Conjugated linoleic acid (CLA) is a collective term for positional and geometric isomers of octadecadienoic acid in which the double bonds are conjugated. CLA has anticancer activity in a variety of animal cancer models, and cis-9, trans-11 (c9t11) and trans-10, cis-12(t10c12) CLA are the most predominant isomers present in the synthetic preparations utilized in these animal studies. To compare the ability of c9t11, t10c12 and an isomeric mixture of CLA to inhibit TSU-Prl cell growth, cells were incubated in a serum-free medium with various concentrations of these fatty acids. The isomeric mixture inhibited cell growth in a dose-dependent manner (1-3 $\mu$M) with a 41 $\pm$ 1% inhibition observed at 3 $\mu$M concentration after 48 hours. T10c12 also inhibited cell proliferation in a dote-dependent manner, However, the efficacy and potency of this isomer was much greater than that of the isomeric mixture with a 49 $\pm$ 2% inhibition observed at 0.3 $\mu$M concentration after 48 hours. By contrast, c9t11 slightly increased cell proliferation. To determine whether the growth-inhibiting effect of CLA is related to the changes in production of insulin-like growth factors (IGF) and IGF-binding proteins (IGFBP) by these cells, serum-free conditioned media were collected. Immunoblot analysis of conditioned media using a monoclonal anti-IGF-II antibody showed that both the isomeric mixture and t10c12 inhibited secretion of both mature 7,500 Mr and higher Mr forms of pro IGF-II, whereas c9t11 had no effect. Ligand blot analysis with 125I-IGF-II revealed the presence of two types of IGFBPs : 24,000 Mr IGFBP-4 and 30,000 Mr IGFBP-6. The production of IGFBP-4 slightly decreased at the highest concentrations of the isomeric mixture and t10c12. These results indicate that CLA inhibits human prostate cancer cell growth, an effect largely due to the action of t10c12. The growth inhibition may result, at least in part, from decreased production of IGF-II and IGFBP-4 by these cells.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.02a
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pp.1-1
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2011
We developed a new generalized synthetic procedure, called as "heat-up process," to produce uniform-sized nanocrystals of many transition metals and oxides without a size selection process. We were able to synthesize uniform magnetite nanocrystals as much as 1 kilogram-scale from the thermolysis of Fe-oleate complex. Clever combination of different nanoscale materials will lead to the development of multifunctional nano-biomedical platforms for simultaneous targeted delivery, fast diagnosis, and efficient therapy. In this presentation, I would like to present some of our group's recent results on the designed fabrication of multifunctional nanostructured materials based on uniform-sized magnetite nanoparticles and their medical applications. Uniform ultrasmall iron oxide nanoparticles of <3 nm were synthesized by thermal decomposition of iron-oleate complex in the presence of oleyl alcohol. These ultrasmall iron oxide nanoparticles exhibited good T1 contrast effect. In in vivo T1 weighted blood pool magnetic resonance imaging (MRI), iron oxide nanoparticles showed longer circulation time than commercial gadolinium complex, enabling high resolution imaging. We used 80 nm-sized ferrimagnetic iron oxide nanocrystals for T2 MRI contrast agent for tracking transplanted pancreatic islet cells and single-cell MR imaging. We reported on the fabrication of monodisperse magnetite nanoparticles immobilized with uniform pore-sized mesoporous silica spheres for simultaneous MRI, fluorescence imaging, and drug delivery. We synthesized hollow magnetite nanocapsules and used them for both the MRI contrast agent and magnetic guided drug delivery vehicle.
Actinorhodin antibiotics produced by Streptomyces lividans TK24 are blue pigments with a weak antibiotic activity, derived from one acetyl-CoA and 15 malonyl-CoA units via a typical ployketide pathway. In an attempt to clone polyketide biosynthetic genes of S. lividans TK24, hybridizing fragments in the genomic DNA of S. lividans TK24 were detected by use of acn and act III polyketide synthase gene probes. Since typical aromatic polyketide bio-synthetic gene clusters are roughly 22-34 Kb long, we constructed in E. coli XL-Blue MR using the Streptomyces-E. coli bifunctional shuttle cosmid vector (pojn46). Then, about 5,000 individual E. coii colonies were thor-oughly screened with acrl-ORFI and actIII probes. From these cosmid libra-ries, 12 positive clones were identified. Restriction analysis and southern hybridization showed two polyketide biosynthetic gene clusters in this organism. These cosmid clones can be transformed into Streptomyces parvulus 12434 for expression test that identify product of actinorhodin biosynthetic genes by heterologous expression. Thus, heterologous expres-sion of a derivative compound of a actinorhodin biosynthetic intermediate was obtained in pKE2430. Expression of these compounds by the trans-formants was detected by photodiode array HPLC analysis of crude extracts.
A spin valve structure of Ta/NiFe/CoFe/Cu/CoFe/Ru/CoFe/FeMn/Ta which has a synthetic antiferromagnet (CoFe/Ru/CoFe), was fabricated by using a magnetron sputtering system. The thickness and composition of magnetic free and pinned layers affect the magnetic properties such as exchange interaction strength of each layer and so on. Even though Rutherford Backscattering Spectrometry (RBS) has advantages of quantitative and non-destructive analysis, it is almost impossible to determine the thickness and composition of magnetic thin films using lBS because of its poor mass resolution for a higher atom number (Z>20). In this study, quantitative analysis of the element composition and thickness for the spin valve sample was performed by combining both Proton Induced X-ray Emission Spectrometry (PIXE), which is one of element specific analysis techniques, and grazing-exit RBS with a highly improved depth resolution and absolute quantitative analysis. For the quantitative analysis, standardization of PIXE was carried out with NiFe, CoFe, and FeMn layers, which are one of constituent layers of spin valve films. Through PIXE standardization and the aid of PHE experimental results of the spin valve sample, ire overlapped signal in a grazing-exit RBS spectrum were successfully resolved and the thickness of the Ru layer was determined with a resolution of ∼1 .
Vitellogenesis, an important reproductive process in oviparous animals, includes the processes of hormonally regulated synthesis of yolk precursor protein, vitellogenin (Vg), and their deposition in ovarian oocytes as a vitellin which is an important energy source as well as buoyancy regulator of the egg. Vg genes consist of a gene family that encompasses a large number of lipoproteins and produce different Mr. Vg proteins in liver. The expression of Vg is largely dependent on the estrogen, and both reproductive cycle and temperature also influence Vg synthesis. Synthetic estrogens or estrogenic pollutants was sufficient to induce Vg in both sexes of oviparous vertebrates. Therefore, the estrogenic induction of vitellogenesis in male has been used for biological marker in the screening of estrogenicity of certain endocrine disrupting compounds and the monitoring the world-wide contamination of estrogenic compounds in wild life. In the studies on the biological hazard and influence of endocrine disrupting chemicals using the Vg induction in oviparous males, it is important to consider the reproductive cycle, zoogeography and biodiversity of the wild life animals in Korea.
Oh, Young Hoon;Kang, Kyoung-Hee;Shin, Jihoon;Song, Bong Keun;Lee, Seung Hwan;Lee, Sang Yup;Park, Si Jae
KSBB Journal
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v.29
no.6
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pp.443-447
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2014
Biosynthesis of lactate-containing polyhydroxyalkanoates (PHAs) was examined in recombinant Escherichia coli W strain from sucrose. The Pseudomonas sp. MBEL 6-19 phaC1437 gene and the Clostridium propionicum pct540 gene, which encode engineered Pseudomonas sp. MBEL 6-19 PHA synthase 1 ($PhaC1_{Ps6-19}$) and engineered C. propionicum propionyl-CoA transferase ($Pct_{Cp}$), respectively, were expressed in E. coli W to construct key metabolic pathway to produce poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) [P(3HB-co-LA)]. The recombinant E. coli W expressing the phaC1437 gene and the pct540 gene could synthesize P(3HB-co-13mol%LA) up to the polymer content of 31.3 wt% when it was cultured in chemically defined MR medium containing 20 g/L of sucrose and 2 g/L of sodium 3-hydroxybutyrate. When Ralstonia eutropha phaAB genes were additionally expressed to provide 3-hydroxybutyrate-CoA (3HB-CoA) from sucrose, P(3HB-co-16mol%LA) could be synthesized from sucrose as a sole carbon source without supplement of sodium 3-hydroxybutyrate in culture medium, but the PHA content was decreased to 12.2 wt%. The molecular weight of P(3HB-co-16 mol%LA) synthesized in E. coli W using sucrose as carbon source were $1.53{\times}10^4$ ($M_n$) and $2.78{\times}10^4$ ($M_w$), respectively, which are not different from those that have previously been reported by other recombinant E. coli strains. Engineered E. coli strains developed in this study should be useful for the production of lactate-containing PHAs from sucrose, one of the most abundant and least expensive carbon sources.
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