectively, for a period of 120 days. The DM intake (kg/d) differed significantly (p<0.01) among the treatments as well as among the fortnights over a period of 120 days. DMI (kg/d) progressively increased from first to eighth fortnight in all the treatments. The daily DMI (% BW) was significantly (p<0.01) lower in T1 (2.37) than those of T2 (2.82) and T3 (2.67). The body weights of cows decreased up to 4th fortnight in T1 and up to 3rd fortnight in T2 and T3, then it showed an increasing trend till the end of the experiment in all the treatments. Cows in T1 lost 10 kg body weight but cows in T2 and T3 gained 23 and 12 kg the body weight, respectively. Both the milk and FCM yield differed significantly (p<0.01) among the fortnights. The FCM yield increased up to 2nd fortnight in all the treatments and thereafter, the FCM yield declined gradually as the lactation advanced. The FCM yield (kg/d) was significantly (p<0.05) higher in T3 (10.47) than in T2 (9.81) and T1 (9.68), however, milk yield, SCM yield and milk energy yield did not differ among the treatments as well as among the fortnights. Fat and protein % in milk increased as the lactation advanced. However, fortnightly SNF % in milk showed an irregular trend. The % fat, protein, SNF and total solids in milk differed significantly (p<0.01) among the fortnights. The % fat and protein in milk varied significantly (p<0.01) among the treatments, being lowest in T1 and highest in T3. The feed efficiency for milk production showed a non-significant variation among the treatments as well as among the fortnights, but increased with the increase in UDP level. It is concluded that by increasing the UDP level from 29 to 56 per cent of CP in the diet of medium producing cows, the milk production increases and cost of milk production reduces.
This experiment was conducted with 30 adult wool producing Angora rabbits of either sex, to evaluate the effect of replacing soyflakes (SF), on equal protein basis, with low gossypol containing cottonseed meal (CSM) either alone or in combination with lysine and methionine; on the biological performance, total wool yield, wool yield per shearing, wool characteristics and mortality. Three experimental mash diets were prepared by incorporating SF (6%) as standard / control protein source $(T_1)$ and CSM (9%) as test protein source ($T_2$ and $T_3$). In $T_3$, amino acids-lysine and methionine (0.1 % each) were added. Animals were given the experimental diets about $150g{\cdot}day^{-1}{\cdot}head^{-1}$, for a period of 225 d or three shearing, and ad libitum Kudzu-vines. No significant effect of $T_2$ or $T_3$, on the body weight gain, total wool yield, wool yield per shearing and wool characteristics, was observed compared to $T_1$. However, the digestibility of dry matter, crude fibers, ether extract, acid detergent fibers, neutral detergent fibers, cellulose and hemicellulose was significantly (p<0.05) depressed in CSM based diets. Mortality of about 20% was recorded in $T_2$ and $T_3$, but not related to the addition of CSM or gossypol toxicity. More studies are needed to standardize the safe level of CSM, duration of safe feeding of CSM, and level of amino acids supplementation in CSM based diets.
This study was conducted to investigate the effects of the addition of cordyceps ochraceostromat, conjugated linoleic acid (CLA) and silkworm cocoon on the quality and storage characteristics of pork sausage manufactured by MDCM (mechanically deboned chicken meat) recovered protein. The samples were divided into 5 groups (sausage made from pork ham; control, 40% of MDCM recovered protein to replace pork ham; T1, 40% of MDCM recovered protein to replace pork ham with 0.1% cordyceps ochraceostromat; T2, 40% of MDCM recovered protein to replace pork ham with 0.1% CLA; T3, and 40% of MDCM recovered protein to replace pork ham with 0.1% silkworm cocoon; T4). The control sample had a higher moisture and protein contents and lower fat content than the other samples during 4 weeks of storage at $4^{\circ}C$ The treatment samples had lower lightness and higher redness values than the control (p<0.05). Hardness, cohesiveness, gumminess and chewiness were significantly lower in the treatment samples than the control (p<0.05). All sausage samples showed a significant increase in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), volatile basic nitrogen, and total plate counts during the storage time (p<0.05). In addition, the MDCM treatment samples had higher TBARS values than the control, but the VBN value of the treatment samples was lower than the control after the 4 weeks storage period.
A simple method for depleting E. coliS30 extracts of endogenous tRNA has been developed. An $ethanolamine-Sepharose^{(R)}$ column equilibrated with water selectively captured the tRNA molecules in E. coli S30 extracts. As a result, S30 extracts filtered through this column became completely dependent upon the addition of exogenous tRNA to mediate cell-free protein synthesis reactions. We anticipate that the procedures developed and described will be particularly useful for in vitro suppression reaction studies designed to introduce unnatural amino acids into protein molecules.
Over-expression of phospholipase D (PLD) 1 or PLD2 down-regulated CKII activity in NIH3T3 cells. The same results were found with catalytically inactive mutants of PLD isozymes, indicating that the catalytic activity of PLD is not required for PLD-mediated CKII inhibition. Consistent with this, 1-butanol did not alter CKII activity. The reduction in CKII activity in PLD-over-expressing NIH3T3 cells was due to reduced protein level, but not mRNA level, of the $CKII{\beta}$ subunit. This PLD-induced $CKII{\beta}$ degradation was mediated by ubiquitin-proteasome machinery, but MAP kinase and mTOR were not involved in $CKII{\beta}$ degradation. PLD isozymes interacted with the $CKII{\beta}$ subunit. Immunocytochemical staining revealed that PLD and $CKII{\beta}$ colocalize in the cytoplasm of NIH3T3 cells, especially in the perinuclear region. PLD binding to $CKII{\beta}$ inhibited $CKII{\beta}$ autophosphorylation, which is known to be important for $CKII{\beta}$ stability. In summary, the current data indicate that PLD isozymes can down-regulate CKII activity through the acceleration of $CKII{\beta}$ degradation by ubiquitin-proteasome machinery.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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