This study included two parts of investigation, the microfloral changes during the brewing process with the changes of pH, total acidity, temperature and alcoholic contents, as well as determination of survival times of major enteric pathogens in Takju. 1. Maximum number of Saccharomyces cerevisiae was $4.3{\times}10^7$ per milliliter on the 5th day of fermentation and gradually decreased. Saccharomyces cerevisiae was one of the predominant strains of the fermentation process. The number of Saccharomyces cerevisiae was $4.3{\times}10^6$ per milliliter at the completion of the brewing and human consumption. In a few days after the completion of the brewing. Bacillus subtilis and some species of Staphylococcus spp. began to grow and those organisms were responsible for the spoilage. 2. Maximum pH, during the brewing, was 5.8 on the first day of fermentation and rapidly decreased until 6th day of fermentation at pH 4.3. 3. Maximum alcholic content was 14.5 degree on the 4th day of fermentation, 10.3 degree on the 5th day and this degree was continued during the experimentation. 4. Maximum temperature, during Takju brewing was 34.deg.C on the 3rd day of fermentation and rapidly decreased up to 23.deg.C on the 6th day and this temperature was continued until the brewing process was finished. 5. Maximum total acidity was 0.57 percent on the 4th day of fermentation and gradually decreased by brewing process was completed. 6. Survival time of major enteric pathogenic bacteria in Takju was as follows : Shigella dysenteriae and Escherichia coli were isolated in two hours and 14 hours respectively, but Salmonella typhi, Vibrio parahemolyticus were not isolated even in an hour after the inoculation of those organisms in undiluted Takju. In diluted Takju, Salmonella typhi, Vibrio parahemolyticus were not isolated even in an hour after the inoculation of those organisms in undiluted Takju. In diluted Takju, Salmonella typhi, Shigella dysenteriae, and Escherichia coli were survived for 50-60 hours, but Vibrio cholerae and Vibrio parahemolyticus were not isolated even if treated within one hour.
Bacteroiospermia is a frequently finding in fresh raw and extended porcine semen and can results in detrimental effects on semen quality and longevity. This study aims to evaluate the type of bacterial contaminants in raw and extended porcine semen and the reducing effect of antibiotic test. To investigate bacterial contaminants, out of 387 sample (raw semen 201, extended semen 186) were collected from 6 artifical insemination centers in Gyeongsangnam-do, were inoculated onto blood agar and MacKonkey agar, respectively. Bacterial colonies were selected after culturing for 48 hours, at $37^{\circ}C$, followed by Gram staining, KOH test, oxidase test, catalase test and eventually identified using VITEK System. Total 15 genus and 24 species of bacteria were isolated from these semen samlpes. In raw semen, the most prevalent contaminants were Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Staphylococcus auricularis, Delftia acidovorans, Acinetobacter lowffii, S. aureus and others. And in extended porcine semen, A. lowffii, S. aureus, S. auricularis and other bacteria were identified. Most of them was G(-), which is nonpathogenic bacteria. It seems that bacterial contaminants in fresh raw and extended porcine semen originated from multiple sources at the farms/stud, and were from animal origin and non-animal origins. Whereas, the 7 virus which is known to be detected in porcine semen in 75 cases was not detected. This results showed that removal of bacterial contamination in raw and extended porcine semen is essential and farms were kept for biosecurity and individual hygienes.
Wan, Jin;Li, Yan;Chen, Daiwen;Yu, Bing;Zheng, Ping;Mao, Xiangbing;Yu, Jie;He, Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권3호
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pp.461-468
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2016
In recent years, various naturally occurring defence peptides such as plectasin have attracted considerable research interest because they could serve as alternatives to antibiotics. However, the production of plectasin from natural microorganisms is still not commercially feasible because of its low expression levels and weak stability. A tandemly arrayed plectasin gene (1,002 bp) from Pseudoplectania nigrella was generated using the isoschizomer construction method, and was inserted into the pPICZαA vector and expressed in Pichia pastoris. The selected P. pastoris strain yielded 143 μg/ml recombinant plectasin (Ple) under the control of the methanol-inducible alcohol oxidase 1 (AOX1) promoter. Ple was estimated by SDS-PAGE to be 41 kDa. In vitro studies have shown that Ple efficiently inhibited the growth of several gram-positive bacteria such as Streptococcus suis and Staphylococcus aureus. S. suis is the most sensitive bacterial species to Ple, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 4 μg/ml. Importantly, Ple exhibited resistance to pepsin but it was quite sensitive to trypsin and maintained antimicrobial activity over a wide pH range (pH 2.0 to 10.0). P. pastoris offers an attractive system for the cost-effective production of Ple. The antimicrobial activity of Ple suggested that it could be a potential alternative to antibiotics against S. suis and S. aureus infections.
유기 염소계 소독제인 삼염화이소시아눌산(trichloroisocyanuric acid)에 의한 다양한 미생물의 사멸특성을 규명하기 위하여, 대장균, 고초균, 포도상구균, 레지오넬라균, 수도모나스균 등을 각각 증류수에 부유시킨 후, 접촉시간과 소독제의 농도를 변화시키면서 사멸률을 측정하였다. 삼염화이소시아눌산 8 ppm 수용액 하에서 미생물 99%의 사멸률에 도달하는 시간은 대장균 60초, 수도모나스균 368초, 포도상구균 372초, 고초균 506초, 레지오넬라균 812초 순으로 측정되었다. 특히 대장균 사멸률 99%에 도달하기 위한 같은 농도(8 ppm) 세 종류의 소독제 접촉시간은 삼염화이소시아눌산 60초, 단토브롬(BCDMH, Bromochlorodimethylhydantoin) 114초, 칼슘하이포(calcium hypochlorite) 7,100초 순으로, 대장균에 대한 삼염화이소시아눌산의 소독력이 가장 우수하게 측정되었다. 본 연구결과는 염소계 소독제에 의한 사멸특성이 미생물 종 특이적이며 또한 소독제의 종류, 농도, 접촉시간에 따라서 매우 다양하게 측정됨을 제시하고있다.
Purpose : This study was conducted to investigate the in vitro inhibitory effects of heat-clearing medicinal on common bacterias in gynecology. Methods : The heat-clearing medicinals ( Trichosanthis Radix, Sophorae Fructus, Phragmitis Rhizoma, Buddleiae Flos, Bambusae Folium, Anemarrhenae Rhizoma, Celosiae Semen, Gardeniae Fructus, Prunellae Spica, Sophorae Radix, Dictamni Radicis Cortex, Coptidis Rhizoma, Gentianae Scabrae Radix, Scutellariae Radix, Phellodendri Cortex) were used in this study. Staphylococcus aureus, MRSA, Candida albicans and Gardnerella vaginalis were used for vaginal pathogenic microorganisms. Streptococcus spp., Escherichia coli HB101, Lactobacillus gasseri were used for normal vaginal florae. We evaluated antibiotic effect by the optical density and the colony test. Results : The optical density and colony test showed that Celosiae Semen, Prunellae Spica, Scutellariae Radix and Phellodendri Cortex of herbs among heat-clearing medicinal had antimircobial effect. Celosiae Semen and Prunellae Spica had antimicrobial susceptibility and selective toxicity in MRSA. Scutellariae Radix and Phellodendri Cortex had antimicrobial susceptibility and selective toxicity in Gardnerella vaginalis. Conclusion : According to the above results, we could suggest that Celosiae Semen, Prunellae Spica, Scutellariae Radix and Phellodendri Cortex among heat-clearing medicinal be available to antimicrobial agent of vaginal pathogenic microbial species in vitro.
HTLV-I 의 gag-pro 유전자 중첩영역내에서 -1 ribosomal frameshifting 이 일어나는 자리를 결정하기 위하여 gag-pro 중첩영역의 일부를 SP6 promoter 를 가진 백터내에 클로닝하였다. 그 결과 닭의 prelysozyme 에서 유래한 5개의 아미노산을 코드하는 합성유전자와 141 bp 로된 gag-pro 중첩영역의 뒤에 Straphylococcus aureus 의 protein A 유전자단편이 연결된 hybrid 유전자를 보유한 플라스미드를 제작하였다. 이 DNA 클론을 주형으로 SP6 RNA polymerase 의 작용에 의해 한종류의 mRNA 를 다량으로 합성하였다. Invitro 에서 합성된 mRNA 로 무세포계에서 단백질을 합성한 결과 21 kDal 의 단백질이 생성되었고 IgG-Sepharose 를 사용한 affinity chromatography 로 합성된 단백질을 순수하게 정제할 수 있었다. 본연구에서 설명한 in vitro 실험계는 Gag-Pro transframe 단백질의 신속한 정제 및 일차구조의 결정에 유익하게 사용될 것으로 보이며 이와 같은 실험의 결과 mRNA 에서 ribosomal frameshifting 이 일어나는 정확한 site 를 결정할 수 있을 뿐 같은 실험의 결과 mRNA 에서 ribosomal frameshifting 이 일어나는 정확한 site 를 결정할 수 있을 뿐 아니가 pro 유전자의 발현에 필요한 frameshift 를 유도하는 tRNA 의 동정도 가능하게 될 것이다.
Purpose: This study clarified the bacterial pathogens currently causing acute infectious enterocolitis (AIE) in children and evaluated the clinical characteristics and ultrasonographic findings according to the different pathogens. Methods: Medical records regarding age, sex, clinical symptoms, laboratory data, identified enteropathogens, ultrasonographic findings, treatment, and outcome of 34 patients who were diagnosed with AIE via stool examination using multiplex polymerase chain reaction (PCR) or culture, were retrospectively reviewed. Results: Twenty-four patients (70.6%) were male. The mean age of the patients was $8.5{\pm}6.2$ (range, 1.1-17.1) years. Six bacterial pathogens were isolated: Salmonella species (spp.) (32.4%), Campylobacter spp. (20.6%), verotoxin-producing Escherichia coli (14.7%), Staphylococcus aureus (11.8%), Clostridium difficile (8.8%), and Shigella spp. (2.9%). Abdominal pain occurred in all patients regardless of pathogen. The patients infected with Salmonella were older than those infected with verotoxin-producing E. coli (p<0.05). C-reactive protein levels were higher in patients with Salmonella and Campylobacter infections than in those with verotoxin-producing E. coli infection (p< 0.05), the other clinical and laboratory data were indistinguishable between pathogens. Ultrasonography demonstrated diverse involvement of bowel segments according to pathogen. Wall thickening of both the ileum and the entire colon was the most common lesion site regardless of pathogen. Conclusion: Various bacterial agents cause AIE and the symptoms are diverse symptoms, however, all most children recovered spontaneously. Use of multiplex PCR on stool samples warrants improvement of its sensitivity for diagnosis of enteropathogenic bacteria. Ultrasonographic examination is useful for diagnosis of AIE; it can also detect the disease extent and severity.
This study aimed to determine the antioxidant and antibacterial effects of solvent extracts from Scutellaria baicalensis. The S. baicalensis was successively extracted with 5 kinds of solvents. The obtained samples were as follows; hexan fraction (IPK-1), chloroform fraction(IPK-2), ethyl acetate fraction(IPK-3), butanol fraction(IPK-4), and water fraction(IPK-5). These extracts were determined to process antibacterial effects using a paper disc method against 18 species of human pathogenic bacteria, antioxidant activity using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) method and inhibiting ability of linoleic acid autoxidation. Extracts of S. baicalensis has shown selective antibacterial effects on various strains of bacteria. Ethyl acetate fraction(IPK-3) showed the highest antimicrobial activity against selective bacteria, such as Staphylococcus aureus 285, S. aureus 503. In antioxidant activity test, free radical scavenger activity of IPK-3 fraction was 92% compared with BHA at the same concentration, while lipid peroxidation inhibition was 48%. These results suggest that IPK-3 fraction of S. baicalensis could be suitable in development of antimicrobial and antioxidant agents.
This study evaluated the effects of gamma ray irradiation on the safety of dried seafood products. Dried salted squid, Engraulis japonica, Hizikia fusiformis, Mytilus coruscus, and Porphyra tenera were gamma-irradiated at doses of 0, 1, 3, and 5 kGy. The total bacterial populations were then enumerated on total plate count agar, and bacteria isolated from the samples were identified by 16S rDNA sequencing. In addition, the isolated strains were inoculated in the products to determine $D_{10}$ values. The total bacterial populations in the dried seafood products ranged from 3.40 to 6.59 log CFU/g, and those of yeasts and molds ranged from 2.21 to 4.56 log CFU/g. The sequence analysis identified Staphylococcus sp. as the most common species in the dried seafood products, except for dried P. tenera. The $D_{10}$ values of the contaminating bacteria were lower than 0.7 kGy, except for Deinococcus sp., which had a value of 1.39 kGy. This study demonstrated that gamma irradiation could be used to improve the safety of dried seafood products.
A phytochemical study of Alphonsea cylindrica King (unreported) has led to the isolation of six alkaloids. The compounds were identified as kinabaline (1; azafluorenone alkaloid), muniranine (2), O-methylmoschatoline (3; oxoaporphine alkaloid), lysicamine (4), atherospermidine (5) and N-methylouregidione (6; 4, 5-dioxoaporphine alkaloid). The structures of the isolated compounds were determined based on the spectroscopic techniques and by comparison with data reported in the literature. Alkaloid 2 was isolated as a new derivative of azafluorenone while alkaloids 1, 3 - 6 were isolated for the first time from Alphonsea species. In addition, alkaloid 3 and 4 showed inhibition zone against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Bacillus cereus in disc diffusion test. The minimum inhibition concentration (MIC) values of lysicamine (4) against S. aureus, B. cereus and P. aeruginosa were found to be smaller than O-methylmoschatoline (3). Therefore, the reported antibacterial activity showed the potential of this plant as natural antibacterial agent and supported the documented traditional use of Alphonsea sp. in the treatment of diarrhea and fever.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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