Long-lasting post-switched plasma cells (PCs) arise mainly from germinal center (GC) reactions, but little is known about the mechanism by which GC B cells differentiate into PCs. Based on our observation that the expression of the transcription factor CCAAT/enhancer binding protein β (C/EPBβ) is associated with the emergence of post-switched PCs, we enquired whether a cell-autonomous function of C/EPBβ is involved in the program for PC development. To address this, we generated C/EPBβ-deficient mice in which the Cebpb locus was specifically deleted in B cells after transcription of the Ig γ1 constant gene segment (Cγ1). In response to in vitro stimulation, B cells from these Cebpbfl/flCγ1Cre/+ mice had defects in the induction of B lymphocyte-induced maturation protein 1 (Blimp1) and the formation of IgG1+ PCs, but not in proliferation and survival. At steady state, the Cebpbfl/flCγ1Cre/+ mice had reduced serum IgG1 titers but normal IgG2c and IgM titers. Moreover, upon immunization with T-dependent Ag, the mice produced reduced levels of Ag-specific IgG1 Ab, and were defective in the production of Ag-specific IgG1 Ab-secreting cells. These results suggest that a cell-autonomous function of C/EPBβ is crucial for differentiation of post-switched GC B cells into PCs through a Blimp1-dependent pathway.
Objective : The aim of this study was to explore the immunity in rats transplanted with adipose-derived mesenchymal stem cells (ADSCs) and acellular nerve (ACN) for repairing sciatic nerve defects. Methods : ADSCs were isolated from the adipose tissues of Wistar rats. Sprague-Dawley rats were used to establish a sciatic nerve defect model and then divided into four groups, according to the following methods : Group A, allogenic nerve graft; Group B, allograft with ACN; Group C, allograft ADSCs+ACN, and Group D, nerve autograft. Results : At the day before transplantation and 3, 7, 14, and 28 days after transplantation, orbital venous blood of the Sprague-Dawley rats in each group was collected to detect the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets using flow cytometry and to determine the serum concentration of interleukin-2 (IL-2), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) and $interferon-{\gamma}$ ($IFN-{\gamma}$) using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). At each postoperative time point, the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets and the serum concentration of IL-2, $TNF-{\alpha}$, and $IFN-{\gamma}$ in group C were all near to those in group B and group D, in which no statistically significant difference was observed. As compared with group A, the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets and the serum concentration of IL-2, $TNF-{\alpha}$, and $IFN-{\gamma}$ were significantly reduced in group C (p<0.05). Conclusion : The artificial nerve established with ADSCs and ACN has no obvious allograft rejection for repairing rat nerve defects.
The Journal of Korean Society for School & Community Health Education
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v.2
no.2
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pp.1-22
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2001
The purpose of this study was to evaluate the effect of moderate physical exercise program on a number of immune parameters in middle school boys($15.07{\pm}0.39$ yrs). 14 volunteers were included in this physical exercise program. They were randomly assigned to an experiment(7) and a control(7) group. Measurements were taken before program, after 4 weeks and 8 weeks of aerobic exercise for immune parameters such as number of circulating leukocytes, concentration of WEC subsets, lymphocyte subsets, immunoglobulins, complements, and number of blood adipose components. Aerobic exercise consisted of track running at a work intensity of 65% HRmax, $45{\sim}55$ min per day, 3 times per week, and for 8 weeks. The results are as follows; 1. There were no significant changes between and within groups in the number of circulating leukocytes and concentration of WEC subsets. 2. There were significant(p<.05) changes in concentration of B-cell between groups, and T-cell, helper T-cell, and B-cell within experimental group. 3. There were no significant changes between and within groups in concentration of complements. 4. There were significant(p<.05) changes in concentration of IgG between groups and within experimental group. 5. There were significant(p<.05) changes in concentration of TG between groups, and TG, HDL-C and LDL-C within experimental group. In conclusion, the moderate exercise training for 8 weeks can be beneficial on immune function and decrease the concentration of flood adipose components in adolescents.
Subunit vaccines are safer and more stable than live vaccines although they have the disadvantage of eliciting poor immune response. To develop a subunit vaccine, an effective delivery system targeting the key elements of the protective immune response is a prerequisite. In this study, oxidized carbon nanospheres (OCNs) were used as a subunit vaccine delivery system and tuberculosis (TB) was chosen as a model disease. TB is among the deadliest infectious diseases worldwide and an effective vaccine is urgently needed. The ability of OCNs to deliver recombinant Mycobacterium tuberculosis (Mtb) proteins, Ag85B and HspX, into bone marrow derived macrophages (BMDMs) and dendritic cells (BMDCs) was investigated. For immunization, OCNs were mixed with the two TB antigens as well as the adjuvant monophosphoryl lipid A (MPL). The protective efficacy was analyzed in vaccinated mice by aerosol Mtb challenge with a virulent strain of Mtb and the bacterial burdens were measured. The results showed that OCNs are highly effective in delivering Mtb proteins into the cytosol of BMDMs and BMDCs. Upon immunization, this vaccine formula induced robust Th1 immune response characterized by cytokine profiles from restimulated splenocytes and specific antibody titer. More importantly, enhanced cytotoxic $CD8^+$ T cell activation was observed. However, it did not reduce the bacteria burden in the lung and spleen from the aerosol Mtb challenge. Taken together, OCNs are highly effective in delivering subunit protein vaccine and induce robust Th1 and $CD8^+$ T cell response. This vaccine delivery system is suitable for application in settings where cell-mediated immune response is needed.
Glycoprotein from the water extract of dried root barks of slippery Elm was investigated for its anticancer immunostimulating activity, The glycoprotein contained molecular weight 15,000 to 500,000 Da, total carbohydrates 55.8 to 72.1%), total uronic acid 30.0 to 30.5%, and total proteins 5.0 to 6.1%. The anticancer immunostimulating activities were examined for both in vitro bioassays such as immune cell proliferation assay, mixed lymphocyte reaction (MLR), direct mitogenicity, T-dependent antibody production, and in vivo bioassays such as septic shock test and anticancer activity test in B16 melanoma transplanted mouse model. In vivo assay, the glycoprotein at the concentration of 3 mg/kg showed the best result that median survival time increased to about 140% in contrast to control groups.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.36
no.6
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pp.235-241
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2022
The purpose of this study was to investigate the immune activation effect of Sasamsaengmaek-san (SSSMS) consisted of a mixture of Adenophora triphylla var. japonica, Liriope platyphylla, Panax ginseng C. A. Meyer and Schisandra chinensis. in Balb/c mice. Measuring alanine aminotransferase (ALT) and aspartic acid transaminase (AST) levels in Balb/c mice was performed to analyze the cytotoxicity. Cytokines (IFN-γ, IL-2, IL-12) which regulate the immune activation in Balb/c mice were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Activated T lymphocytes in peripheral blood mononuclear cell (PBMC), spleen, lymph nodes were analyzed by flow cytometry using percentages. All tests were compared with red ginseng 100 ㎍/mL (RG 100), which is the most used for immune activity. As a result, cytokine activity was significantly increased at SSSMS 300 group. Activated T lymphocytes in PBMC, spleen, lymph nodes were significantly increased at SSSMS 300 group. These results suggest that there is a possibility of SSSMS activating an immune system by activating the cytokines, and it is confirmed that SSSMS also effective for generation and differentiation of T, B lymphocytes which activate the immune response.
Kim, Young-jin;Song, Hee-jong;Kim, Jong-myeon;Kang, Myeong-dai;Yoon, Chang-yong;Kim, Tae-joong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.32
no.2
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pp.175-179
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1992
To develope the methods for isolation and enumeration of lymphocyte subpopulations in pigs, we carried out the rosette-assay using sheep erythrocytes(SRBC) and Korean native goat erythrocytes(GRBC) as a target cells. To enumerate T lymphocytes, E-rosette methods were applied with RBC treated with various concentration of polymers such as Aet and Dex, singly or in combination. And to enumerate B lymphocytes, EAand EAC-rosette assay was adopted. The results were as follows; 1. E-RFR with polymer-untreated SRBC and GRBC was $32.9{\pm}7.9%$ and $31.3{\pm}9.4%$, respectively. On the other hand, RFR with 0.1M Aet plus 8% Dex treated SRBC and GRBC was increased about two-fold($67.8{\pm}7.4%$ and $69.8{\pm}8.5%$), respectively. 2. EA-RFR with SRBC and GRBC were $ 39.1{\pm}10.2%$ and $32.6{\pm}6.1%$, respectively. 3. EAC-RFR with SRBC and GRBC were $27.6{\pm}7.0%$ arld $21.0{\pm}3.2%$, respectively. These results showed that both SRBC and GRBC could be recommanded as a binding cells for rosetteassay to isolate of lymphocyte-subpopulations in pigs.
The conceptus which are resulted by mating between two genetically non-identical partners can be considered to be an allograft to the mother science which is not rejected by the mother's immunological attack. The present studies have been, therefore, attempted in order to elucidate the mechanism by which protection of the fete-placental allograft, between the C3H/HeJ female mouse and DBA/2 male mouse occurred. For this purpose, firstly systemic immunity was investigated by measuring T and B lymphocytes subsets. Natural killer cell activity in maternal splenic tissue and by observing the effects of pregnancy serums, progesterone and hCG on immune systems. Secondly, local immunity also investigated by measuring T lymphocytes subsets, natural killer cell activity in lymph nodes draining the uterus. The subsets of Thy-1.2$^+$ cells and L 3T4$^+$ cells decreased slightly while the subsets of Ly2$^+$ cell increased significantly compared with those of the control group beyond the mid-gestational stage. The subsets of B cell gradually in-creased from the mid-gestational stage untill delivery. The natural killer cell activity in the maternal splenic tissue significantly increased during the period of 5th to 8th day of gestation. The natural killer cell activity was significantly suppressed by the pregnancy serums and non-pregnant serums compared with those of serum-free group. The treatment of hCG significantly suppressed natural killer cell activity in the dose dependent manner (1 unit/ml-1000 unit/ml) while pro-gesterone increased the natural killer cell activity at phamarcological dose only. In the lymph nodes draining the uterus, the subsets of Thy-1.2$^+$ cells significantly increased during the period of implantation and L3T4$^+$ cell subsets slightly increased during the mid-gestational stage. The subsets of Ly2$^+$ cell increased significantly during the mid-gestational stage, but decreasing slightly be-fore delivery. The natural killer cell activity was significantly elevated after the implantation period in the lymph nodes draining the uterus. The natural killer cell activity of the lymph nodes draining the uterus was higher than those of splenic tissue during the same periods of gestation. It is therefore, concluded that during the pregnancy, the phenomena which the fete-placental allograft has not been rejected and rather protected from the maternal immunological attack might be due to local immune suppression in fete-maternal interface tissues rather than systemic immune suppression. And the subsets of Thy-1.2$^+$ cells and L3T4$^+$ cells mainly contribute to accepting allograft in early stage of pregnancy, while the subsets of Ly2$^+$ cell and the subsets of B cell increased significantly compared with those of the control group beyond the mid-gestational stage, so their role in systemic immunity and local immunity gradually increased from the mid-gestational stage until delivery.
Background: A co-inhibitory molecule, B7-H4, is believed to negatively regulate T cell immunity by suppressing T cell proliferation and inhibiting cytokine production. However, the mechanism behind B7-H4-mediated tolerance remains unclear. Methods: Balb/c $(H-2^d)$ mice were fed with dendritic cell line, DC2.4 $(H-2^d)$ every day for 10 days. Meantime, mice were hydrodynamically injected with recombinant plasmid expressing B7-H4 fusion protein (B7-H4.hFc) or hFc via tail vein. One day after last feeding, mice were immunized with allogeneic B6 spleen cells. 14 days following immunization, mice were challenged with B6 spleen cells to ear back and the ear swelling was determined the next day. Subsequently, a mixed lymphocyte reaction (MLR) was also performed and cytokines profiles from the reaction were examined by sandwich ELISA. Frequency of immunosuppressive cell population was assayed with flow cytometry and mRNA for FoxP3 was determined by RT-PCR. Results: Tolerant mice given plasmid expressing B7-H4.hFc showed a significant reduction in ear swelling compared to control mice. In addition, T cells from mice given B7-H4.hFc plasmid revealed a significant hyporesponsiveness of T cells against allogeneic spleen cells and showed a significant decrease in Th1 and Th2 cytokines such as IFN-${\gamma}$, IL-5, and TNF-${\alpha}$. Interestingly, flow cytometric analysis showed that the frequency of CD4+CD25+FoxP3+ Tregs in spleen was increased in tolerant mice given recombinant B7-H4.hFc plasmid compared to control group. Conclusion: Our results demonstrate that B7-H4 synergistically potentiates oral tolerance induced by allogeneic cells by increasing the frequency of FoxP3+ CD4+CD25+ Treg and reducing Th1 and Th2 cytokine production.
The HIV-1 p24(202-221) sequence ETINNEEEWDRVHPV HAGP contains a B-cell epitope with the earliest immune response and the highest antibody titer against anti-mouse sera obtained by immunization with p24 antigens. A novel mouse monoclonal antibody (mAb) was generated against the immunodominant B-cell epitope of the HIV-1 p24 capsid protein, p24(202-221). BALB/c mice were immunized with the four branched multiple antigenic peptide (MAP) containing the HIV-1p24(202-221) sequence, and antibody-secreting hybridoma were produced by fusion of mouse splenocytes with P3X63Ag8.653, mouse myeloma cells. One clone which produced the antigen-specific mAb named KI-24 (Isotype IgG1, light chain: ${\kappa}$) was identified. mAb KI-24 was highly specific for both the p24(202-221) and p24 proteins when analyzed by ELISA and Western blotting. Since p24(202-221) also contains a cytotoxic T-lymphocyte epitope, this specfic peptide epitope and the monoclonal antibody with specific reactivity against the p24 protein and p24(202-221) can be used in peptide vaccine development and p24 antigen detection from HIV patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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