Horticulture, Environment, and Biotechnology : HEB
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제59권6호
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pp.889-897
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2018
Currently, there is a lack of genetic markers capable of effectively detecting polymorphisms in Clematis. Therefore, we developed new markers to investigate inter- and intraspecific diversity in Clematis. Based on the complete chloroplast genome of Clematis terniflora, simple sequence repeats were explored and primer pairs were designed for all ten adequate repeat regions (cpSSRs), which were tested in 43 individuals of 11 Clematis species. In addition, the nuclear ITS region was sequenced in 11 Clematis species. Seven cpSSR loci were found to be polymorphic in the genus and serve as markers that can distinguish different species and be used in different genetic analyses, including cultivar identification to assist the breeding of new ornamental cultivars.
Sixteen microsatellite markers (simple sequence repeat (SSR) markers) were employed to examine the genetic stability of 27 randomly chosen date palm (Phoenix dactylifera L.) plants produced through somatic embryogenesis with upto forty two in vitro subcultures. No microsatellite DNA variation was observed among all micropropagated plants. Our results indicate that the micropropagation protocol used for rapid in vitro multiplication is appropriate and suitable for clonal propagation of date palm and corroborated that somatic embryogenesis can also be used as one of the safe modes for production of true-to-type plants of date palm. This is the first report on the use of microsatellite DNA markers to establish the genetic stability in micropropagated date palm plants.
Toll-like receptors (TLRs) play an important role in the recognition of invading pathogens and the modulation of innate immune responses in mammals. The TLR4 and TLR7 are well known to recognize the bacterial lipopolysaccharide (LPS) and single stranded (ssRNA) ligands, respectively and play important role in host defense against Gram-negative bacteria and ssRNA viruses. In the present study, coding exon fragments of these two TLRs were identified, cloned, sequenced and analyzed in terms of insertion-deletion polymorphism, within bovine TLRs 4 and 7, thereby facilitating future TLR signaling and association studies relevant to bovine innate immunity. Comparative sequence analysis of TLR 4 exons revealed that this gene is more variable, particularly the coding frame (E3P1), while other parts showed percent identity of 95.7% to 100% at nucleotide and amino acid level, respectivley with other Bos indicus and Bos taurus breeds from different parts of the world. In comparison to TLR4, sequence analysis of TLR7 showed more conservation among different B. indicus and B. taurus breeds, except single point mutation at 324 nucleotide position (AAA to AAM) altering a single amino acid at 108 position (K to X). Percent identity of TLR7 sequences (all 3 exons) was between 99.2% to 100% at nucleotide and amino acid level, when compared with available sequence database of B. indicus and B. taurus. Simple Modular Architecture Research Tool (SMART) analysis showed variations in the exon fragments located in the Leucine Rich Repeat (LRR) region, which is responsible for binding with the microbial associated molecular patterns and further, downstream signaling to initiate anti-microbial response. Considering importance of TLR polymorphism in terms of innate immunity, further research is warranted.
ISSR마크를 사용하여 고려 인삼의 품종 및 계통간 분자적 인증과 유전적 다형현상을 조사하였다. 56개의 ISSR 프라이머 중 5개가 일곱 품종 및 계통간 명확하고 재현성이 높은 DNA분절을 나타내는 최적 프라이머로 선택되었다. 전체 43밴드는 250 bp - 1,700 bp의 분자량을 가지며 프라이머당 8.6개의 밴드를 나타내었다. 고려 인삼에서 다형현상 정도는 20.9%였다. 특히 천풍 품종이 가장 높은 다형현상을 나타낸 반면 다른 품종은 거의 다형현상을 나타내지 않았다. 결론적으로 DNA수준에서 ISSR마크로 천풍이 다른 고려 인삼의 품종 및 계통인 연풍, 황숙종, 자경종과 구분에 이용될 수 있음이 판명되었다.
Background : Plant breeding requires the collection of genetically diverse genetic resources. Studies on the characteristics of Platycodon grandiflorum resources have not been carried out so far. The present study was carried out to discriminate P. grandiflorum based on morphological characteristics and genetic diversity using simple sequence repeat (SSR) markers. Methods and Results :We collected 11 P. grandiflorum cultivars: Maries II, Hakone double white, Hakone double blue, Fuji white, Fuji pink, Fuji blue, Astra white, Astra pink, Astra blue, Astra semi-double blue and Jangbaek. Analyses of the morphological characteristics of the collection were conducted for aerial parts (flower, stem and leaf) and underground parts (root). Next, the genetic diversity of all P. grandiflorum resources was analyzed using SSR markers employing the DNA fragment analysis method. We determined that the 11 P. grandiflorum cultivars analyzed could be classified by plant length, leaf number and root characteristic. Based on the genetic diversity analysis, these cultivars were classified into four distinct groups. Conclusions : These findings could be used for further research on cultivar development using molecular breeding techniques and for conservation of the genetic diversity of P. grandiflorum. Moreover, the markers could be used for genetic mapping of the plant and marker-assisted selection for crop breeding.
Choi, Ki-Young;Park, Duck Hwan;Seong, Eun-Soo;Lee, Sang Woo;Hang, Jin;Yi, Li Wan;Kim, Jong-Hwa;Na, Jong-Kuk
Journal of Plant Biotechnology
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제46권4호
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pp.274-281
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2019
Pistacia chinensis Bunge has not only been used as a medicinal plant to treat various illnesses but its young shoots and leaves have also been used as vegetables. In addition, P. chinensis is used as a rootstock for Pistacia vera (pistachio). Here, the transcriptome of P. chinensis was sequenced to enrich genetic resources and identify secondary metabolite biosynthetic pathways using Illumina RNA-seq methods. De novo assembly resulted in 18,524 unigenes with an average length of 873 bp from 19 million RNA-seq reads. A Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) annotation tool assigned KO (KEGG orthology) numbers to 6,553 (36.2%) unigenes, among which 4,061 unigenes were mapped into 391 different metabolic pathways. For terpenoid backbone and carotenoid biosynthesis pathways, 44 and 22 unigenes encode enzymes corresponding to 30 and 16 entries, respectively. Twenty-two unigenes encode proteins for 16 entries of the carotenoid biosynthesis pathway. As for the phenylpropanoid and flavonoid biosynthesis pathways, 63 and 24 unigenes were homologous to 17 and 14 entry proteins, respectively. Mining of simple sequence repeat identified 2,599 simple sequence repeats from P. chinensis unigenes. The results of the present study provide a valuable resource for in-depth studies on comparative and functional genomics to unravel the underlying mechanisms of the medicinal properties of Pistacia L.
An, Hyejin;Park, Jong-Hyun;Hong, Chi Eun;Raveendar, Sebastin;Lee, Yi;Jo, Ick-Hyun;Chung, Jong-Wook
Journal of Plant Biotechnology
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제44권3호
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pp.312-319
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2017
The need to preserve and use plant genetic resources is widely recognized, and the prospect of dwindling plant genetic diversity, coupled with increased demands on these resources, has made them a topic of global discussion. In the present study, the genetic diversity and population structure of 73 ginseng accessions collected from six regions in China were analyzed using eight simple sequence repeat (SSR) markers. Major allele frequencies ranged between 0.38 ~ 0.78, with a mean allele frequency value of 0.571. The number of alleles discovered ranged from 3 to 10 per accession, with a mean number of 7; 56 alleles were discovered in total. Gene diversity (GD) and polymorphic information content (PIC) values were similar to each other, and they ranged from 0.36 ~ 0.77 (mean 0.588) and 0.33 ~ 0.74 (mean 0.548), respectively. Accessions were divided into three clusters based on their phylogenetic relationships and genetic similarities, and although the populations were similar, they were not classified according to the region. Regional genetic diversity was also similar, with slight differences observed based on the number of accessions per region. It is expected that the findings of the present study can provide basic data for future studies on ginseng genetic diversity and for breeding ginseng cultivars.
Eucalyptus is one of the major plantation species with wide variety of industrial uses. Polymorphic and informative simple sequence repeats (SSRs) have broad range of applications in genetic analysis. In this study, two individuals of Eucalyptus tereticornis (ET217 and ET86), one individual each from E. camaldulensis (EC17) and E. grandis (EG9) were subjected to whole genome resequencing. Low coverage (10×) genome sequencing was used to find polymorphic SSRs between the individuals. Average number of SSR loci identified was 95,513 and the density of SSRs per Mb was from 157.39 in EG9 to 155.08 in EC17. Among all the SSRs detected, the most abundant repeat motifs were di-nucleotide (59.6%-62.5%), followed by tri- (23.7%-27.2%), tetra- (5.2%-5.6%), penta- (5.0%-5.3%), and hexa-nucleotide (2.7%-2.9%). The predominant SSR motif units were AG/CT and AAG/TTC. Computational genome analysis predicted the SSR length variations between the individuals and identified the gene functions of SSR containing sequences. Selected subset of polymorphic markers was validated in a full-sib family of eucalypts. Additionally, genome-wide characterization of single nucleotide polymorphisms, InDels and transcriptional regulators were carried out. These variations will find their utility in genome-wide association studies as well as understanding of molecular mechanisms involved in key economic traits. The genomic resources generated in this study would provide an impetus to integrate genomics in marker-trait associations and breeding of tropical eucalypts.
총 20개의 감 SSR primer set을 사용하여 완전단감(PCNA) 12품종, 불완전단감(PVNA) 13품종, 불완전 떫은감(PVA) 15품종, 완전 떫은감(PCA) 8품종 등, 총 48개 유전자원의 유전적 연관성을 분석하였다. 획득된 114개의 다형성 밴드를 이용하여 UPGMA 방식으로 유사도 및 집괴분석을 수행한 결과 48개 품종들은 크게 2개의 그룹(cluster)으로 나뉘어졌으며, 제 1 cluster는 다시 4개의 subcluster를 형성하였다. 이는 탈삽의 특성을 기준으로 분류한 품종군과 대체로 일치 함을 알 수 있고, 품종군간의 유연관계에 있어서는 완전단감군은 불완전 단감군과, 그리고 완전 떫은감은 불완전 떫은감군과 유연관계가 더욱 높은 것으로 관찰되었다. 평균 유사도의 값은 0.499였고 품종간 가장 높은 유사도 값(0.954)를 나타낸 것은 '청도반시'와 '함안반시'였고, 가장 낮은 유사도 값(0.192)를 나타낸 것은 '대마반'과 '애탕'이었다. 본 연구에 사용된 2SSR primer 들은 유럽 감품종으로부터 개발되어 보고되었지만, 일본 및 국내 품종의 연구에서도 효과적으로 사용될 수 있었고, 이들 마커들을 통해, 48개 품종 중 청도반시(Cheongdo-Bansi)와 경산반시(Gyeongsan-Bansi)를 제외한 모든 품종간 구별이 가능하였다. 이는 향후 신품종 개발시 품종보호를 위한 품종 특이적 마커로 효율적으로 사용될 수 있음을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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