To investigate the interaction of bacteria and Microcystis isolated from a hypertrophic reservoir(Seo-Nakdong River), the response of five bacteria in relation to the different treatment of Microcystis and microcystin production by addition of dominant bacteria Staphylococcus sciuri were examined. Five bacteria (S. sciuri, S. capitis, S. epidermis, Pseudomonas aeruginosa and Aeromonas aimonicida) were identified from the reservoir. In the experiment of bacterial response, two types of bacterial growth pattern were observed. All bacteria showed active growth in heated Microcystis-added media. Especially, three species of bacteria (S. sciuri, S. capitis and P. aeruginosa) among them showed active growth in live Microcystis-added media. In Microcystis response, increase of microcystin production showed when dominant bacteria, S. sciuri was added.
The intracellular superoxide dismutase (SOD) from Staphylococcus sciuri was isolated to homogeneity by continuous steps, including ammonium sulfate fractionation, DEAE-ion-exchange chromatography, gel filtration, and phenyl hydrophobic gel chromatography. Pure SOD had a specific activity of 4,625 U/mg and was purified 158-fold with a yield of 31 % from a cell free extract. The molecular weight of the purified SOD was determined to be approximately 35.5 kDa by gel filtration and the enzyme was also shown to be composed of dimeric subunits on denaturing SDS-PAGE. The enzyme activity remained stable at pH 5 to 11 and also to heat treatment of up to $50^{\circ}C$ at pH 7.8, with 80% relative activity. The enzyme was insensitive to cyanide, hydrogen peroxide, and azide, indicating that it is a manganese-containing SOD. The EPR spectrum showed the enzyme containing manganese as a cofactor.
계란의 주요 오염 미생물을 분리하여 계란의 난각 표면과 내부에 접종한 다음 감마선 살균을 실시하여 각 미생물의 감마선 감수성을 평가하였다. 본 실험에서 시중 유통 계란으로부터 분리된 미생물을 16S rDNA 염기서열분석을 통하여 잠정 동정한 결과 Staphylococcus sciuri, Bacillus cereus, Escherichia coli, Proteus mirabilis 및 Enterococcus faecalis의 5 종의 미생물이 확인되었으며 Salmonella는 검출되지 않았다. 표준 시험균주인 S. Typhimurium을 비롯하여 계란 분리균주 5종을 계란 난각 표면과 내부에 $10^{6{\sim}7}\;CFU/g$되게 접종한 다음 감마선을 조사하여 D10 값으로 감마선 감수성을 평가한 결과, S. Typhimurium은 $0.365{\sim}0.399\;kGy$, Staphylococcus sciuri는 $0.418{\sim}0.471\;kGy$, B. cereus는 $1.075{\sim}1.119\;kGy$, E. coli는 $0.280{\sim}0.304\;kGy$, P. mirabilis는 $1.132{\sim}1.330\;kGy$, 그리고 Enterococcus faecalis는 $0.993{\sim}1.290\;kGy$ 수준의 D10 값을 나타내었다. 감마선 조사 후 $25^{\circ}C$ 상온저장 조건에서 미생물의 생장을 살펴본 결과, S. Typhimurium은 3 kGy에서, E. coli와 Staphylococcus sciuri는 5 kGy에서 완전 사멸되었으며 다른 미생물 접종 시험군에서도 각각의 $D_{10}$ 값에 준하는 미생물생장 억제효과가 나타났다. 일반적인 계란의 미생물 오염 수준을 102 CFU/g 수준임을 감안할 때, 3 kGy의 감마선 조사선량으로 계란의 미생물 제거가 가능할 것으로 사료되었다.
무당벌레 소화기관으로부터 단백질 분해 우수세균 6균주를 분리하였다. 단백질 분해세균의 16S rRNA 유전자 염기서열을 해석하여 계통학적 특성을 검토한 결과, Staphylococcus sciuri subsp. sciuri (3균주), Bacillus subtilis (1균주), Bacillus thuringiensis (2균주)로 확인되었다. 이들 균주 중 pH 5.0 배지에서 58.5 U/ml의 높은 효소 활성을 나타내는 Staphylococcus sp. CB2-3을 최종 선발하였다. 효소의 특성을 조사한 결과, pH 4.0-6.0에서 높은 활성을 나타내어 산성 단백질 분해효소임이 확인되었다. 효소의 최적 반응 온도는 $40^{\circ}C$ 이었으며, $30-50^{\circ}C$의 범위에서 80% 이상의 효소 활성을 유지하였다. Staphylococcus sp. CB2-3 균주의 생육과 효소 활성을 위한 최적의 배지성분을 조사하였다. 탄소원으로 0.5% 솔비톨을 첨가하였을 때 효소 활성이 2배로 증가되었으며, 질소원으로 0.5% 탈지유를 첨가한 경우 효소 활성이 2.5배 증가되는 것으로 나타났다. 무기염류로는 KCl, $K_2HPO_4$, $FeSO_4$를 첨가하였을 때 효소 활성이 가장 높은 반면에 2가 금속이온인 $Co^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Cu^{2+}$를 첨가하였을 때는 균의 성장과 효소 활성이 심하게 저해되는 것으로 나타났다.
Yang, Yu Jin;Lee, Gi Yong;Kim, Sun Do;Park, Ji Heon;Lee, Soo In;Kim, Geun-Bae;Yang, Soo-Jin
한국축산식품학회지
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제42권2호
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pp.225-239
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2022
As commensal colonizers in livestock, there has been little attention on staphylococci, especially non-aureus staphylococci (NAS), contaminating meat production chain. To assess prevalence of staphylococci in retail pork and slaughterhouse carcass samples in Korea, we collected 578 samples from Korean slaughterhouses (n=311) and retail markets (n=267) for isolation of staphylococci and determined antimicrobial resistance phenotypes in all the isolates. The presence of and prevalence of fusB-family genes (fusB, fusC, fusD, and fusF) and mutations in fusA genes were examined in fusidic acid resistant isolates. A total of 47 staphylococcal isolates of 4 different species (Staphylococcus aureus, n=4; S. hyicus, n=1; S. epidermidis, n=10; Mammaliicoccus sciuri, n=32) were isolated. Fusidic acid resistance were confirmed in 9/10 S. epidermidis and all of the 32 M. sciuri (previously S. sciuri) isolates. Acquired fusidic acid resistance genes were detected in all the resistant strains; fusB and fusC in S. epidermidis and fusB/C in M. sciuri. Multi-locus sequence type analysis revealed that ST63 (n=10, 31%) and ST30 (n=8, 25%) genotypes were most prevalent among fusidic acid resistant M. sciuri isolates. In conclusion, the high prevalence of fusB-family genes in S. epidermidis and M. sciuri strains isolated from pork indicated that NAS might act as a reservoir for fusidic acid resistance gene transmissions in pork production chains.
The result of API staph-ident system was compared with cellular fatty acid composition for the identification of Staphylococcus species isolated from cattle. Isolated strains from cattle were correctly identified to S aureus, S intermedius, S hyicus, S simulans, S saprophyticus, S epidemis, S sciuri and S xylosus by API staph-ident system. The correlation between bacterial cellular fatty acid profile and Staphylococcus species isolated to API STAPH-IDENT system were. In conclusion, the result presented indicate that Staphylococci can be indentified to the species level by the cellular fatty acid profiles. Moreover, computerized fatty acid profile correlative anaylsis can be applied for determining identify of Staphylococcus species.
The objective of this study was to evaluate several types of uterine bacteria in Hanwoo. uterine bacteria from randomly selected 5 uterus was collected by flushing methods into a sterilized 1.5 ml centrifuge tube and was inoculated onto MacConkey agar and blood agar, respectively. After being incubated for 5% $CO_2$, aerobic or anaerobic condition at $37^{\circ}C$ during 48h, bacterial colonies were selected and re-inoculated onto blood agar plates. Re-cultured colonies were identified by Gram staining and finally identified using Vitek system. The identified bacteria were Staphylococcus lentus, Staphylococcus sciuri, Staphylococcus vitulinus, Staphylococcus warneri of Gram (+) and Rhizobium radiobacter, Sphingomonas paucimobilis of Gram (-) bacteria. Although, pathogenicity of identified bacteria was unclear, the bacteria can have an effect on the uterine microenvironment. Therefore, repetitive research will be required to determine the effects of bacteria in cattle exposed to a various environment.
거미는 육식동물로 구강의 소화라는 독특한 방법을 통하여 곤충을 비롯한 작은 동물을 먹이자원으로 이용한다. 거미의 독샘에 함유되어 있는 단백질 분해 효소 환만 아니라 소화관에 존재하는 미생물도 거미의 소화에 중요한 역할을 할 것으로 추정된다. 본 연구에서는 한국산 무당거미(Nephila clavata)의 소화관내 미생물 군집의 분포와 단백질 및 지질 분해능을 확인하고, 거미의 장내 미생물을 분리 .동정하고자 하였다. 한국산 무당거미의 소화관에 존재하는 총 개체수는 거미 18개체를 통합하여 처리하였을 때와 개체별로 처리하였을 때 모두 거미 한 마리당 $10^3-10^5$CFUs 로 매우 유사하였다. 계수된 미생물 중에서 90% 이상이 단백질 또는 지질 분해능을 나타내었다. 그리고 계수된 미생물 중에서 군종별로 1균주씩 순수 분리하였고, 분리된 미생물 중 63.3%가 각각 단백질 또는 지질 분해능을 나타내었고, 이중 50%의 균주는 단백질과 지질 분해능을 동시에 함유하는 것으로 나타났다. 형태적, 생리 .생화학적 방법을 통하여 동정한 결과, 11종류의 그람음성균(Acinetobacter calcoaceticus, A. haemolyticus, Aicaligenes faecalis, Cedecea davisae, C. neteri, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, Serratia marcescens, Stenotraphamonas maltophilia, Suttonella indologenes)과 11종류의 그람양성균(Bacillus cereus, B. coagulans, B. pasteurii, B. thuringiensis, Cellulomonas flavigena, Corynebacterium martruchotii, Enterococcus durans, E. faecalis, Micrococcus luteus, Staphylococcus huminis, S. sciuri)으로 분류되었다.
신선편이 농산물의 수요가 증가하고 있으나 아직까지 신선편이 농산물 가공시설에 대한 HACCP 적용이 제한적이고 작업공정에 대한 위생관리가 미흡하여 이에 대한 관리가 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 신선편이 농산물 가공시설과 작업공정에 대한 위생관리 및 관련 위생설비 개발에 대한 기초 자료로 활용하고자 작업장과 공정별 설비에 대한 미생물 오염실태를 조사하였다. 신선편이 농산물 가공업체의 엽채류 생산라인 작업장을 조사한 결과 각 작업공정별 벽체의 미생물 오염정도는 총균수가 $10^1{\sim}10^2$ CFU/100 $cm^2$로 검출되었으며, 대장균군과 병원성 미생물은 검출되지 않았다. 작업대 및 작업기기류의 미생물 오염정도는 총균수가 $10^0{\sim}10^4$ CFU/100 $cm^2$, 대장균군은 $ND{\sim}10^2$ CFU/100 $cm^2$로 검출되었다. 병원성 미생물 검사 항목 중에 Staphylococcus aureus로 의심되는 균을 동정한 결과 Staphylococcus sciuri 라는 균으로 확인되었으며, 특별한 병원성 미생물은 검출되지 않았다. 신선편이 엽채류는 총균수가 $10^4{\sim}10^6$ CFU/g, 대장균군은 $10^4{\sim}10^5$ CFU/g로 검출되었고, 세척수는 총균수가 $10^2$ CFU/g으로 검출되었으며 대장균은 검출되지 않았다. 작업장 내 공기 중의 낙하균과 부유균은 각각 $10^0{\sim}10^1$ CFU/plate, $10^1{\sim}10^3$$CFU/m^3$ 범위에서 검출되었다. 검출된 미생물은 동정한 결과 다양한 균이 검출되었으며 그중에서도 Sphingomonas paucimobilis는 공정 전 과정에서 검출되었다. 결과적으로 생산과정의 여러 검체에서 공기 미생물과 같은 균종이 검출되어 부착미생물만큼이나 공기 미생물이 제품의 오염에 영향을 줄 수 있는 가능성을 보여주었다. 따라서 생산에 관계된 시설과 작업장 내의 공기 미생물의 관리가 함께 이루어지는 것이 바람직한 것으로 판단된다.
Fibrinolytic microorganisms were screened from 42 samples of Korean fermented food (7 kinds of Chungook-jang, 14 kinds of commercial Doen-Jang, 5 kinds of home-made Doen-jang, and 16 kinds of Jeot-gal), 15 samples of Japanese fermented food (5 kinds of home-made soybean paste, and 10 kinds of Natto), and 19 samples of Indonesian fermented food (Tempe) as well as starters of Meju (500 microflora from Korea, and 22 from China). Initially, 11 isolates with strong fibrinolytic activity were selected for further characterization. The fibrinolytic activity of the 11 isolates ranged from 89 to 199% of standard plasmin. Four strains, M5l from Korean fermented food (Meju), I 1-1, I 1-4, and I 5-1 from Indonesian fermented food (Tempe), were chosen based on the degree of activity and reproducibility, and identified as Staphylococcus sciuri, Citrobacter or Enterobacter, Enterococcus faecalis, and Bacillus subtilis, respectively. The first two isolates are pathogenic stains while the latter two are considered as GRAS (Generally Recognized As Safe). Fibrinolytic activity of E. faecalis, characterized and designated as BRCA-5, reached a maximum, when the producer was cultivated in Ml7 broth supplemented with 1.0% glucose for 5 h at 37$^{\circ}C$ with shaking at 180 rpm. Compared to commercial fibrinolytic enzymes, the cell-free culture supernatant of 5. faecaiis BRCA-5 showed stronger activity than plasmin and streptokinase, but similar degree of specific activity as nattokinase and urokinase, aud it also demonstrated anticoagulant and antiplatelet activity ex vivo. These features of E. faecalis make it an attractive agent as a biomaterial for health-promoting foods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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