In the present study, antioxidant activities of two crude pigments (acetone and MeOH) and their solvent fractions (n-hexane, 85% aq.MeOH, n-BuOH, and water fractions) from red crab shell were evaluated by measuring 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH), peroxynitrites, and degree of production of reactive oxygen species (ROS) in HT 1080 cells as well as the extent of oxidative damage of genomic DNA purified from HT 1080 cells. From comparative analysis, 85% aq.MeOH fraction showed the strongest scavenging effect on both peroxynitrite in vitro and intracellular ROS in HT 1080 cells. Protective activities of these samples against hydroxyl radical-mediated genomic DNA damage were also investigated. 85% aq.MeOH and n-BuOH fractions significantly inhibited oxidative damage of purified genomic DNA. On the other hand, we investigated their inhibitory effects on nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cells. All samples significantly reduced NO production. Among the samples, n-hexane and water solvent fractions most effectively inhibited NO.
The purpose of this study was to investigate the phenolic acid, proanthocyanidin (PAs), and flavonol glycoside contents, as well as the antioxidant activities of pine needle extracts from six species of young pine trees. The extracts were prepared from Section Pinus (Diploxylon): P. densiflora, P. sylvestris, P. pinaster and P. pinea, and Section Strobus (Haploxylon): P. koraiensis and P. strobus. Phenolics were extracted from pine needles with 80% acetone to obtain the soluble free fraction, and insoluble residues were digested with 4 M NaOH to obtain bound ethyl acetate and bound water fractions. Phenolics were analyzed by HPLC, and the hydrophilic antioxidant activity was measured using oxygen radical absorbance capacity (ORAC). Total phenolic and flavonoid contents of the soluble free fraction were higher than those of the bound ethyl acetate and bound water fractions. The main phenolics were monomers and polymers of PAs in the soluble free fraction, and phenolic acids and flavonol glycosides in bound ethyl acetate fraction. Flavonol glycosides found in different species of pine needles were qualitatively similar within fractions, but composition varied among Pinus sections. High levels of kaempferol arabinoside and an unknown compound were present in all Strobus species. The soluble free fraction had the highest antioxidant activity, followed by bound ethyl acetate and bound water fractions.
Leukotriene $B_4\;(LTB_4)$ is a pro-inflammatory mediator synthesized in myeloid cells from arachidonic acid. Elevated levels of $LTB_4$ have been found in a number of inflammatory diseases and levels are related to disease activity in some of these. Because $LTB_4$ interacts with cells through specific cell surface receptors, $LTB_4$ receptor blockade is the most specific approach to reduce the pathogenic role of $LTB_4$. In order to find $LTB_4$ receptor antagonist from plants, we screened the $LTB_4$ receptor antagonistic activity of the methanol extract and solvent fractions of herbal drugs. The ability of samples to inhibit specific binding of $[^3H]-LTB_4$ to human peripheral neutrophils was used as assay to evaluate the antagonistic activity of plant materials. Among the tested methanol extracts of herbal drugs, Mori Radicis Cortex, Perillae Semen, Armeniacae Semen and Sophorae subprostratae Radix showed potent inhibitory activity above 70% at the concentration of $100\;{mu}g/ml$. The inhibitory activities of $LTB_4$ binding to human neutrophils were evaluated for several solvent fractions at three different concentrations. Especially, hexane soluble fractions of Anemarrhenae Rhizoma and Embeliae Radix, and ethyl acetate soluble fractions of Aristolochiae Fructus, Magnoliae Cortex and Zingiberis Rhizoma crudus showed moderate activity at $25\;{mu}g/ml$. These fractions were promising candidates for the study of the activity-guided chromatographic purification of active compounds. Silica gel column chromatography of hexane soluble fractions of Anemarrhenae Rhizoma and Embeliae Radix gave very active sub-fractions, AA-4 and ES-4, and their inhibition activities of $LTB_4$ binding to human neutrophil at $30\;{mu}g/ml$ were 78% and 62%, respectively. From these results we could anticipate new $LTB_4$ receptor antagonist from herbal drugs, and the block of $LTB_4$ effects may provide beneficial in neutrophil mediated diseases such as inflammation and bronchial asthma.
Uremia is associated with defective protein binding of weakly acidic drugs, whereas the protein binding of basic drugs tends to be normal. The exact chemical nature of compound(s) and mechanism for these changes as yet is unknown, and has not been defined. Organic solvent extraction of pooled normal human urine following hydrolysis by hydrochloric acid produced an extract, which when added to normal human serum, was capable of inducing binding defects similar to those in uremia. Binding defects were observed with the weakly acidic drugs such as nafcillin, salicylate, sulfamethoxazole and phenytoin while the binding of the basic drugs such as trimethoprim and quinidine were unaffected. The binding defects induced by the hydrolyzed urine extract could readily be corrected by same organic solvent extraction of acidified serum and the defects could be transferred to the normal human serum using the organic solvent layer at the physiologic pH (7.4). Followed by reacidification ind extraction of the binding defects induced serum with the same solvent, separated several fractions were obtained on thin-layer chromatography. One of these fractions could reinduce the binding defects and this factor(s) is apparently weakly acidic compounds and tightly bound to serum at physiologic pH, but extractable at acidic pH, and its molecular weight range is approximately 500 or less similar to those seen in uremia. These findings strongly support the hypothesis that the drug binding defect in uremia is due to the accumulation of endogenous metabolic products which arc normally excreted by the kidneys but accumulate in renal failure.
본 연구에서는 북극 육상식물인 R. hyperboreus를 유기용매로 추출하여 얻어진 추출물에 대하여 세포내 ROS와 peroxynitrite 소거활성을 측정하였다. 추출물의 유의적인 소거활성을 확인한 후에 구성성분의 극성에 따른 소거효과의 변화를 보기 위하여 용매분획을 실시하여 n-hexane, 85% aq.MeOH, n-BuOH, water 분획물을 얻었다. 각 용매분획의 폴리페놀 함량을 측정하였으며 그 결과 n-hexane, water, 85% aq.MeOH, n-BuOH 분획의 순서대로 폴리페놀 함량이 증가하였다. 각 용매분획에 대한 항산화 활성을 검색한 결과 n-hexane 분획의 경우에는 세포생존율에 기인한 어느 정도의 활성변화는 있었으나 대체적으로 소거 활성은 폴리페놀 함량에 비례하였다. 폴리페놀 함량이 가장 높은 n-BuOH 분획물이 가장 좋은 항산화활성을 나타내었으며 그 다음 번째로 폴리페놀 함량이 높은 85% aq.MeOH 분획물이 두 번째로 좋은 항산화활성을 나타내었다.
The purpose of this study was to investigate the antioxidant activity and tyrosinase inhibitory activity of Codonopsis lanceolata 50% ethanol extract, and its solvent fractions (n-hexane, ethyl acetate (EA), n-butanol, water). The main components of the EA fraction were qualitatively analyzed using UPLC Q-ToF/MS. Additionally, a quantitative analysis was performed using UPLC. As a result, the total polyphenol content was 113.36 mg gallic acid/g in the EA fraction, which contained the largest amount of the C. lancolata solvent fractions. Also EA showed the highest antioxidant activity than other fractions. The IC50 of DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical scavenging activity was 0.03 mg/mL and the IC50 of ABTS [2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)] radical scavenging activity was 0.049 mg/mL. The EA fraction showed tyrosinase inhibitory activity than other fractions and especially inhibited monophenolase oxidase reaction higher than diphenolase oxidase reaction. The monophenolase oxidase inhibited 55% when the concentration of the EA fraction was 0.25 mg/mL. As a result of Q-ToF/MS analysis, it was confirmed that tangshenoside I and lobetyolin were the main components of EA fraction. Thus, these results suggest that C. lanceolata may be used as a potent source of cosmetic agents.
오죽 잎의 메탄올 조추출물을 극성에 따라 용매분획하고 분획물의 항산화 활성과 항산화 활성, S. aureus 균주에 대한 항균활성을 조사하고 활성성분을 HPLC를 이용하여 정량하였다. 용매분획물 중에서 ethyl acetate 분획물의 DPPH radical 소거 활성, FRAP활성이 모두 가장 강하였으며, 총페놀성 화합물의 함량도 가장 높았다. S. aureus 균주에 대한 항균활성 역시 ethyl acetate 분획물이 모든 시험 농도에서 가장 높은 활성을 보였다. Ethyl acetate 분획물 중에서 caffeic acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol 성분을 분리하여 정량하였으며 이 중 kaempferol의 함량이 가장 높았다. 오죽 잎의 ethyl acetate 분획물은 천연 식품보존료로서 활용이 가능할 것으로 보인다.
Phloroglucinol 단위체로 구성된 Oligomeric polyphenol인 Phlorotannins을 갈조류의 일종인 감태(Ecklonia cava)의 메탄올 추출물의 용매 분획으로부터 분리하였다. 산화스트레스에 대한 감태추출물의 용매분획으로부터 Phlorotannins의 억제효능을 주름형성과 연관성이 있는 사람피부섬유아세포(HDFs)에서 조사되었다. ESR spectroscopy 분석에서, 감태의 에틸아세테이트 분획으로 부터의 Phlorotannins에서 DPPH radical, Hydroxyl radical 및 Alkyl radical에 대하여 가장 높은 소거효능이 나타났다. 2',7'-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA)와 Diphenyl-1-pyrenylphosphine (DPPP)을 이용하여 세포내에서 활성산소종 및 지질과산화 수준을 측정하였다. 감태의 다른 용매 분획과 비교하여 에틸아세테이트 용매분획으로 부터의 Pphlorotannins의 존재에서 이들수준이 유의성 있게 감소되었다 (P < 0.01). 더욱이, Phlorotannins은 세포내의 Glutathione (GSH) 함량도 시간에 따라 증가시켰다. 그러므로, 이러한 결과들은 감태의 Phlorotannins이 산화적 스트레스와 연관성이 있는 주름형성 같은 여러가지 질환의 예방 및 치료에 잠재적인 효능이 있다는 것을 암시하고 있다.
The physiologically relevant functional properties of various solvent extracts from Salicornia herbacea leaves were investigated by measuring lipid peroxidation, DPPH radical scavenging, nitrite scavenging, and xanthine oxidase inhibition. Ethyl ether, chloroform, ethyl acetate and n-butanol fractions obtained from the 80% aqueous ethanol extracts of Salicornia herbacea leaves showed strong antioxidative activities in linoleic acid methyl esters. Peroxide values (POV) were not significantly different among the samples treated with the different fractions; the incubation time required to reach a peroxide value of 80 meq/kg was about 40 hrs. However, control linoleic acid methyl esters had POV of more than 480 meq/kg after 40 hrs. The DPPH radical scavenging activity of the ethyl acetate fraction was much more effective than diethyl ether, n-butanol, chloroform and water fractions, with an $IC_{50}$/ of 279 $\mu\textrm{g}$/mL, but less effective than ascorbic acid ($IC_{50}$/ : 67 $\mu\textrm{g}$/mL). The nitrite scavenging activities of all fractions increased as pH decreased. Among the fractions, nitrite scavenging activities of diethyl ether and ethyl acetate fractions at pH 1.2 were highest at 59.0 and 56.2%, respectively. The diethyl ether fraction obtained from the 80% aqueous ethanol extract of Salicornia herbacea loaves was the most effective inhibitor of xanthine oxidase of all the solvent extracts at 84% inhibition for a 1 mg/mL concentration. These results suggest that Salicornia herbacea leaf extracts may be effective antioxidants, not only in food stability, but also in human health.
An 80% EtOH extract and the solvent fractions of the seeds of Cornus officinalis were evaluated for their inhibitory activities against advanced glycation end products (AGEs) formation and AGEs-induced protein cross-linking in vitro. In vitro assay for AGEs-bovine serum albumin (BSA) formation showed that the 80% EtOH extract, n-hexane, EtOAc, n-BuOH and water fractions significantly inhibited AGEs formation with observed $IC_{50}$ values of 1.13, 17.64, 1.52, 1.24 and $3.27{\mu}g/ml$, respectively. In indirect AGEs-ELISA assay, the 800% EtOH extract, EtOAc and n-BuOH fractions exhibited more potent inhibitory activity on AGEs-BSA formation than aminoguanidine, a well know AGEs inhibitor. Furthermore, the 80% EtOH extract and all the solvent fractions inhibited concentration-dependently AGE-BSA cross-linking to collagen. The 80% EtOH extract, EtOAc, n-BuOH and water fractions also had a breaking activity against preformed AGE-BSA cross-linking concentration dependently. Thus these results suggest that the 80% EtOH extract and fractions of the seeds of C. officinalis could be an inhibitor as well as breaker of AGE-BSA cross-linking.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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