The rapid and accurate identification of biological agents is a critical step in the case of bio-terror and biological warfare attacks. Recently, matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry has been widely used for the identification of microorganisms. In this study, we describe a method for the rapid and accurate discrimination of Bacillus anthracis spores using MALDI-TOF MS. Our direct in-situ analysis of MALDI-TOF MS does not involve subsequent high-resolution mass analyses and sample preparation steps. This method allowed the detection of species-specific biomarkers from each Bacillus spores. Especially, B. anthracis spores had specific biomarker peaks at 2503, 3089, 3376, 6684, 6698, 6753, and 6840 m/z. Cluster and PCA analyses of the mass spectra of Bacillus spores revealed distinctively separated clusters and within-groups similarity. Therefore, we believe that this method is effective in the real-time identification of biological warfare agents such as B. anthracis as well as other microorganisms in the field.
Journal of the Korean Society of Environmental Restoration Technology
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v.3
no.1
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pp.70-79
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2000
Arbuscular mycorrhizal(AM) fungi have significant role for ecosystem structure and function. They are the major component of forest soil ecosystems and critically important for water and nutrient cycling in the system. To understand the ecology of AM fungi the fungal spores were collected, identified and counted in forest soils under various climatic and edaphic conditions. In relation to soil depth 90% of AM fungi spores and mycorrhizas distributed within 15cm soil depth. Number of spores per $100m{\ell}$ forest soil volume was 5 to 36 spores from 1 to 3 fungal species. AM fungal species diversity was higher in warmer climates, and more moist and fertile soils. The most frequently found species were Gigaspora decipiens irrespective of soil moisture and Gi. gigantea irrespective of soil fertility. In the Jeju island the soils of Cryptomeria japonica plantations and Miscanthus sinensis var. purpurascens meadow had more AM spores than the other soils. We suggest AM fungi be considered as keystones species when restoring a disturbed forest ecosystem.
This study was conducted to investigate into the distribution of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) in the greenhouse soils grown strawberry plants in Damyang and Jangheung districts. Twenty three soil samples were collected from strawberry plants under greenhouse conditions, and mycorrhizal spores in soils were separated using wet-sieving methods. Number of mycorrhizal spores per 30g fresh soil sized over 500${\mu}$m, 355~500${\mu}$m, 251~354${\mu}$m, 107~250${\mu}$m and $45{\sim}106{\mu}m$ were 0.3, 1.0, 4.2, 50.4 and 119, etc. Total number of spores per 30g fresh soil were l73.9. Root infection by vesicles and hyphae were 25% and 4%, respectively. Mycorrhizal root infection by arbuscules was not shown in strawberry roots. Isolated mycorrhizal spores were inoculated into the host plant of sudangrass to identify the genus of arbuscular mycorrhizal fungi, and propagated for 4 months. As a result of identification, mass propagated mycorrhizal spores were Glomus sp., Gigaspora sp., and Acaulospora sp., and so on.
In order to search the fate of Thelohonellus kitauei spores the extrusion rates of the polar filaments were monitored in uipo chronologically. Preserved spores suspended with various solutions at $-70^{\circ}C$ showed almost the same vigorous pattern as early freezing stages up to 1,750 days after initial preservation. It revealed that the vlabllltles of some spores suspended with 0.45% and 0.9% NaCl solutions and distilled water at $5^{\circ}C$ continued for 1,628 days, 1,614 days and 1,721 days, respectively. And, the life spans of some spores in the previous solutions added with antibiotics at $5^{\circ}C$ were 1,628 days, 1,614 days and 1,714 days, respectively. Key words: TheLohanellus kitnuei, spore, extrusion rate of polar filament, life span
A sucrose-agar globule (SAG) was newly introduced to increase production of the vesicular arbuscular mycorrhizal (VAM) fungal spores, Gigaspora gigantea and Glomus fasciculatum. An SAG inoculum and a sucrose-agar globule with root exudates (SAGE) inoculum were prepared, and their spore productions were compared with a soil inoculum. When the SAGE was used as the inoculum on sucrose-agar medium plates the number of spores was increased (35% more than the soil inoculum). After the soil inoculum and SAGE were inoculated on an experimental plant, Zingiber officinale, the percentage root colonization, number of VAM spores, and dry matter content were analyzed. It was observed that the SAGE showed a higher percentage of root colonization (about 10% more), and increases in the number of spores (about 26%) and dry matter (more than 13%) for the two VAM fungal spores than the soil inoculum. The results of this study suggested that the SAGE inoculum may be useful for the mass production of VAM fungi and also for the large scale production of VAM fungal fertilizer.
Cho, Ja Yong;Sohn, Bo-Kyoon;Lee, Hyo-Yeon;Chung, Soon-Ju
Horticultural Science & Technology
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v.18
no.6
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pp.802-807
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2000
This study was conducted to propagate the arbuscular mycorrhizal fungi in vitro using the hairy root of carrot transformed by Agrobacterium rhizogenes with Ri t-DNA. Mycorrhizal spores and roots in sudangrass plants were wet-sieved, surface-sterilized and inoculated onto the hairy root of carrot on the Modified Strullu & Romand (MSR) medium. The mycorrhizal spores of Glomus sp. propagated in vitro for 12 weeks was about $50{\mu}m$, and the shapes of spores were round or elliptic. Spores were formed mainly at the middle of the hyphae. Number of mycorrhizal spores propagated using dual culture of the transformed carrot roots and the mycorrhizal inoculum for 12 weeks were about 1,200 per plates.
It has been proposed that the mode of action of nisin against vegetative cells and spores of Clostridium botulinum is different. However, clear explanation is not available. Therefore, nisin action against vegetative cells and spores of C. botulinum was investigated in this study. Nisin was added at various stages of spore-to-vegetative cell transition and changes to sensitivity to the bacteriocin were observed. Different nisin preparation (Nisaplin or pure nisin) was compared for their activity against different stages of spore transformation of C. botulinum ATCC 25763. Germination was measured by determining loss of heat resistance and observing phase darkening of spores under phase-contrast microscope. Nisin acted bactericidally against vegetative cells, but acted sporostatically against spores of C. botulinum under the same concentration. This bactericidal and sporostatic action of nisin was dependent on the concentration of nisin used. Presence of nisin during spore activation by heat increased subsequent phase darkening and germination rates. However, nisin inhibited the germination and the outgrowth, when it was added after heat activation stage. Findings from this study suggest that the time of addition of nisin is very important for the effective control of spores during the heating process of foods. In addition, it may be possible to apply nisin at the stage of processing that coincides with the most sensitive stage of spore transformation.
We extracted arbuscular mycorrhizal fungal (AMF) spores from rhizospheres of three plants from Upo Wetland, Korea. We identified the isolated AMF spores based on morphological characteristics and phylogenetic analysis of partial 18S rDNA nucleotide sequences. The species diversity of AMF spores was calculated among the study sites and host plants. Consequently, nine species from six genera of AMF spores were identified. We confirmed the species diversity of the AMF spores in rhizospheres affected by host plants in the wetland. In the course of this study, we confirmed a previously unreported AMF species in Korea: Diversispora epigaea. We described the morphological features and molecular characteristics of this previously unreported AMF species.
This study examined the effects of myristate on an asymbiotic culture of Rhizoglomus intraradices, a species of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF; Glomeromycota). Mycelial growth and sporulation in a modified medium containing myristate were observed. The findings demonstrated that myristate induced R. intraradices spore formation, with daughter spores having a smaller diameter than the parent spores. This observation is consistent with previous studies on other Rhizoglomus species. Further studies are needed to investigate the potential for continuous culture, mass production using daughter spores, and the application of AMF colonization techniques in plants.
D10 values obtained for radiation alone in Bacillus subtilis and Clostridium perfrigenes were 0.35-0.48 kGy in vegetative cells, and 2~2.08 kGy in spores, respectively. Irradiation dose of 24 kGy completely inhibited spores. In the case of heat treatment, D50, 60 values ranged from 10 to 14 minutes in vegetative cells, and D70, 80, 90 values ranged from 10 to 140 minutes in spores. In the case of combined treatment with heat and radiation, D10 values ranged form 1 to 1.25 kGy in vegetative cells, and from 3.42 to 3.61 kGy in spores. Thus, resistance of cells to gamma radiation did not seem to be influences by pre-heating.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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