Thirty ellagitannins originated from some Euphorbiaceous plants were tested for the inhibitory activities against AMV reverse transcriptase and replication of HIV-1 using syncytia forming assay. Most of ellagitannins showed strong inhibitory activities against AMV reverse transcriptase. Some ellagitannins including geraniin, mallotusinin, elaeocarpusin, euphorscopin and jolkianin, showed significant inhibitory activities of syncytia formation of supT1 cell line.
The production of soybean cyst nematode (SCN), Heterodera glycines, including female formation and fecundity was much higher in SCN race 14 (R14) than in race 3 (R3) in susceptible soybean cultivars Bragg (intolerant), Lee74 (moderately tolerant), and PI 97100 (highly tolerant). The nematode body was also significantly larger in R14 than in R3 at 20 days after inoculation, but the further nematode growth appeared to be slower in R14 than in R3, resulting in no significant difference between the two races at 30 days after inoculation. Within each race, no significant difference was observed in the growth and reproduction among the soybean cultivars tested. Syncytial areas near the nematode lip regions (infection sites) were measured for each soybean cultivar-SCN race combination. R14 induced significantly larger syncytia than R3. Bragg had relatively larger syncytia than Lee74 and PI 97100, but the difference among the soybean cultivars was minimal or not significantly different. Syncytium occupation in the stelar region differed only between PI 97100 and the other two cultivars, which may be somewhat, but not exactly, related to tolerance levels. Syncytial cytomplasm was degenerated more with R14 and in Bragg than with R3 and in Lee74 and PI 97100, respectively. In light microscopy, degenerated syncytia were characterized by depleted and loose cytoplasm with less plastids than normal-looking (intact) syncytia which had dense syncytial cytoplasm. Electron microscopy revealed that degenerated syncytia contained highly vacuolated cytoplasm with degenerated plastids. The above results suggest that structural characteristics of syncytia may match the nematode growth and reproduction.
To study the mechanism of syncytium formation, novel syncytia-inducing ecotropic murine retrovirus was used. Our previous result showed that amino acid substitutions at the RBD (receptor binding domain) of envelope glycoprotein contribute to syncytium formation. In this study, we have investigated if this fusion phenomenon could occur with retroviral vectors pseudotyped with the novel syncytia-inducing ecotropic murine leukemia virus Env. We have found that these vectors were not able to mediate virus-to-cell fusion in M. dunni murine cell lines. These findings indicate that syncytia-inducing ecotropic murine leukemia virus is capable of generating syncytia during its replication. There was also no correlation between the level of ecotropic murine leukemia virus receptor (mCAT-1) and the fusogenic effect.
The murine ecotropic retroviral receptor has been demonstrated to function as a mouse cationic amino acid transporter 1(mCAT1), and is comprised of multiple membranespanning domains. Feral mouse (Mus dunni) cells are not susceptible to infection by the ecotropic Moloney murine leukemia virus (MoMLV), although they can be infected by other ecotropic murine leukemia viruses, including Friend MLV and Rauscher MLV. The relative inability of MoMLV to replicate in M. dunni cells has been attributed to two amino acids $(V_{214}\;and\;G_{236})$ located within the third extracellular loop of the M. dunni CAT1 receptor (dCAT1). Via the exchange of the third extracellular loop of the mCAT1 cDNA encoding receptor from the permissive mouse and the corresponding portion of cDNA encoding for the nonpermissive M. dunni receptor, we have identified the most critical amino acid residue, which is a glycine located at position 236 within the third extracellular loop of dCAT1. We also attempted to determine the role of the third extracellular loop of the M. dunni CAT1 receptor with regard to the formation of the syncytium. The relationship between dCAT1 and virus-induced syncytia was suggested initially by our previous identification of two MLV isolates (S82F in Moloney and S84A in Friend MLV), both of which are uniquely cytopathic in M. dunni cells. In an attempt to determine the relationship existing between dCAT1 and the virally-induced syncytia, we infected 293-dCAT1 or chimeric dCAT1 cells with the S82F pseudotype virus. The S82F pseudotype virus did not induce the formation of syncytia, but did show increased susceptibility to 293 cells expressing dCATl. The results of our study indicate that S82F-induced syncytium formation may be the result of cell-cell fusion, but not virus-cell fusion.
Oriental medicinal herb extracts (OHE) showing anticancer activities were investigated for effectiveness as antiviral drugs. Infection of MuLV to cell line resulted in formation of giant syncytia. Number of giant syncytia in culture treated with OHE decreased by 40% compared to that of non-OHE-treated cell culture. To determine OHE effects on progeny release, RT-PCR was performed. In vivo animal studies demonstrated effectiveness of OHE as antiviral drug when administered orally. After OHE administration, viral cytopathic effects decreased. Infected mice showed splenomegaly and over-proliferation of lymphocytes with decreased CD4+ cell counts. These symptoms decreased in OHE-treated mice, indicating OHE maybe useful therapeutics against MuLV/MAIDS as Human Immunodeficiency Virus (HIV)/AIDS animal model. Results show XC plaque assay and in vivo MAIDS model using MuLV are suitable tools for screening anti-retroviral drug candidates.
In order to find potent virus-cell fusion inhibitory components from Korean edible clams, thirteen prepared polysaccharides were introduced to syncytia formation inhibition assay, which is based on the interaction between the HIV-1 envelope protein gp 120/41 and the cellular membutane protein CD4 of T lymphocytes. Among them, Meretrix petechialis showed a potent viruscell fusion inhibitory activity. Fusion index (F1) and percent (%) fusion inhibition of the polysaccharide of this clam were $0.21{\pm}0.02$, and $67.52{\pm}4.09$ at 100781m1, respectively. It exhibited almost equivalent virus-cell fusion inhibitory activity to that of dextran sulfate which was used as a standard control.
Initial subcellular responses in susceptible (PI 274420) and resistant (cv. Hartwig) soybeans infected with the soybean cyst nematode (SCN) were examined 2 and 4 days after inoculation (DAI). Subcellular features common to both soybeans at 2 DAI included hypertrophied initial syncytial cells (ISCs) and syncytium-component cells (SCs) with a dense cytoplasm containing proliferated rough and smooth endoplasmic reticulum (RER and SER), a hypertrophied nucleolus, and reduced vacuoles, suggesting that the nematode-infected cells were dedifferentiated. In the resistant soybean, a striking initial subcellular difference from the susceptible soybean was the dilation of the RER, indicating ER dysfunction and leading to cell death. This disturbed nematode feeding, as evidenced by disrupted feeding tubes. In PI 274420, the ISC cytoplasm was depleted, with the exception of ER membranes, at 4 DAI, while the SC cytoplasm was dense with proliferation of starch-containing plastids around multiple nuclei that might be derived from the congregation of nuclei in the neighboring SCs and in part by nuclear division without cytokinesis. In cv. Hartwig, syncytia were necrotized with secondary cell wall thickening outside the plasma membrane and an extremely dense cytoplasm containing a nucleus with an electron-lucent nucleolus, accompanied by the proliferation of closely stacked parallel RER and ribosomes. These results suggest that syncytia develop continuously in PI 274420 to produce and store nutritional substances in SCs, providing for the nematode through ISC until maturation, but in cv. Hartwig, syncytia degenerate early due to excessive metabolism, blocking nematode feeding and cytoplasmic connections with adjacent intact cells.
Reproduction of the soybean cyst nematode (SCN), Heterodera glycines Ichinohe on the susceptible soybean cultivar, Lee 74, was significantly reduced by pre-, post- and simultaneous treatments of acetylsalicylic acid (ASA, aspirin). The control efficiencies were 60%, 64% and 87% for pre-, post- and simultaneous treatments, respectively. ASA had no significant effect on the survival of 2nd stage juveniles and their penetration into the soybean root tissues, but significantly inhibited the early stage nematode growth in the roots. Syncytia were formed 2∼3 days after inoculation in the susceptible soybean without ASA treatment, characterized by dense cytoplasm and increased cellular organelles such as mitochondria and endoplasmic reticulum. The nematode stylet was penetrated into the syncytial cell, and feeding tube was formed at the nematode stylet was penetrated into the syncytial cell, and feeding tube was formed at the nematode stylet entry. However, in the ASA treatments, syncytium was not formed or degenerated, depending on the root tissues. In the pre-treatments of ASA, nematode stylets did not penetrate into cells, showing callose-like cell wall thickening formed at the nematode probing sites, or retracted from the infected cells. The stylet penetration sites of syncytial cells appeared to be sealed off with fibrillar materials. With post-treatment of ASA, syncytia formed by the nematode were degenerated, characterized by degradation of syncytial cytoplasm.
Park Nam-young;Cho Kyung-oh;Cho Seoung-su;Ha Yong-kong
Journal of the korean veterinary medical association
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v.29
no.6
/
pp.360-365
/
1993
Attempts to isolate porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) were made by inoculating feces homogenates into Vero cells cultures with trypsin. Cytopathic effects(CPE), such as vacuolation, formation of syncytia, and fusion of cells, were detected even at fir
In order to search for the anti-HIV agents from natural products, Eighty MeOH extracts of medicinal plants were applied to a syncytia formation inhibition assay which is based on the interaction between the HIV-1 envelope glycoprotein gp120/gp41 and the cellular membrane protein CD4 of T lymphocytes. Among them, Ailanthus altissima showed a potent virus-cell fusion inhibitory activity. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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