Hideki Mochoda;Wang, Pi-Chao;Fr Jr. Nayve;Ryuji Sato;Minoru Harige;Nakao Nomura;Masatoshi Matsumura
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제5권2호
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pp.110-117
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2000
Relationship between monoclonal antibody (MAb) productivity and growth rate, and effects of high cell density on MAb production rate increased with increasing specifis growth rate in both suspended and immobilized continuous cultures indicate a positively growth-associated relationship between MAb productivity and growth rate. moreover, the specific production rate was higher in the immobilized cell culture than that in suspended one at all dilution rates. In order to clarify these phenomana, MAb mPNA experession and cell cycle distribution were investigated in bacth cultures with immobilized cells and suspended cells. RT-PCR was used for observation of MAb mRNA expression and a two-color bromodeoxyuridine (BrdU)/propidium iodide (PI) flow cytometry method for determination of cell cycle distribution. The results revealed that MAb nRNA expression until dead phase, which was longer than in suspended cell. The cell cycle distribution patterns were observed almost the same for both immobilized and suspended cells. Such results may imply that a high cell density state has positive influence on the mRNA expression and on growth-associated Mab productivity of T0405 cells.
본 연구에서는 질산화 반응이 활발히 진행되고 있는 기존 하수처리장 슬러지를 이용하여 3개월 이상 농축 배양한 후에 부착 및 부유성장 상태로 적응시킨 질화균을 이용하여 독성물질에 대한 영향을 조사하였다. 본 실험의 목적은 부유 및 부착성장 질화균을 이용하여 이들의 비표면적에 따른 독성물질의 영향을 상호비교하기 위한 것이다. 이를 위하여 부유 및 부착상태의 농축 질화균의 비표면적을 다르게 하여 각각에 대한 독성물질의 영향을 조사하였다. 연구 결과 부착성장 질화균 및 부유성장 질화균의 경우 비표면적이 클수록 독성에 대한 영향을 더 많이 받는 것으로 나타났다. 부착상태와 탈착상태의 질화균을 사용한 실험에서, 독성물질에 대한 영향은 탈착상태보다 부착상태에서 독성의 영향을 적게 받았으며, Nitrosomonas의 경우에는 1.12배, Nitrobacter의 경우에는 1.09배 독성의 영향을 적게 받았다. 부유성장 질화균을 사용한 경우에는 분쇄 전보다 분쇄 후에 독성의 영향을 더 크게 받았으며, Nitrosomonas의 경우에 1.46배, Nitrobacter의 경우에 1.35배 독성의 영향을 적게 받았다. 또한, 기질에 아질산염을 주입하지 않고 실험한 결과에서도 유사한 결과를 얻었다. 부착상태와 탈착상태의 질화균을 사용한 실험에서, 독성물질에 대한 영향은 탈착상태보다 부착상태에서 독성의 영향을 적게 받았으며, Nitrosomonas의 경우에는 1.83배, Nitrobacter의 경우에는 1.78배 독성의 영향을 적게 받았다. 부유성장 질화균을 사용한 경우에는 분쇄 전보다 분쇄 후에 독성의 영향을 더 크게 받았으며, Nitrosomonas의 경우에 1.27배, Nitrobacter의 경우에 1.32배 독성의 영향을 적게 받았다.
굴의 육중량 변화는 수온과 chlorophyll에 의해 지배되지만, chlorophyll 양이 일정량 이상이 되면 이러한 경향은 다소 감소하였다. 수온에 따른 굴의 성장은 수온 하강 초기에는 강한 역상관 관계를 나타내었지만, 적정 수온이하로 하강하게 되면 상관관계가 다소 낮아졌다. 각 수하시기에 따른 육중량 성장식을 6월은 3차 방정식의 성장곡선이 나타났고, 7, 8월에 수하한 경우 지수형 곡선을 나타내었다. 그러나 9-11월의 경우 정량적인 성장을 하는 일차방정식의 성장패턴을 나타내었다. 성장 방정식으로부터 각 수하시기에 따라 목표중량 5 g까지 성장하는데 소요되는 기간을 계산하면 9월이 123일로 가장 성장이 빨랐고, 8월이 220일로 가장 오랜 기간이 소요되었다. 굴 종패의 수하적기는 수온상승기 말기부터 수온하강기 초기인 8월말부터 9월 중순 사이가 적당한 시기로 추정되고, 상품크기 5 g까지 성장하는데 평균 4-5개월이 소요되며, 이 시기는 12-1월경에 해당한다.
Objective: To separate/enrich tumor stem-like cells from the human esophageal carcinoma cell line OE-19 by using serum-free suspension culture and to identify their biological characteristics and radiation resistance. Methods: OE-19 cells were cultivated using adherent and suspension culture methods. The tumor stem-like phenotype of CD44 expression was detected using flow cytometry. We examined growth characteristics, cloning capacity in soft agar, and radiation resistance of 2 groups of cells. Results: Suspended cells in serum-free medium formed spheres that were enriched for CD44 expression. CD44 was expressed in 62.5% of suspended cells, but only in 11.7% of adherent cells. The suspended cells had greater capacity for proliferation and colony formation in soft agar than the adherent cells. When the suspended and adherent cells were irradiated at 5 Gy, 10 Gy, or 15 Gy, the proportion of CD44+ suspended cells strongly and weakly positive for CD44 was 77.8%, 66.5%, 57.5%; and 21.7%, 31.6%, 41.4%, respectively. In contrast, the proportion of CD44+ adherent cells strongly positive for CD44 was 18.9%, 14.%, and 9.95%, respectively. When the irradiation dose was increased to 30 Gy, the survival of the suspended and adherent cells was significantly reduced, and viable CD44+ cells were not detected. Conclusion: Suspended cell spheres generated from OE-19 esophageal carcinoma cells in serum-free stem medium are enriched in tumor stem-like cells. CD44 may be a marker for these cells.
This study was conducted to investigate the effect of fertilizer composted of dam suspended particle sawdust and sewage sludge to soil properties and seedling growth. The Betula platyphylla var japonica, Zelkova serrata and Chamaecyparis obtusa were used for this study. The soil organic matter, total nitrogen, phosphorous, exchangeable calcium, magnesium, and potassium were increased with fertilizer treatment. Heavy metal concentration in soil was increased with fertilizer treatment, but the level was very low. With fertilizer treatment, growth, photosynthetic capacity, and chlorophyll concentration of seedling were improved.
Total suspended particles in the atmosphere were collected on the quartz fiber filters using an ANdersen Hi-volume air sampler from March 1989 to October 1989 and from June 1990 to February 1991, at Chung-Ang University in Seoul. A total amount of eight heavy metals (Cr, Zn, Cd, Pb, Fe, V, Ti, Mn) in total suspended particles were determined by ICP spectrophotometer. The annual arithmetic mean concentration of total suspended particle was 162.3$\mug/m^3$ and eight metals(Cr, Zn, Cd, Pb, Fe, V, Ti, Mn) were 11.6, 609.2, 3.5, 337.1, 2739.5, 15.1, 89.4 and 100.5ng/$m^3$, respectively. The concentration of total suspended particle was highest in the spring(343.7$\mug/m^3$) and lowest in the summer(91.8$\mug/m^3$). These heavy metals were distinguished into two groups in terms of their particle size distribution. The contents of first-group heavy metals (Fe, Ti, Mn) were increased in accordance with the growth of the particle size. The contents of the second-group ones such as Pb, Cd, V, and Zn, on the contrary, came to increase according as the particle size reduced. Statistical analysis indicated that there was a correlation between total suspended particle and Fe in coarse particles, and between total Suspended Particle and Zn, Pb in fine particle.
본 연구에서는 부유토사로 인한 탁도 증가가 어류에게 미치는 영향에 대해 실험실 모의실험을 수행하였다. 국내 강 또는 호소에서 출현 비율이 높은 붕어, 잉어, 송사리를 대상으로 수정란 부화율 평가를 수행한 결과 붕어, 잉어는 4,040 NTU 수준까지 수정란 부화에 미치는 영향이 없었지만, 송사리는 254 NTU 이상의 구간에서 부화율이 저해되는 영향을 보였다. 붕어, 잉어, 송사리 치어의 4일간 노출 결과 생존에 미치는 영향은 없었다. 반면 성장률 결과에서 잉어와 붕어는 7일, 14일, 21일 모두 143 NTU 구간부터 성장저해 영향을 보였다. 송사리는 14일 노출 시 254 NTU, 21일간 노출 시 501 NTU 구간부터 성장저해 영향을 보였다. 따라서 강 또는 호소에서 143 NTU 이상의 탁도가 발생할 경우 붕어, 잉어의 성장을 저해시킬 수 있고, 250 NTU 이상의 탁도는 송사리와 같이 민감 어종의 부화율이 저해될 수 있을 것으로 사료된다.
Laboratory settling experiments (column, recirculating flume) were conducted for further understanding of the physical processes of cohesive sediment transport. \In still water experiments, the growth rate of flocculation is dependent upon the initial suspended concentration. Consequently, the settling velocity increases with concentration of flees. In flocculation settling regime, the exponent n in the settling velocity, $w_s=kC^n$, for Nakdong estuary mud was obtained empirically. The exponents were found to be 1.33, and 1.06 for the initial suspended concentrations of 1 g/i and 3 g/t, respectively. In flowing water, experiments for the median settling velocity with Nakdong mud in a recirculating flume were conducted. Settling velocity was found to depend much more strongly on the current velocity than initial concentrations. The temporal variation of suspended concentration increases as current velocity decreases.
Although most algae cultivation systems are operated in suspended culture, an attached growth system can offer several advantages over suspended systems. Algal cultivation becomes light-limited as the microalgal concentration increases in the suspended system; on the other hand, sunlight penetrates deeper and stronger in attached systems owing to the more transparent water. Such higher availability of sunlight makes it possible to operate a raceway pond deeper than usual, resulting in a higher areal productivity. The attached system achieved 2.8-times higher biomass productivity and total lipid productivity of $9.1g\;m^{-2}day^{-1}$ and $1.9g\;m^{-2}day^{-1}$, respectively, than the suspended system. Biomass productivity can be further increased by optimization of the culture conditions. Moreover, algal biomass harvesting and dewatering were made simpler and cheaper in attached systems, because mesh-type substrates with attached microalgae were easily removed from the culture and the remaining treated wastewater could be discharged directly. When the algal biomass was dewatered using natural sunlight, the palmitic acid (C16:0) content increased by 16% compared with the freeze-drying method. There was no great difference in other fatty acid composition. Therefore, the attached system for algal cultivation is a promising cultivation system for mass biodiesel production.
전 세계적으로 친환경 농업을 위해 식물생장촉진 근권세균을 이용한 미생물 비료에 대한 관심이 증가하고 있는데 투여하는 세균을 식물 근권에 보다 장기간 잔류시키기 위해 식물생장 촉진능이 있는 균주를 alginate bead에 고정화하여 식물생장을 조사하였다. 발아된 토마토 유묘에 Arthrobacter woluwensis ED를 $1{\times}10^6$ cells/g 로 처리하고 30일 재배 후 자라난 토마토의 shoot와 뿌리 길이 및 습윤과 건조중량을 측정한 결과 비접종 대조군과 비교하여 균주 현탁액 접종군은 각각 36.2, 59.0, 51.1과 37.5%씩 유의성 있게 증가하였으며 고정화 균주 접종군은 각각 42.0, 67.4, 62.5와 60.4%씩 유의성 있게 증가하였다. 고정화 균주 접종군은 균주 현탁액 접종군에 비하여 각각 6, 8, 11과 23% 증가하였다. 접종 균주가 식물 근권에서 유지되는 양상을 관찰하기 위해 denaturing gradient gel electrophoresis를 이용하여 토양세균 군집을 분석하였는데 균주 현탁액 접종군에서 ED 균주의 DNA band intensity는 접종일로부터 1주일까지 가장 높게 나타났으나 그 이후로 감소하여 접종 2주 후 비접종 대조군과 비슷한 band intensity를 나타내었다. 반면, 고정화 균주 접종군의 ED 균주 band intensity는 접종일로부터 초기에는 비접종 대조군과 비슷하였으나 이후 급격하게 증가하여 계속 높게 유지되어 3주까지 band intensity가 현탁액 접종군 보다 높았다. 따라서 alginate에 A. woluwensis ED를 고정하여 적용하는 방법이 현탁액 적용보다 식물 근권에 균주의 공급을 효과적으로 유지하면서 식물생장을 더욱 촉진하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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