For the study of glucose oxidase(GOD) and catalase(CAT) coimmobilization system, the enzymes were obtained from Penicillium spp., PS-8, and the strain itself was used as an immobilizing matrix. To separate glucose oxidase and catalase after the ammonium sulfate fractionation of the culture broth, DEAF-cellulose column was used and its activity yield was 54 and 34%, respectively. Both enzymes were immobilized on the cell matrix, followed crosslinking with 2.5% glutaraldehyde for 12hr. In the determination of efficiencies of GOD and CAT of dual, mixed and soluble enzyme systems, the dual immobilized one w-as superior to those of the soluble or mixed ones. In the comparison of pH profiles, the dual and mixed types showed broader maximum pH ranges than the soluble type. Varying CAT/GOD ratio of the dual system, the higher the ratio showed the broader activity profile. In the comparison of apparent $K_m$ of GOD only and CAT/GOD=10, they were $7.1{\times}10^{-2}$ and $5.1{\times}10^{-2}M$. Their activation energies showed 3.98kcal/mole/deg for GOD only and 2.98kcal/mole/deg for CAT/GOD=10.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.33
no.4
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pp.587-596
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2006
Most of oral streptococci express the Antigen I/II (AgI/II) proteins, cell wall anchored adhesions. AgI/II protein binds to salivary agglutinin glycoprotein, a component of tooth pellicle and to ligands in other bacteria. These associations play important roles in bacterial colonization. Recently, it was reported that diverse host molecules also interact with AgI/II protein and that these interactions induce inflammatory responses from host cells. Among mutans streptococci containing -type hemolytic activity, Streptococcus mutans is a causative agent for dental caries. Compared with many other strains of S. mutans, GS-5 strain is unique in that this bacterium expresses truncated secretory AgI/II protein due to the nonsense mutation in the agI/II gene. This indicates that S. mutans GS-5 has a different clinical role and a recent report supported this idea based on the results from clinically isolated S. mutans strains. Previously, we had cloned agI/II gene from S. mutans GS-5 and generated recombinant N-terminal AgI/II protein. In this study, we further produced a hybridoma line expressing anti-AgI/II monoclonal antibodies named as 1C11A. This antibody showed high sensitivity to AgI/II protein in Western blot and ELISA. This new reagent will provide a basis for investigating the mechanisms of AgI/II-related diseases.
Toxoplasma gondii is an apicomplexan zoonotic protozoan parasite that infects most species of warm-blooded animals, including humans. The heavy incidence and severe or lethal damage caused by T. gondii infection clearly indicate a need for the development of an effective vaccine. T. gondii GRA8 is a member of the dense granules protein family and is used as a marker of acute infection. In the present study, we evaluated the protective immunity induced by DNA vaccination based on a recombinant eukaryotic plasmid, pDsRed2-GRA8, against acute toxoplasmosis in mice. BALB/c mice were intramuscularly immunized with the pDsRed2-GRA8 plasmid and then challenged by infection with the highly virulent GFP-RH strain of T. gondii. The specific immune responses and protective efficacy against T. gondii of this vaccine were analyzed by measuring cytokine and serum antibody titers, splenocyte proliferation assays, and the survival times of mice after challenge. Our results showed that mice immunized with pDsRed2-GRA8 demonstrated specific humoral and cellular responses, induced higher IgG antibody titers with predominant IgG2a production; increased levels of IL-10, IL-12 (p70), $IFN-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, and splenocyte proliferation; and prolonged survival times compared to those of control mice. The present study showed that DNA immunization with pDsRed2-GRA8 induced humoral and cellular immune responses, and all immunized mice showed greater Th1-type immune responses and longer survival times than those of control mice. These results indicated that T. gondii GRA8 DNA immunization induces a partial protective effect against acute toxoplasmosis.
In spite of long research period for Salmonella typhi, little information is known about the pathogenesis mechanism of human typhoid fever caused by S. typhi due to lack of infection model in animals. A wild-type of S. typhi Ty2 strain requires cysteine to grow on minimal media. We hypothesized that this cysteine requirement may restrict colonization of S. typhi in animals during infection process. Among the S. typhi strains carrying Salmonella typhimurium genomic library, we have isolated three S. typhi transformants growing on minimal media without cysteine. Although there were three ORFs in DNA of pBP71, the STM1490 ORF complemented cysteine auxotrophy of S. typhi. Analysis of the deduced amino acid sequence of the STM1490 homolog in S. typhi revealed that there are differences in two amino acids. Plasmids containing amino acid substitutions in STM1490 supported S. typhi growth on minimal media without cysteine, indicating irrelevance of these two amino acids to STM1490 function. These results tells us that there are other factors or systems involved in cysteine requirement of S. typhi.
Laskar, Arghadeep;Zhong, Jianxia;Mo, Y.L.;Hsu, Thomas T.C.
Interaction and multiscale mechanics
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v.2
no.1
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pp.69-89
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2009
Reinforced and prestressed concrete (RC and PC) thin walls are crucial to the safety and serviceability of structures subjected to shear. The shear strengths of elements in walls depend strongly on the softening of concrete struts in the principal compression direction due to the principal tension in the perpendicular direction. The past three decades have seen a rapid development of knowledge in shear of reinforced concrete structures. Various rational models have been proposed that are based on the smeared-crack concept and can satisfy Navier's three principles of mechanics of materials (i.e., stress equilibrium, strain compatibility and constitutive laws). The Cyclic Softened Membrane Model (CSMM) is one such rational model developed at the University of Houston, which is being efficiently used to predict the behavior of RC/PC structures critical in shear. CSMM for RC has already been implemented into finite element framework of OpenSees (Fenves 2005) to come up with a finite element program called Simulation of Reinforced Concrete Structures (SRCS) (Zhong 2005, Mo et al. 2008). CSMM for PC is being currently implemented into SRCS to make the program applicable to reinforced as well as prestressed concrete. The generalized program is called Simulation of Concrete Structures (SCS). In this paper, the CSMM for RC/PC in material scale is first introduced. Basically, the constitutive relationships of the materials, including uniaxial constitutive relationship of concrete, uniaxial constitutive relationships of reinforcements embedded in concrete and constitutive relationship of concrete in shear, are determined by testing RC/PC full-scale panels in a Universal Panel Tester available at the University of Houston. The formulation in element scale is then derived, including equilibrium and compatibility equations, relationship between biaxial strains and uniaxial strains, material stiffness matrix and RC plane stress element. Finally the formulated results with RC/PC plane stress elements are implemented in structure scale into a finite element program based on the framework of OpenSees to predict the structural behavior of RC/PC thin-walled structures subjected to earthquake-type loading. The accuracy of the multiscale modeling technique is validated by comparing the simulated responses of RC shear walls subjected to reversed cyclic loading and shake table excitations with test data. The response of a post tensioned precast column under reversed cyclic loads has also been simulated to check the accuracy of SCS which is currently under development. This multiscale modeling technique greatly improves the simulation capability of RC thin-walled structures available to researchers and engineers.
In order to elucidate the plastic deformation of solids, the following assumptions were made: (1) the plastic deformation of solids is classified into two main types, the one which is caused by dislocation movement and the other caused by grain boundary movement, each movement being restricted on a different shear surface, (2) the dislocation movement is expressed by a mechanical model of a parallel connection of various kinds of Maxwell dislocation flow units whereas the grain boundary movement is also expressed by a parallel connection of various kinds of Maxwell grain boundary flow units; the parallel connection in each type of movements indicates that all the flow units on each shear surface flow with the same shear rate, (3) the latter model for grain boundary movement is connected in series to the former for dislocation movement, this means physically that the applied stress distributes homogeneously in the flow system while the total strain rate distributes heterogeneously on the two types of shear planes (dislocation or grain boundary shear plane), (4) the movement of dislocation flow units and grain boundary units becomes possible when the atoms or molecules near the obstacles, which hinder the movement of flow units, diffuse away from the obstacles.Using the above assumptions in conjunction with the theory of rate processes, generalized equations of shear stress and shear rate for plastic deformation were derived. In this paper, four cases important in practice were considered.ted N${\cdot}{\cdot}{\cdot}$O hydrogen bond and the second of two normal N${\cdot}{\cdot}{\cdot}$O hydrogen bonds, both of which exist between the amino group and the perchlorate, groups. A p-phenylenediamine group is approximately planar within an experimental error and bonded to twelve perchlorates: ten perchlorates forming hydrogen bonds and two being contacted with the van der Waals forces. A perchlorate group is surrounded by six p-phenylenediamines and four perchlorates; among the six p-phenylenediamines, five of them are hydrogen-bonded, and the rest contacted with the van der Waals force.
Journal of the Earthquake Engineering Society of Korea
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v.7
no.3
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pp.69-77
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2003
This paper presents test results on eight reduced beam section(RBS) steel moment connections. The testing program addressed bolted versus welded web connection and panel zone(PZ) strength as key variables, Specimens with medium PZ strength were designed to promote energy dissipation from both PZ and RBS regions such that the requirement for expensive doublet plates could be reduced. Both strong and medium PZ specimens with a welded web connection were able to provide satisfactory connection rotation capacity for special moment-resisting frames. On the other hand, specimens with a bolted web connection performed poorly due to premature brittle fracture of the beam flange of the weld access hole. If fracture within the beam flange groove weld was avoided using quality welding, the fracture tended to move into the beam flange base metal of the weld access hole. Plausible explanation of a higher incidence of base metal fracture in bolted web specimens was presented. The measured strain data confirmed that the classical beam theory dose not provide reliable shear transfer prediction in the connection. The practice of providing web bolts uniformly along the beam depth was brought into question. Criteria for a balanced PZ strength improves the plastic rotation capacity while reduces the amount of beam distortion ore also proposed.
Samples showing yellow mosaic symptom of Lilium spp. with necrotic fleck, stunting, malformation, and colour breaking were collected from lily-growing areas in the southern part of Korea. Two viruses were distinguished under a electron microscope and their host range, serological reaction, stability in sap, type of aphid transmission, and relations with cells and tissues were examined. Broad bean wilt virus (BBWV) was transmitted by sap-inoculation to 23 plant species in 8 families and by the aphid, Myzus persicae. This virus was inactivated after 10 min at 70C, at dilution of $10^{-3}$, and after 6 days at about 20C. Electron microscopic examination of purified preparation showed that the virus is spherical particle of 28nm in diameter. The virus reacted positively with BBWV-antiserum in agar gel diffusion test. In ultrathin sections of BBWV infected tissues, large aggregates or crystalline array of virus particles and vesicular body were found in the cytoplasm, vacuole, and nucleus of mesophyll cells. Cucumber mosaic virus (CMV) was transmitted by sap-inoculation. Electron microscopic examination of its purified preparation showed spherical particles of 30nm in diameter. The virus reacted positively with CMV-Y strain-antiserum in agar gel diffusion test. In ultrathin sections of CMV infected tissues, crystalline array of virus particles were found in the vacuole and a large number 0f virus particles were found in the cytoplasm and the plasmodesmata of mesophyll cells. When each of these viruses was retransmitted to Lilium tigrinum. L. concolor, and L. auratum, BBWV induced slight symtoms and colour breaking, but CMV induced yellowing mosaic or necrotic fleck.
Toxoplasmn gonnii, an intracellular protozoan infecting many kinds of eukaryotic cells, has been used to experimentally infect macrophages, epithelial cells, fibroblasts, and various cancer cells, but rarely T and B Iymphocytes or granulocytes. The present study was performed to determine the susceptibility of murine (BALB/c or CBA) splenic T and B llrnphocytes, and granulocytes to infection trio T. gondii RH tachyzoites. The ultrastructure of the infected host cells was observed by TEM, and the degree of intracellular parasite proliferation was quantified using 3H-uracil uptake assay. At 24 hrs post-culture, the host cell cytoplasm was found to contain 1 or 2, or a maximum of 7-8 tachyzoites. Infected T Iymphocytes demonstrated a peripherally displaced nucleus, a parasitophorous vacuole enveloping the parasite, and an increased number of mitochondria. In B Iymphocytes infected with tachyzoites, RER was not well developed compared to uninfected B Iymphocytes. Uninfected granulocytes contained many electron dense granules, but T. gondii-infected granulocytes demonstrated a decreased number of granules. Based on the 3H-uracil uptake assay. the susceptibility of T and B Iymphocytes, and granulocytes, to infection with T. gonnii tachyzoites was fairly high irrespective of cell type and strain of mouse. This strongly suggests deterioration in the functioning of infected host immune cells.
This research was investigated the effects of temperature and time against the formation of biofilms by foodborne pathogens on surfaces of polyethylene and stainless steel. After preliminary experiments with 32 strains from 6 species of foodborne pathogens (Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Salmonella Typhimurium), one strain from each species with the highest biofilm formation efficiency was selected. All foodborne pathogens showed a tendency toward an increased ability for biofilm formation with increasing temperature, but there was no consistency between the two materials and between foodborne pathogens. At all tested temperatures, the biofilm formation ability of E. coli and P. aeruginosa on the polyethylene surface was higher than that on the stainless steel surface with significant differences. The foodborne pathogens all formed biofilms immediately upon inoculation, and biofilm formation by E. coli, P. aeruginosa, and S. Typhimurium increased on both the polyethylene and stainless steel surfaces at 1 h after inoculation compared to at 0 h. At 7 days after biofilm formation, the other strains except S. aureus showed no difference in survival rates on polyethylene and stainless steel. The ability of these 6 foodborne pathogens to form biofilms showed different trends depending on the type of bacteria and the instrument material, i.e., polyethylene and stainless steel.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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