Mutans streptococci는 치아우식증과 관련이 있다고 보고되고 있으며, 이 streptococci 종 중에서 S. mutans나 S. sobrinus가 인간의 치아우식증에서 가장 일반적으로 나타난다. 치아우식증에서 이 세균종의 분포는 인종과 지역에 따라 다양하다. 본 연구에서는 2-6세인 52명의 치아우식증 환자에서 비우식부위와 우식부위로부터 치태를 채취하여 DNA를 추출한 후 dex와 gtf 유전자에 기초한 S. mutans와 S. sobrinus에 특이한 primer를 제작한 후 PCR을 시행하여 S. mutans와 S. sobrinus의 분포도를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 어린이 치아우식증 환자에서 S. mutans나 S. sobrinus가 발견된 어린이는 37명(71.2%)이었다. 2. 이들 어린이 중에서, S. mutans 또는 S. sobrinus가 비우식부위에서만 발견된 어린이는 3명(5.8%), 우식부위에서만 발견된 어린이는 22명(42.3%), 두 부위 모두에서 발견된 어린이는 12명(23.1%)이었다. 3. S. mutans나 S. sobrinus가 나타난 비우식부위 치태는 15개(28.8%), 우식부위치태는 34개(65.4%)였다. 4. 비우식부위의 경우 S. mutans만 출현한 어린이는 52명 중 8명(15.4%), S. sobrinus만 출현한 어린이는 6명(11.5%), 두 세균종이 같이 출현한 어린이는 1명(1.9%)이었다. 5. 우식부위에서 S. mutans만 출현한 어린이는 52명 중 24명(46.2%), S. sobrinus만 출현한 어린이는 2명(3.8%), 두 세균종이 같이 출현한 어린이는 8명(15.4%)이었다. 6. S. mutans는 gtf에 기초한 primer, S. sobrinus는 dex에 기초한 primer가 PCR에서 효과적으로 각각의 세균을 검출하였다. 이상의 결과로 미루어 우리나라 어린이의 경우 치아우식증은 MS와 밀접한 연관성이 있으며, MS중에서도 S. mutans가 중요하다고 판단된다. 한편 S. mutans와 S. sobrinus의 동반출현은 치아우식증과 더욱 밀접한 관련이 있는 것으로 보인다.
This study aimed to evaluate in vitro effects of Rheum undulatum L. root on the development of dental caries, especially its effects on viability, dental plaque formation, and glycolytic acid production of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Methanol extract of Rheum undulatum L. root and its fractions were prepared and tested. Among the test extract and fractions, dichloromethane fraction (DF) showed the most active antibacterial activity (inhibition zone: 13-17 mm) against S. mutans and S. sobrinus in a disc diffusion method. Minimal inhibitory concentrations (MICs) of DF against these bacteria ranged from 0.25 to 0.5 mg/mL. Furthermore, DF significantly inhibited the caries-inducing factors of these bacteria. At sub-MIC levels, DF inhibited in vitro dental plaque formation by S. mutans and S. sobrinus ($IC_{50}$= 0.079 and 0.142 mg/mL, respectively), which was caused, in part, by the inhibitory effect on the activity of glucosyltransferases. A significant reduction of glycolytic acid production was found at the concentration as low as 0.032 mg/mL for S. mutans and 0.063 mg/mL for S. sobrinus. The possible bioactive compounds that are inducing in vitro anti-cariogenic activity of DF are unknown. Based on the preliminary phytochemical analysis, the activity of DF may be related to the presence of anthraquinones, cardiac glycosides, coumarines, sterols/terpenes, and phenolics. These results indicate that DF is probably useful for the control of dental plaque formation and subsequent dental caries development.
Polyphenon 60 refers to the mixture of catechins present in green tea. The aim of this study was to investigate the antimicrobial activities of polyphenon 60 against 4 strains of Streptococcus mutans and 2 strains of Streptococcus sorbrinus, which are the major causative bacteria of dental caries. The minimum bactericidal concentration (MBC) values of polyphenon 60 for S. mutans and S. sobrinus were determined and the effect of biofilm formation inhibition of that was evaluated. The MBC value of polyphenon 60 against the bacterial strains was 2.5 mg/ml except for one particular strain, S. mutans KCOM 1128 for which the value was 1.25 mg/ml. The results of biofilm formation inhibition assay revealed that polyphenon 60 inhibited biofilm formation more than 90% at a concentration of 2.5 mg/ml. It was apparent that polyphenon exhibited biofilm formation inhibition activity along with bactericidal effect against S. mutans and S. sobrinus. Therefore, it is proposed that polyphenon 60 as one of the components of bactericidal agents could be useful in developing oral hygiene products, toothpaste or gargling solution.
치아우식은 Streptococcus mutans와 S. sobrinus가 주요 원인균이며, 이를 예방하기 위해서 구강 청결제를 사용한다. 그러나 구강청결제의 부작용 및 해로움으로 인하여 소아에게 권장하기에 주위를 요한다. 전기 분해수는 물을 전극을 통해서 전류를 흘려주어 생성되는 용액으로 항균력을 갖는다. 본 연구에서는 전기 분해수를 구강 청결제 대용으로 사용하기 위해서 치아 우식원성 세균 및 바이오 필름에 대한 항균력을 조사하였다. 염화나트륨이 포함된 증류수를 백금전극을 이용하여 전기 분해수를 생성하였다. 전기분해 수소수의 물리화학적 성분을 분석하고 S. mutans 및 S. sobrinus 배양액을 원심분리하여 세균을 얻고 전기 분해수, 알코올 및 불소가 포함된 구강 청결제를 처리하고 살아있는 세균 수를 배양을 통해서 조사하였다. 또한 치아우식균의 바이오 필름을 형성시킨 후, 전기 분해수 및 구강 청결제를 처리하여 바이오 필름 제거능을 크리스탈 바이올렛 염색을 이용하여 분석하고, 바이오 필름 내 살아있는 세균수의 양은 배양을 통하여 분석하였다. 전기분해수는 높은 농도의 자유염소 (free chlorine)을 포함하고 중성 페하를 보였다. 전기 분해수는 유의하게 S. mutans 및 S. sobrinus에 대해서 항균력을 보였으며, 이 세균들의 바이오 필름 제거능 및 바이오 필름 내 세균에 대해서도 항균력을 보였다. 전기 분해수는 부유세균에 대해서 알코올이 포함된 구강청결제보다 약한 항균력을 보였지만, 바이오 필름 세균에 대해서는 더 강한 항균력을 나타냈다. 이러한 결과를 바탕으로 중성 전기 분해수는 치아우식 예방을 위한 기존 구강 청결제의 대체 용액으로 사용이 가능할 것으로 사료된다.
Essential oil은 식물로부터 추출한 휘발성의 호지방성 화합물로서 essential oil은 잠재적으로 항균, 항진균, 진경련, 항말라리아성, 곤충퇴치능력 등의 생물학적 효과를 가지고 있다. 본 연구에서는 다양한 방향식물에서 추출한 Citral, Pineole, Linalool, Eugenol, Limonene, Pinene 등으로 구성된 다섯종류의 essential oil을 사용하였으며, 여덟 군의 중요한 병원성 세균인 Streptococcus mutans(S. mutans), Staphylococcus aureus(S. aureus), Streptococcus sanguis(S. sanguis), Streptococcus anginosus(S. anginosus), Actinobacillus actinomycetemcomitans(A. actinomycetem- comitans), Streptococcus sobrinus(S. sobrinus), Staphylococcus epidermidis(S. epidermidis), Esherichia coli (E. coli)에 대한 저항성으로서 항균능력을 평가하였다. Essential oil의 항균능력은 용액희석방법을 사용하여 검사하였으며, essential oil 농도범위는 10 mg/mL, 5 mg/mL, 2.5 mg/mL, 1.25 mg/mL, 0.625 mg/mL, 0.516 mg/mL, 0.3125 mg/mL, 0.078 mg/mL, 0.039 mg/mL, 그리고 0.015 mg/mL였다. Essential oil은 용량 의존적으로 시험 균주의 성장을 효과적으로 억제하였으며, NM을 제외하고 R, LG, FR, O oil은 저농도에서 구강 병원성 미생물의 성장을 억제하였다. 또한 사용된 essential oil은 E.coli와 S. epidermidis의 성장에는 탁월한 억제효과를 보이지는 못했으나 구강 병원성 미생물에 대해서는 특별한 성장 억제효과를 나타냈다.
Chlorhexidine dihydrochloride와 불화나트륨은 구강 내 세균을 억제하고 치태의 형성을 억제하기 위하여 많이 사용되고 있는 물질이다. 그러나 구강에는 여러 종류의 세균들이 상주하며 이들 물질에 대한 감수성도 다르다. 본 연구에서는 chlorhexidine dihydrochloride와 불화나트륨에 의해 Streptococcus mutans의 인공치태 형성이 억제되었을 때 Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius의 증식에 미치는 이들 물질의 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Streptococcus mutans를 8시간 배양하면 와이어에 형성된 인공치태 무게는 $106.1{\pm}18.1mg$이었으나, $1.0{\mu}M$ chlorhexidine dihydrochloride를 첨가하면 $5.1{\pm}1.5mg$으로 감소되었다(p<0.05). 이 때 배양액의 흡광도도 감소되었다. Streptococcus sobrinus의 배양액 흡광도는 약간 감소되었으나 Streptococcus oralis에서는 감소되지 않았고 Streptococcus salivarius에서는 배양 8시간에 감소되었다가 배양 24시간에 대조군과 차이가 없었다. 배지에 3.0mM 불화나트륨을 첨가하여 Streptococcus mutans를 8시간 배양하면 와이어에 형성된 인공치태 무게는 $26.7{\pm}8.3mg$으로 감소되었다(p<0.05). 이 때 배양액의 흡광도도 감소되었다. Streptococcus sobrinus와 Streptococcus oralis에서의 배양액의 흡광도도 감소되었으나 Streptococcus salivarius에서는 거의 감소되지 않았다. 이상의 결과는 Streptococcus mutans의 인공치태 형성을 억제하는 chlorhexidine dihydrochloride와 불화나트륨 농도에서 Streptococcus의 여러 종의 감수성이 각각 다르다는 것을 시사하였다.
Objectives: This study was designed to evaluate the synergistic antibacterial effect of xylitol and ursolic acid (UA) against oral biofilms in vitro. Materials and Methods: S. mutans UA 159 (wild type), S. mutans KCOM 1207, KCOM 1128 and S. sobrinus ATCC 33478 were used. The susceptibility of S. mutans to UA and xylitol was evaluated using a broth microdilution method. Based on the results, combined susceptibility was evaluated using optimal inhibitory combinations (OIC), optimal bactericidal combinations (OBC), and fractional inhibitory concentrations (FIC). The anti-biofilm activity of xylitol and UA on Streptococcus spp. was evaluated by growing cells in 24-well polystyrene microtiter plates for the biofilm assay. Significant mean differences among experimental groups were determined by Fisher's Least Significant Difference (p < 0.05). Results: The synergistic interactions between xylitol and UA were observed against all tested strains, showing the FICs < 1. The combined treatment of xylitol and UA inhibited the biofilm formation significantly and also prevented pH decline to critical value of 5.5 effectively. The biofilm disassembly was substantially influenced by different age of biofilm when exposed to the combined treatment of xylitol and UA. Comparing to the single strain, relatively higher concentration of xylitol and UA was needed for inhibiting and disassembling biofilm formed by a mixed culture of S. mutans 159 and S. sobrinus 33478. Conclusions: This study demonstrated that xylitol and UA, synergistic inhibitors, can be a potential agent for enhancing the antimicrobial and anti-biofilm efficacy against S. mutans and S. sobrinus in the oral environment.
Objectives: Pleurotus eryngii is used both for edible and medicinal purposes, and has a physiological activity. The purpose of this study is to investigate the antibacterial effect of Pleurotus eryngii against six oral pathogens (Staphylococcus aureus, Streptococcus criceti, Streptococcus mutans, Streptococcus ratti, Streptococcus sobrinus, and Actinomyces viscosus). Methods: The antibacterial activities of various extracts of Pleurotus eryngii were examined by disc diffusion assay and minimum inhibitory concentration (MIC). The disc diffusion assay was performed by putting a paper disc soaked in extracts on plates inoculated bacterial cultures. The MIC of these extracts was determined by using a broth microdilution assay at a concentration ranging between 0.03 mg/ml to 15.00 mg/ml. The growth inhibition effect of extracts was measured at 600 nm for 24 hrs. Results: The antibacterial activity was confirmed against all six tested bacteria at Pleurotus eryngii ethyl acetate extract by the disc diffusion method. Acetone extract showed the antibacterial activity only against 4 strains containing Streptococcus criceti, Streptococcus mutans, Streptococcus ratti, and Actinomyces viscosus. In ethanol extract, no activity was observed against other strains except Staphylococcus aureus. MIC values of ethyl acetate extract were the same, 7.50 mg/ml in all tested bacteria. Conclusions: Pleurotus eryngii exhibited the antibacterial activity against oral pathogens (Staphylococcus aureus, Streptococcus criceti, Streptococcus mutans, Streptococcus ratti, Streptococcus sobrinus, and Actinomyces viscosus). Thus, Pleurotus eryngii may be considered as a natural antibacterial agent for treatment of dental diseases.
치태의 형성은 이온, 효소, 영양물질, 화학물질 등과 같은 구강내 존재하는 다양한 물질들과 이들의 변화에 영향을 받는다. 본 연구에서는 치태형성에 중요한 역할을 하는 구강내 연쇄상구균인 Streptococcus sobrinus를 공시균으로, 비수용성 글루캔의 합성과 세균 증식 에 미치는 여러 인자들의 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Streptococcus sobrinus 배양 배지의 pH가 7.0일 때 비수용성 글루캔이 가장 많이 합성 되었고, pH 5.5와 pH 8.5에서는 그 합성이 감소하였다. 세균 증식도 pH 7.0에서 가장 활발하였다. 2. 효모 추출물은 2.5%일 때 비수용성 글루캔의 합성과 세균증식이 모두 활발하였다. 자당의 경우 농도가 증가할수록 비수용성 글루캔의 합성은 감소하여 1.25%보다 20%에서 합성이 10배 정도 감소하였으나, 세균의 증식은 20배 정도 증가하였다. 3. 배지의 calcium chloride 농도가 1.0mM, potassium chloride 농도가 40mM, magnesium chloride 농도가 0.1mM 이었을때 비수용성 글루캔의 합성이 가장 활발했으나, 세균의 증식에는 큰 영향을 미치지 않았다. 4. Sodium bicarbonate 10mM에서 비수용성 글루캔 합성과 세균의 증식 이 모두 활발하였으며 100mM 이상에서는 모두 억제되었다. Tris 10mM에서 비수용성 글루캔 합성과 세균의 증식이 모두 억제되었으며 100mM 이상에서는 모두 증가되었다. 5. Sodium phosphate와 potassium phosphate는 10mM 이상에서 비수용성 글루캔 합성과 세균증식이 모두 억제되었다.
10종 양치식물의 지상부와 지하부 메탄올 추출물을 대상으로 Bacillus subtilis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Propionibacterium acnes, Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus 등 병원성 미생물에 대한 항균활성을 broth microdilution법과 paper diffusion법을 이용하여 분석하였다. 억제환이 15 mm 이상으로 나타난 추출물을 대상으로 0.125, 0.25, 0.5 1, $2\;mg{\cdot}mL^{-1}$의 농도에서 3일 동안 각 미생물의 생육 억제에 미치는 영향을 분석하였다. 그 결과, B. subtilis, E. coli, L. monocytogenes에 대해서는 꿩고비의 지하부 추출물에서 억제활성이 가장 우수하였으며, 살균처리하지 않은 조추출물 상태에서 $2\;mg{\cdot}mL^{-1}$의 농도에서 72시간 이후에도 각 39, 33, 58%의 억제활성을 보였다. P. acnes에 대해서는 꿩고비 지상부 추출물이 가장 우수한 항균활성을 보였으나, 15 mm 미만의 억제환을 보여 항균력이 약한 것으로 나타났다. S. mutans와 S. sobrinus에 대해서는 다수의 양치식물이 비교적 우수한 항균활성을 보여 양치식물의 추출물은 전반적으로 Streptococcus에 대한 감수성이 높은 것으로 생각되었다. 그러나 고비의 지하부 추출물이 $2\;mg{\cdot}mL^{-1}$의 농도에서 72시간 후 각 28, 39%, 그 외의 추출물은 10% 내외의 낮은 항균활성을 보여 10종의 양치식물 추출물 중에는 Streptococcus에 대하여 뛰어난 항균력을 보이는 추출물은 없는 것으로 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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