Discharged materials from the point or non-point source are released into the sea, and as the results, marine environment is directly affected. We must estimate the impacts of contaminants to marine pollution rapidly and accurately. Therefore, it is needed on early warning system for appreciating marine environmental impacts, and required a bioassay to evaluate abnormal changes. A bioassay test was developed to examine the effects of heavy metal contaminants on the early life stages of the marine annimals. We have studied the effects of metals on early development of a sea urchin species, Strongylocentrotus intermedius. S. intermedius embryos were tested with six metals (Cu, Ag, Zn, Cd, Cr, Ni) and showed the highest sensitivity to Cu as well as the lowest sensitivity to Cd. The order of biological impact for metals was Cu>Ag>Ni>Zn>Cr>Cd. In accordance with the results, sea urchins embryos can provide biological criteria for seawater quality assessment. The sensitivity of developmental bioassay whith S. intermedius is at intermediate level among marine organisms commonly used in aquatic bioassays. And this sea urchin can be routinely employed as a test organism for ecotoxicity assays.
This study is the first attempt to understand the feeding physiology of a sea-urchin larva on a red-tide dinoflagellate. Fifteen day old larvae of S. intermedius capture C. polykrikoides cells by localized reversal of ciliary beats. No failure to transporte the algal cells from theciliated band to mouth and no rejection at the mouth suggest that C. polykrikoides has no feeding deterrence to S. intermedius larvae. The trend obtained for the clearance rate of S. intermedius larvae is similar to that of other sea urchin larvae. Thus, the clearance rate decreased as the algal concentration increased. Maximum clearance rate of S. intermedius on C. polykrikoides was 17.7 $\mu l$/larva/hr. Ingestion rate rapidly increased at lower algal concentrations and saturated at higher concentrations. There was no inhibition in ingestion rate at the highest prey concentration of ca. 3000 cells/ml. Maximum ingestion rate of S. intermedius on C. polykrikoides was 131 ngC/larva/d, which is higher than that reported for the larvae of the mussel Mytilus gal-lotrovincialis, but lower than that of the ciliate Strombidinopsis sp. The grazing rate, calculated by combining the field data on algal abundances with experimental data on ingestion rate, suggests that due to its low abundance, sea urchin Iarva has no significant grazing impact on C. polykrikoides population.
Even though some standard developmental bioassay protocols for environmental assessment using sea urchins have already been described, there have not been many attempts to apply and modify these protocols with Korean species. Therefore, there is a strong need to establish standard bioassay protocols using sea urchins commonly found in Korea. Prior to developing a new protocol, it is essential to know the optimal conditions for the bioassay procedures. We investigated the optimal conditions (temperature, salinity, and embryo density) of the sea urchin Strongylocentrotus intermedius. The ideal temperature for developmental bioassay of S. intermedius was determined to be $15^{\circ}C$ and the time required for the embryo to become pluteus larva was 72 hr. The optimal range of salinity for the embryo toxicity using S. intermedius was between 30 to 32 psu, which is similar to the range found in the natural habitats of adult populations. The optimum density of embryos at the beginning of bioassays was 100 embryos/mL. When the assays were carried out at higher densities, the proportion of normally developed larvae decreased significantly.
Lakshi A. Dayarathne;Jasmadi;Seok-Chun Ko;Mi-Jin Yim;Jeong Min Lee;Ji-Yul Kim;Gun-Woo Oh;Dae-Sung Lee;Won-Kyo Jung;Sei-Jung Lee;Jae-Young Je
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제34권8호
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pp.1688-1697
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2024
The current study aimed to determine whether Strongylocentrotus intermedius (S. intermedius) extract (SIE) exerts anti-obesity potentials employing 3T3-L1 cells as in vitro model. Herein we reported that treatment of SIE for 6 days reduced lipid accretion and triglyceride content whereas it increased the release of free glycerol. The inhibited lipid accumulation and induced lipolysis were evidenced by the downregulation of lipogenesis proteins, such as fatty acid synthase and lipoprotein lipase, and the upregulation of hormone-sensitive lipase expression. Furthermore, the downregulation of adipogenic transcription factors, including peroxisome proliferator-activated receptor gamma, CCAAT/enhancer-binding protein α, and sterol regulatory element-binding protein 1, highlights that reduced lipid accumulation is supported by lowering adipocyte differentiation. Additionally, treatment activates brown adipocyte phenotype in 3T3-L1 cells by inducing expression of brown adipose tissue-specific proteins, such as uncoupling protein 1 and peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator 1α. Moreover, SIE induced the phosphorylation of AMP-activated protein kinase (AMPK). The pharmacological approach using AMPK inhibitor revealed that the restraining effect of SIE on adipogenesis and promotion of adipocyte browning were blocked. In GC-MS analysis, SIE was mainly composed of cholest-5-en-3-ol (36.71%) along with saturated and unsaturated fatty acids which have favorable anti-obesity potentials. These results reveal that SIE has the possibility as a lipid-lowering agent for the intervention of obesity.
우리나라 동해안에 서식하는 새치성게(Strongylocentrotus intermedius)는 둥근성게과(Strongylocentrotidae)에 속하는 냉수성 해양 무척추동물이다. 둥근성게과에는 현재 9종의 성게가 속해 있으나, 아직 종간의 분류 기준, 계통 분류학적 유연관계, 진화과정 등이 잘 밝혀져 있지 않다. 본 연구는 유전자 염기서열이라는 분자형질을 이용하여 새치성게의 종 분류기준을 확립하고 이 종의 계통진화 및 분화 시기를 파악하고자 수행되었다. 이를 위하여 변화율이 빠르고 모계로만 유전되는 특성을 가진 미토콘드리아의 한 유전자인 cytochrome c oxidase subunit I(COI)을 분석하였다. 새치성게의 생식소에서 DNA를 추출하고 중합효소연쇄반응으로 COI 유전자 단편을 선택적으로 증폭하였으며, 클로닝과 시퀀싱 과정을 거쳐 COI 유전자의 단편 1077개 염기쌍 순서(염기서열)를 확정하였다. 이 염기서열과 유전자 데이터베이스(GenBank)에 들어있는 다른 성게 및 해삼, 불가사리의 유전자를 비교하고 그 분자 계통수를 작성함으로써 새치성게의 진화과정을 분석하였다. COI 유전자 계통수는 새치성게가 태평양 동쪽 연안에 서식하는 S. purpuratus와 계통적으로 자매군(sister species)의 관계에 있음을 보였다. 두 종의 분화 시기는 계통수 상 분지의 길이와 화석연대를 고려하여 산출했을 때 지구 온도의 변동이 심했던 약 890만년 전으로 추정되었다. 태평양의 동안과 서안으로 분리된 두 종의 현재 분포와 종분화 시기의 지구 환경조건은 두 종간의 분화가 환경변화에 따른 개체군의 지리적 분리(vicariance)에 의한 것임을 시사해 준다. 한편, 새치성게의 COI 유전자염기서열은 이 종을 대표하는 분자형질로서 둥근성게과의 성게들을 서로 구분할 수 있는 종분류의 기준이 될 것이다.
북쪽말똥성게의 인공종묘생산 기술개발의 일환으로 KCI용액 주사법으로 채란.채정된 알과 정자를 인위적으로 수정시켜 알과 유생의 발달과정 및 수온에 따른 발생속도를 조사하였다. 북쪽말똥성게의 수정난은 직경 122.5 $\mu\textrm{m}$의 구형이며, 알의 발생은 18$^{\circ}C$에서 수정 후 3시간만에 4세포기로 되고, 15시간이 지나면 부화를 하며, 수정 후 3일째에는 4완기 유생, 13일째에는 8완 전기유생, 20일째에는 8완 후기유생으로 되었다. 수온(T)에 따른 각 단계별 소요시간(t)의 관계를 보면, 부화기: 1/t=0.0036WT+0.0088 피라미드기: 1/t=0.0014WT-0.0016 4완기: 1/t=0.0009WT-0.0020 6완기: 1/t=0.0004WT-0.0005 8완기: 1/t=0.0002WT+0.0002로 표시되었다.
북쪽말똥성게 유생기의 먹이효과를 알기 위하여 Chaetoceros calritrans, Pavlova lutheri 및 Isochrysis galbana의 3개 단독구와 이를 혼합 공급한(Chaetoceros + Pavlova, Pavlova + Isochrysis + Isochrysis + Chaetoceros) 3개 시험구 등 총 6개의 시험구에 대한 성장도, 생존율 및 발육 단계별 소요일수를 조사한 결과는 다음과 같다. 먹이 종류에 따른 유생의 성장은 8완기까지 Isochrysis+Chaetoceros의 혼합구, Isochrysis의 단독구 및 Chaetoceros의 단독구가 각각 $735{\mu}m$, $718{\mu}m$ 및 $701{\mu}m$로 성장이 좋았으며 Pavlova의 단독구는 642{\mu}m$로 저조하였다. 먹이 종류별 일간성장을에 있어서 유생초기(6완기) 에는 Isochrysis, 8완 초기부터는 Chaetoceros의 먹이효율이 높은 것으로 나타났다. 생존율에 있어서는 Chaetoceros의 단독구, Isochrysis+Chaetoceros의 혼합구, Isochrysis의 단독구 및 Pavlova의 단독구가 각각 $37.2\%,\;35.0\%,\;32.4\%,\;및\;18.4\%$로 나타났다. 북쪽말똥성게의 유생발육 단계별 소요일수에 있어 6완기 까지는 먹이종류에 따른 큰 차이가 없었으나, 8완 후기까지의 소요일수는 Chaetoceros의 단독구가 24일째로 가장 빨랐고 Isochrysis의 단독구는 27일, Pavlova의 단독구 및 혼합구는 $30\~33$일이 소요되었다.
북쪽말똥성게의 인공종묘생산을 목적으로 산란유발과 초기성장에 관한 조사 결과를 요약하면 다음과 같다. 생식소숙도지수(GSI)는 암수 모두 10월에 최고치를 보인 후 12월에 급격히 감소하여, 주 산란기는 10-11월로 나타났다. KCI 자극에 의한 산란유발은 10월에 44.0~100.0%의 반응을 보여 6,300만개의 알을 얻었으며, 수정률은 92.3~98.2%, 부화율은 78.2~87.0%였다. 사육수온 13.4~17.1$^{\circ}C$에서 부유유생은 부화 13일째에 8완 전기유생, 부화 20일째에는 8완후기유생으로 변태하였다. 채묘는 부화 24~25일째 가능하였으며, 채묘율은 18.5~26.1%(평균 22.3%)이었고 채묘직후 새끼성게는 평균각경 350 $\mu\textrm{m}$이었다. 채묘 후 새끼성게의 생존율과 평균각경은 30일째 58.5%와 1.32mm, 92일째 27.7%와 3.82mm 및 사육 최종 일인 181일째에 15.6%와 11.70mm였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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