핵심 microsatellite 마커를 활용하여 우리나라에서 품종보호출원 및 등록된 콩 148 품종에 대한 DNA 프로파일 데이터베이스를 구축한 다음 유전적 유사도 분석을 통한 품종 식별력 정도를 조사하였다. 콩 148품종을 120개의 microsatellite 마커로 검정하고 밴드의 패턴이 명확하고 다형성 정도가 높은 핵심 마커 16개의 대립유전자의 수는 6 ~ 28개로 나타났고 평균 대립유전자의 수는 12.75개였다. PIC 값은 0.753 ~ 0.951 사이에 분포하였고 평균값은 0.863으로 아주 높았다. 콩 148 품종에 대하여 Jaccard 방법에 따라 유전적 유사도를 설정한 다음 비가중 산술평균결합에 의해 집괴분석하여 계통도를 작성하였을 때, 콩의 품종 유형 및 품종 육성 계보에 따라 5개의 대그룹으로 나누어졌으며 모든 품종이 식별이 가능하였다. 본 연구에서 콩 품종식별용 핵심 microsatellite는 품종보호출원 품종의 구별성, 균일성, 안정성의 확인, 품종진 위성과 관련된 종자분쟁, 종자 순도 관리에 매우 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
Sixteen genomic DNA simple sequence repeat (SSR) markers of Lentinula edodes were developed from 205 SSR motifs present in 46.1-Mb long L. edodes genome sequences. The number of alleles ranged from 3-14 and the major allele frequency was distributed from 0.17-0.96. The values of observed and expected heterozygosity ranged from 0.00-0.76 and 0.07-0.90, respectively. The polymorphic information content value ranged from 0.07-0.89. A dendrogram, based on 16 SSR markers clustered by the paired hierarchical clustering' method, showed that 33 shiitake cultivars could be divided into three major groups and successfully identified. These SSR markers will contribute to the efficient breeding of this species by providing diversity in shiitake varieties. Furthermore, the genomic information covered by the markers can provide a valuable resource for genetic linkage map construction, molecular mapping, and marker-assisted selection in the shiitake mushroom.
Morphologically, nine different slow-growing protoclones were screened from regenerated protoplasts of heterokaryotic Agaricus bisporus. As such, the present study is the first report on differentiating homo- and heterokaryotic protoclones using random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter-simple sequence repeat (ISSR) markers. Among 80 primers tested, the seven ISSR and seven RAPD primers selected for the analysis generated a total of 94 ISSR and 52 RAPD fragments, respectively. The ISSR fingerprinting also detected more polymorphic loci (38.29%) than the RAPD fingerprinting (34.61%). A principal coordinate analysis (PCA) was employed to evaluate the resolving power of the markers as regards differentiating protoclones. As a result, the mean polymorphism information content (PIC) for each marker system (i.e., 0.787 for RAPD and 0.916 for ISSR) suggested that ISSR is more effective for determining polymorphisms. The dendrograms constructed using RAPD, ISSR, and an integrated RAPD and ISSR marker system were highly correlated with one another as revealed by a high Mantel correlation (r= 0.98). The pairwise similarity index values also ranged from 0.64 to 0.95 (RAPD), 0.67 to 0.98 (ISSR), and 0.67 to 0.98 (RAPD and ISSR), whereas the mean similarity index values of 0.82, 0.81, and 0.84 were obtained for the RAPD, ISSR, and combined data, respectively. As there was a good correspondence between the RAPD and ISSR similarity matrices, ISSR would appear to be an effective alternative to RAPD in the genetic diversity assessment and accurate differentiation of homo- and heterokaryotic protoclones of A. bisporus.
Information on the patterns of genetic diversity and population structure is essential for the rational use and efficient management of germplasms; accurate information aids in monitoring germplasms, and can also be used to predict potential genetic gains. In this study, we assessed genetic diversity, focusing on Korean rice accessions for theand their sustainable conserved diversity. Using DNA profiling with 12 simple sequence repeat (SSR) markers, we detected a total of 333 alleles among 2,016 accessions. The number of alleles ranged from 21 to 53, with an average of 27.8. Average polymorphism information content was 0.797, with the lowest being 0.667 and the highest 0.940. CA cluster analysis and the model-based population structure revealed two main groups that could be subdivided into five subgroups. Analysis of the molecular variance study based on the SSR profile data showed 5% variance among the profiles, whereas we recorded 93% variance among individuals and 2% variance within individuals. Specifically, the utilized diversity for of the breeding program is restricted in that cultivars were located in limited clades. These results revealed that preserving the diversity of Korean landraces could be useful sources for breeding new rice cultivars, and cwould be the basis for the sustainable conservation and utilization of a Korean rice germplasm.
Allium속에 포함된 6종의 122점을 수집하고, 이 종들의 유전적 관계는 ISSR 마커를 이용하여 확인하였다. 형태적 분석은 6개의 양적 형질을 측정하고 1개의 질적 형질은 수치화하였다. SSR 분석은 17개의 primer를 사용하여 총 370개의 다형성 밴드를 얻었다. 형태적 특성 분석은 유전적 거리로 구분할 경우 3개의 그룹으로 분류되었으나, 부분적으로 몇 몇 종들은 분류에 어려움이 있었다. ISSR 결과를 바탕으로 Allium 속의 군집분석은 5개의 그룹으로 분리되었다. 형태적 분석과 SSR분석 간의 상관 관계는 유의성이 매우 낮았다(r = 0.036). 따라서 본 연구에서 개발한 ISSR 마커는 달래와 산달래의 분류와 교배 육종에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
Shim, Kyu-Chan;Luong, Ngoc Ha;Kim, Sun Ha;Jeon, Yun-A;Lu, Xin;Ahn, Sang-Nag
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.23-23
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2017
Rice (Oryza sativa L.) is the world's most important cereal crop. In crop plant, chlorophyll content and leaf senescence could affect grain filling and yield. We analyzed a QTL associated with chlorophyll content and delayed leaf senescence using high chlorophyll near isogenic line (HC-NIL). HC-NIL derived from a cross between Oryza sativa cv. Hwaseong as a recurrent parent and wild species O. grandiglumis as a donor parent showed higher chlorophyll content than Hwaseong. To identify QTL associated with chlorophyll content, 58 $F_3$ and 38 $F_4$ lines were developed from a cross between HC-NIL and Hwaseong. For QTL analysis, simple sequence repeat (SSR) markers were used for genotyping and one-way ANOVA was conducted. A QTL for chlorophyll content (qCC2) was detected in chromosome 2 and explained 24.63% of phenotypic variation. The senescence effect of the qCC2 was examined in dark-induced incubation (DII). Detached leaves from Hwaseong and HC-NIL were incubated on 3mM MES buffer (pH 5.8) at $27^{\circ}C$ under complete dark condition. After 3 days of incubation, the Hwaseong leaves turned yellow, but the HC-NIL leaves were green. HC-NIL has higher chlorophyll content with delayed senescence than Hwaseong. These results indicated that qCC2 is associated with stay-green phenotype. To know whether the qCC2 is responsible for leaf functionality, ion leakage test and Fv/Fm measurement were performed. Both experiment results showed that differences were observed between Hwaseong and HC-NIL but it was not statistically significant. These results might suggest that the qCC2 is possibly related to chlorophyll content and non-functional stay-green phenotype.
We identified four new bovine tri-nucleotide microsatellite loci and analyzed their sequence structures and genetic parameters in 105 randomly selected Korean cattle (Hanwoo). Allele numbers of the loci B17S0808, B15S6253, B8S7996, and B17S4998 were 10, 11, 12, and 29, respectively. These alleles contained a simple or compound repeat sequences with some variations. Allele distributions of all these loci were in Hardy-Weinberg equilibrium (P > 0.05). Observed heterozygosity and expected heterozygosity ranged from 0.54 (B15S6253) to 0.92 (B17S4998) and from 0.599 (B15S6253) to 0.968 (B17S4998), respectively, and two measures of heterozygosity at each locus were highly correlated. Polymorphism information content (PIC) for these 4 loci ranged from 0.551 (B15S6253) to 0.932 (B17S4998), which means that all these loci are highly informative (PIC > 0.5). Other genetic parameters, power of discrimination (PD) and probability of exclusion (PE) ranged from 0.783 (B15S6253) to 0.984 (B17S4998) and from 0.210 (B15S6253) to 0.782 (B17S4998), respectively. Their combined PD and PE values were 0.9999968 and 0.98005176, respectively. Capillary electrophoresis revealed that average peak height ratio for a stutter was 13.89% at B17S0808, 26.67% at B15S6253, 9.09% at B8S7996, and 43.75% at B17S4998. Although the degree of genetic variability of the locus B15S6253 was relatively low among these four microsatellite markers, their favorable parameters and low peak height ratios for stutters indicate that these four new tri-nucleotide microsatellite loci could be useful multiplex PCR markers for the forensic and population genetic studies in cattle including Korean native breed.
국내에서 육성된 옥수수 90 품종 및 자식 계통에 대하여 microsatellite 마커를 활용하여 DNA 프로파일 데이터베이스를 구축한 다음 공시품종에 따른 유전적 유사도 분석 및 품종식별력 검정에 대한 연구를 수행하였다. 옥수수 90품종을 100개의 microsatellite 마커로 검정하고 대립유전자의 패턴이 우수하고 다형성 정도가 높은 13개를 선정하여 분석하였을 때 대립유전자의 수는 5 ~ 24개까지 다양하게 분포하였고 평균 대립유전자의 수는 13.69개로 높았다. PIC 값의 경우도 0.716 ~ 0.942 범위에 속하였고 평균값은 0.865로 아주 높았다. 옥수수 90품종 및 계통에 대하여 UPGMA 분석에 의한 계통도를 작성하였을 때, 옥수수의 품종 유형 및 품종 육성 계보에 따라 5개의 대그룹으로 나누어졌다. 본 연구에서 구축됨 옥수수 자식계통 및 품종별 microsatellite DNA 프로파일 데이터베이스는 신품종과 기 육성된 품종과 유전적 유사도 분석이 가능하기 때문에 품종보호출원시 대조품종 선정 및 품종진위성과 관련된 종자분쟁에 매우 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
Modern watermelon cultivars (Citrullus lanatus [Thunb.] Matsum.& Nakai var. lanatus) have fruits with diverse phenotypes, including fruit shape, rind patterns, and flesh color. Molecular markers enable efficient selection of plants harboring desirable phenotypes. In the present study, publicly available DNA markers tightly linked to fruit shape, rind stripe pattern, and flesh color were evaluated using 85 watermelon accessions with diverse fruit phenotypes. For fruit shape, the dCAPS SUN - Cla011257 marker revealed an 81% of marker - trait match for accessions with elongated or round fruits. For rind stripe pattern, the SCAR wsb6-11marker was effective for selecting Jubilee-type rind pattern from other rind patterns. For flesh color, the Clcyb.600 and Lcyb markers derived from a mutation in the Lycopene ${\beta}$ - cyclase (Lcyb) gene, were effective at selecting red or yellow flesh. Forty-eight accessions possessing diverse fruit - related traits were selected as a reference array and their genetic relationships assessed using 16 SSR markers. At a coefficient of 0.11, the 48 accessions grouped into two major clades: Clade I and Clade II. Clade I subdivided further into subclades I - 1 and I - 2 at a coefficient of 0.39. All accessions with colored flesh were classified into Clade I, whereas those with white - flesh were classified into Clade II. Differences in fruit traits between subclades I - 1 and I - 2 were observed for rind pattern and fruit color; a majority of the accessions with Crimson-type striped or non-striped rind were grouped together in subclade I - 1, while most accessions in subclade I - 2 had a Jubilee - type rind stripe pattern. These results imply that reference array watermelon accessions possess distinguishable genetic structure based on rind stripe pattern. However, no significant grouping pattern was observed based on other fruit-related traits.
The bean bug Riptortus clavatus Thunberg (Heteroptera: Alydidae) is an important pest, causing serious yield loss in soybean. But the information on mechanism of resistance to R. clavatus is limited. The objective of this study was to identify QTLs for R. clavatus resistance using simple sequence repeat (SSR) markers in a soybean population of recombinant inbred lines (RILs) developed from the cross PI 171451 ${\times}$ Hwaeomputkong. A genetic map from this population was constructed with a total of 136 SSR markers covering 1073.9 cM on 20 linkage groups (LGs). With 126 $F_5$ RILs, two independent QTLs for resistance to R. clavatus were mapped on LGs B1 and C2. The amount of phenotypic variation explained by these QTLs ranged from 12 to 16%. PI 171451 showed an escape response to R. clavatus. Under feeding conditions, 14.4% of RILs showed greater resistance to R. clavatus than the resistant parent. The resistance to R. clavatus in soybean from PI 171451 was incomplete and quantitatively inherited and the QTLs for resistance to R. clavatus detected in the RIL population were not significantly affected by epistatic interactions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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