12일간 배양한 계배에서 떼어낸 근모세포에 자외선을 조사하면 근육 분화에 심한 변화를 유발시킬수 있다. 본 연구에서는 자외선이 세포분열 및 근섬유로의 전환, 근모세포와 근섬유의 형태에 미치는 영향을 조사하였다. 자외선을 받은 세포들은 크기가 작아지고 또 적은 수의 세포들이 근섬유 형성에 참여하기 때문에 근섬유의 직경이 좁아지고 길이 또한 작아진다. 자외선이 세포분열과 세포의 융합에 미치는 영향은 배양을 시작한 후 이른 시기에 조사할수록 그 효과가 크다. 또한 자외선의 양을 증가시키면 그 효과가 커져 지나친 양을 조사하면 세포에 치사작용을 나타낸다. 따라서 자외선에 의한 세포 밀도의 감소가 근섬유 형성의 저하를 초래하는 것으로 사료되어 이에 본 연구와 타 실험실에서 얻은 정보를 바탕으로 세포 융합 능력 감소의 원인에 대하여 토의하였다.
The effect of ginseng saponin on chick embryonic dorsal root ganglia organ culture and brain, spinal cord, muscle dissociation cultures was studied. The fiber outgrowth in explanted chick embryonic dorsal root ganglia was markedly induced by water and alcohol extracts of ginseng, total ginseng saponin, protopanaxadiol and protopanaxatriol glycosides as well as ginsenosides R/sub b1/, R/sub d/, R/sub 0/+R/sub a/+R/sub b1/, and R/sub b2/+R/sub c/+R/sub e/ mixtures. The life span of the cultured chick embryonic dorsal root ganglia and potentiation of nerve cell density were also observed with all of these ginseng saponins. The effect of ginseng saponin on chick embryonic dorsal root ganglia organ culture was more marked in the absence of the chick embryonic extract which was known to contain nerve growth factor-like material in the culture media. However, the ginseng saponin did not influence the cultured central nervous system such as brain and spinal cord cells and cultured skeletal muscle cells with respect to the morphological changes, maturation and life span of these cells.
Objectives : The purpose of this study was to investigate inhibitory effects of steamed Polygonatum odoratum extract (POE) on insulin resistance in rat skeletal muscle cells, L6 cells.Methods : Polygonatum odoratum (P. odoratum) extract was extracted with ethyl acetate. Activity of α-glucosidase in POE was measured for blood glucose regulation. MTT assay was examined for cell toxicity. Western blot analysis for measurement of adiponectine, peroxisome proliferator-activated receptorγ (PPARγ), insulin receptor substrate (IRS), glucose transporter 4 (Glut-4) and phosphorylation of serine/threonine-specific protein kinase (Akt) expressions were performed. Akt signaling pathway were analyzed with LY294002, which is a specific PI3K/Akt inhibitor.Results : The results revealed that POE inhibited α-glucosidase activity. Treatment of POE in L6 cells inhibited the differentiation of L6 cells compared to those of vehicl control. Additionally, protein expressions of adiponectine, PPARγ, IRS and Glut-4 were significantly regulated compared to those of vehicle control (p < 0.05), respectively. Futhermore, phosphorylation of Akt was increased in L6 cells treated with POE compared to that of vehicle control (p < 0.05). pAkt expression was significantly accentuated with Akt inhibitor (LY294002).Conclusions : These results suggest that POE may have potential as a natural agent for prevention/improvement of diabetes, especially, regulation of blood glucose. Therefore, further additional study should be conducted to elucidate in depth the pharmaceutical efficacy of these.
Effects of dammarane glycosides of Panax ginseng on primary cultured chicken embryonic skeletal muscle cells were studied by microscopic observation and determination of the activity of acetylcholinesterase. Muscle cells were prepared from the breast of 12-day-old chicken embryo and cultured with either a medium consisted of 87.5% Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), 10% horse serum and 2.5% chicken embryonic extract or a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum. It was observed that dammarane glycosides of Panax ginseng seemed to show the tendency to stimulate the growth and the differentiation of the muscle cells cultured with a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum under microscopic observation. The activity of acetylcholinesterase in the muscle cells cultured with a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum was increased by dammarane glycosides of Panax ginseng.
The fine structural characteristics of cardiac muscle cells and its myofibril organization in the orb web spider N. clavata were examined by transmission electron microscopy. Although myofibril striations are not remarkable as those of skeletal muscles, muscle fibers contain multiple myofibrils, abundant mitochondria, extensive sarcoplasmic reticulum and transverse tubules (T-tubules). Myofibrils are divided into distinct sarcomeres defined by Z-lines with average length of 2.0 ㎛, but the distinction between the A-band and the I-bands is not clear due to uniform striations over the length of the sarcomeres. Dyadic junction which consisted of a single T-tubule paired with a terminal cisterna of the sarcoplasmic reticulum is found mainly at the A-I level of sarcomere. Each cell is arranged to form multiple connections with neighboring cells through the intercalated discs. These specialized junctions include three types of intercellular junctions: gap junctions, fascia adherens and desmosomes for heart function. Our transmission electron microscopy (TEM) observations clearly show that spider's cardiac muscle contraction is controlled by neurogenic rather than myogenic mechanism since each cardiac muscle fiber is innervated by a branch of motor neuron through neuromuscular junctions.
Low intensity laser irradiation is potential physical agent that triggers the muscle regeneration by previous study. In muscle regeneration, a number of growth factors also promotes that is triggered in response to muscle damage. The transforming growth factor(TGF)-$\beta$ is involved in the activation of cell proliferation and the inhibition of cell differentiation in muscle regeneration. This is secreted not only autocrine system but also paracrine and endocrine. Therefore, We investigated that effects of Gallium aluminum arsenide(GaAlAs) diode laser for the expression of TGF-$\beta$ on lumbar spinal cord after extensor digitorum muscle crush injury. After laser irradiation, the immunoreactivity of TGF-$\beta$ was increased bilaterally in gray mater of spinal cord. Especially, in 1 day, experimental group was highed than control, and in 3 day, lateral motor nucleus were storong immunoreactivy of TGF-$\beta$. Also, in 1 and 2 day, TGF-$\beta$ was showed in white mater as well as gray mater, but in 3 day, only showed in gray mater. These data may suggests to the establishment of laser irradiation on spinal cord for skeletal muscle injury.
Despite increased evidence of bio-activity following far-infrared (FIR) radiation, susceptibility of cell signaling to FIR radiation-induced homeostasis is poorly understood. To observe the effects of FIR radiation, FIR-radiated materials-coated fabric was put on experimental rats or applied to L6 cells, and microarray analysis, quantitative real-time polymerase chain reaction, and wound healing assays were performed. Microarray analysis revealed that messenger RNA expressions of rat muscle were stimulated by FIR radiation in a dose-dependent manner in amount of 10% and 30% materials-coated. In 30% group, 1,473 differentially expressed genes were identified (fold change [FC] > 1.5), and 218 genes were significantly regulated (FC > 1.5 and p < 0.05). Microarray analysis showed that extracellular matrix (ECM)-receptor interaction, focal adhesion, and cell migration-related pathways were significantly stimulated in rat muscle. ECM and platelet-derived growth factor (PDGF)-mediated cell migration-related genes were increased. And, results showed that the relative gene expression of actin beta was increased. FIR radiation also stimulated actin subunit and actin-related genes. We observed that wound healing was certainly promoted by FIR radiation over 48 h in L6 cells. Therefore, we suggest that FIR radiation can penetrate the body and stimulate PDGF-mediated cell migration through ECM-integrin signaling in rats.
Myogenic satellite cells have been isolated and identified by several recently elucidated molecular markers. Furthermore, knowledge about the precise function of these markers has provided insight into the early and terminal events of satellite cells during proliferation, differentiation, transdifferentiation, specification and activation. Recently, quiescent myogenic satellite cells have been associated with possession of Pax 3 and 7 that represent pluripotent stem cells capable of differentiating into other lineages. However, the mechanism by which myogenic satellite cells attain pluripotent potential remain elusive. Later, transdifferentiating ability of these cells to another lineage in the absence or presence of certain growth factor/ or agents has revolutionized the scope of these pluripotent myogenic satellite cells for manipulation of animal production (in terms of quality and quantity of muscle protein) and health (in terms of repair of skeletal muscle, cartilage or bone).
Williams, J. Koudy;Mariya, Silmi;Suparto, Irma;Lankford, Shannon S.;Andersson, Karl-Erik
International Neurourology Journal
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제22권4호
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pp.260-267
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2018
Purpose: A major question remaining in approaches to tissue engineering and organ replacement is the role of native mobilized native cells in the regeneration process of damaged tissues and organs. The goal of this study was to compare the cell mobilizing effects of the chemokine CXCL12 and cell therapy on the urinary sphincter of nonhuman primates (NHP) with chronic intrinsic urinary sphincter dysfunction. Methods: Either autologous lenti-M-cherry labeled skeletal muscle precursor cells (skMPCs) or CXCL12 were injected directly into the sphincter complex of female NHPs with or without surgery-induced chronic urinary sphincter dysfunction (n=4/treatment condition). All monkeys had partial bone marrow transplantation with autologous lenti-green fluorescent protein (GFP) bone marrow cells prior to treatment. Labeled cells were identified, characterized and quantified using computer-assisted immunohistochemistry 6 months posttreatment. Results: GFP-labeled bone marrow cells (BMCs) were identified in the bone marrow and both BMCs and skMPCs were found in the urinary sphincter at 6-month postinjection. BMCs and skMPCs were present in the striated muscle, smooth muscle, and lamina propria/urothelium of the sphincter tissue. Sphincter injury increased the sphincter content of BMCs when analyzed 6-month postinjection. CXCL12 treatment, but not skMPCs, increased the number of BMCs in all layers of the sphincter complex (P<0.05). CXCL12 only modestly (P=0.15) increased the number of skMPCs in the sphincter complex. Conclusions: This dual labeling methodology now provides us with the tools to measure the relative number of locally injected cells versus bone marrow transplanted cells. The results of this study suggest that CXCL12 promotes mobilization of cells to the sphincter, which may contribute more to sphincter regeneration than injected cells.
Muscle atrophy is characterized by a decrease in the mass of the muscle. With an increase in life expectancy and chronic illnesses, the incidence of muscle atrophy is increasing and the quality of life of patients is decreasing. Thus, reducing muscle atrophy is of high clinical and socio-economic importance. Mistletoe is a semi-parasitic plant that has been used as a traditional medicine in many countries to treat various human illnesses. It has been reported that Korean mistletoe extract (KME) has diverse biological functions including anti-tumor, anti-oxidant, anti-diabetic, anti-obesity properties, and extension of lifespan. Especially, we have recently reported that KME improves exercise endurance in mice, indicating its beneficial roles in enhancing the capacity of skeletal muscle. In this study, we investigated whether KME could activate the signaling pathway related to protein synthesis in a mouse model of muscle atrophy. Interestingly, KME efficiently activated the Akt/mTOR pathway, and Akt and mTOR are important signaling hub molecules for the acceleration of protein synthesis in muscle cells. In addition, KME also increased the activity of S6 kinase which is involved in the regulation of muscle cell size. Moreover, the ERK activity, required for transcription of ribosomal RNA for protein synthesis, was also enhanced in KME-treated mouse muscle. These data support the idea that KME increases muscle mass via increased protein synthesis. Our findings also suggest that Korean mistletoe might be a promising candidate for the development of functional foods that are beneficial for preventing muscle atrophy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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