To obtain basic information on the biochemical property of basidiospores of shiitake mushroom (Lentinula edodes), the ability of producing extracellular enzyme was assessed using a chromogenic plate-based assay. For the aim, amylase, avicelase, $\beta$-glucosidase, CM-cellulase, pectinase, proteinase, and xylanase were tested against monokaryotic strains generated from forty basidiospores of two different parental dikaryotic strains of shiitake mushroom, Sanjo-101Ho and Sanjo-108Ho. These two parental strains showed different degree of extracellular enzyme activity. No identical patterns of the degree of enzyme activity were observed between monokaryotic strains and parental strains of the two shiitake cultivars. The degree of extracellular enzyme activity also varied among monokaryotic strains of the two shiitake cultivars. Our results showed that dikaryotic parental strains of shiitake mushroom produce monokaryotic basidiospores having very diverse biochemical properties.
표고골목 해균인 주홍꼬리버섯을 방제하기 위해 저항성 표고균주 선발을 시도하였다. 저항성 표고균주 선발 시험에서, 사용된 77개 균주 중 67개 균주가 저항력을 가지는 것으로 확인되었다. 이들 67개 균주 중 KFRI 5를 포함한 13개 균주가 주홍꼬리버섯균의 접근을 막는데 가장 큰 영향을 미쳤고 KFRI 180을 포함한 7개 균주가 주홍꼬리버섯의 영역으로 가장 많이 침범했다. 교잡을 통해 만든 31개 균주 중 KFRI 537을 포함한 8개 균주가 주홍꼬리버섯균의 접근을 막는데 가장 큰 영향을 미쳤고 KFRI 545를 포함한 4개 균주가 주홍꼬리버섯의 영역으로 가장 많이 침범했다. 온도와 접종순서의 변화에 따른 각 균주의 저항력 차이를 확인하기 위해 PDA 평판배지와 상수리나무톱밥을 넣은 시험관배지를 사용했다. PDA 평판배지 시험결과, 대부분의 처리구에서 KFRI 137은 주홍꼬리버섯에 대해 뛰어난 접근 억제력을 보였고 KFRI 180은 뛰어난 침범력을 보였다. 교잡균인 KFRI 545, 546, 547은 모균주들인 KFRI 488과 405에 비해 높은 저항력을 보였다. 시험관배지 시험결과, 표고균과 주홍꼬리버섯균이 대치를 하는 시점부터 $25^{\circ}C$에 두었을 때 모든 균주가 높은 저항력을 나타냈다. KFRI 393은 $25^{\circ}C$에서 지속 배양할 때 다른 균주에 비해 높은 저항력을 나타냈다. 또한 모든 균주들에서, $25^{\circ}C$ 배양 후 두 균이 대치를 할 시기에 $14^{\circ}C$로 옮겨 배양한 처리구는 다른 처리구들에 비해 낮은 저항력을 보였다. 이때의 저항력 정도는 각 균주 최고치의 7-20%에 불과했다. 또한 KFRI 259는 PDA 평판배지에서와 달리, 주홍꼬리버섯의 영역을 침범했다.
Trichoderma spp. cause large crop losses of the cultivated shiitake mushroom, Lentinula edodes. We bred several shiitake strains that are resistant to Trichoderma spp. using di-mon mating to establish a useful method for controlling the greenmold disease. We examined the competitive ability of L. edodes against Trichoderma spp. using a dual culture system to select resistant strains. By screening Trichoderma-resistant strains, we found that among 11 parental strains, 4 strains, including KFRI 36, were confirmed resistant strains. They showed especially strong resistance to T. harzianum, which formed deadlock after mycelial contact and then invaded into the territory of T. harzianum. KFRI 171 also showed resistance to T. atroviride strains. Among 13 strains, which were made by hybridization of shiitake strains, 5 were confirmed to be resistant to Trichoderma, including KFRI 58-1. Their resistance was not correlated to the resistant activity of their parents’ strains. Two strains lose resistance and two strains acquire resistance compared to their parents’ strains. In SEM observation, the mycelium of L. edodes at the interaction zone of Lentinula-Trichoderma was rugged and swollen by T. harzianum.
본 연구에서는 원목재배용 표고(Lentinula edodes) 국산 품종에 대한 장흥지역에서 적합한 표고품종 선발을 위해 국내산 총 5개(천백고, 수향고, 백화향, 풍년고, 산조303호) 품종과 일본산 2개(모리290, 모리유지로) 품종을 선택하여 적합품종 선발을 위해 재배시험을 실시하였다. 생산량 조사결과 산조303호가 40.9 kg으로 모리290 39.2 kg, 모리유지로 37.7 kg 보다 우수한 생산량을 보였다. 표고의 품질은 백화향이 갓이 반구형으로 형태가 우수하였으며, 화고형으로 발생하는 특징을 가진 것으로 확인되었다. 기존 재배중인 일본산 품종과 발생특성이 유사하며 생산량이 우수한 산조303호와 고품질의 표고를 생산하는데 유리한 백화향이 장흥지역에서 적합한 국산 표고품종으로 선발하였다.
Kim, Chang-Sun;Park, Myung-Soo;Kim, Seon-Cheol;Maekawa, Nitaro;Yu, Seung-Hun
The Plant Pathology Journal
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제28권2호
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pp.137-148
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2012
During investigating of shiitake mushroom competitors, 289 isolates of Trichoderma spp. were collected from shiitake mushroom farms in different districts and the Forest Mushroom Research Center of Korea, among which 29 representative strains were selected. Based on the DNA sequences of the rpb2 and tef1 genes and the ITS rDNA, and their morphological characteristics, they were identified as T. atroviride, T. citrinoviride, T. harzianum, T. longibrachiatum, and two undescribed species, Trichoderma spp. 1 and 2, which are considered to be the candidate of new species. Competition tests between Lentinula edodes (Sanjo302) and the Trichoderma species indicated that the six species of Trichoderma were significantly different from each other in terms of their ability to invade the mycelial blocks of shiitake. In both of dual cultures on potato dextrose agar and sawdust media, Trichoderma spp. 1 and 2 strongly invaded the mycelial blocks of shiitake. Our results suggest that the two Trichoderma species may cause potentially serious economic losses in shiitake cultivation of Korea.
다양한 소비자의 선호도와 환경에 적합한 새로운 품종을 개발하는데에 야생표고버섯은 중요한 육종 소재이다. 14개의 지역에서 채집한 총 100개의 야생 표고 균주들의 사각블럭 톱밥배지 재배 환경내에서 자실체의 형태적 특성을 조사하였다. 각 지역에서 채집한 균주들의 형태는 다양하게 나타났다. 전체 균주들 중에서 갓 종단면은 평반구형 38%, 중앙볼록형 33%, 편편형 27%, 중앙오목형 2%가 나타났으며, 대의 형태는 기둥형 55%, 곤봉형 23%, 깔때기형 22%가 확인되었다. 갓의 형태는 화악산에서 가장 다양하게 나타났으며, 대의 형태는 여러 지역의 균주에서 다양한 표현형을 나타내었다. 동일한 산림에서 채집된 균주들 사이에서도 각각 다른 형태의 버섯이 관찰되었다. 다양한 환경에서 적응한 야생 표고 균주들은 스트레스에 대한 적응력이 향상된 품종을 개발하는 자원으로 활용될 수 다. 또한 다양한 유전자원의 확보와 형질을 연구하는 것은 새로운 육종품종을 개발하는데 자산이라고 생각한다.
Shiitake (Lentinula edodes) is the most economically important cultivated mushroom, but yields are impacted by its competitor, Trichoderma spp. We previously found two unidentified Trichoderma species growing in bedlogs and sawdust shiitake media in Korea. Here, we identify and re-describe those two species based on molecular sequence data, morphology, and culture characteristics. Well-supported clades based on phylogenetic analyses of internal transcribed spacer, translation elongation factor 1-${\alpha}$, and RNA polymerase subunit II sequences grouped one of the unidentified Trichoderma spp. with Hypocrea pseudogelatinosa and the other with Hypocrea pseudostraminea, and their morphologies matched well with the original descriptions of the two Hypocrea species. This study reports the first phylogenetic analyses of H. pseudogelatinosa and Japanese strains of H. pseudostraminea. Based on the phylogenetic results, we redescribed these two species using modern taxonomic concepts in Hypocrea/Trichoderma.
Kim, Jun-Young;Yun, Yeo-Hong;Hyun, Min-Woo;Kim, Myeong-Ho;Kim, Seong-Hwan
Mycobiology
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제38권1호
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pp.7-12
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2010
A green mold species that has not previously been reported in Korea was isolated from oak log beds used for shiitake (Lentinula edodes) cultivation that were infested by mushroom flies. In this study, we identify the mold species as Gliocladium viride (an anamorph of Hypocrea lutea) and describe its mycological properties. The fungus was cottony on both potato dextrose agar (PDA) and Czapek yeast extract agar (CYA), but was colored white on PDA and became yellowish green and brown on CYA. Mycelial growth on PDA attained a diameter of 73 mm at $30^{\circ}C$ after 5 days. The fungus grew faster on malt extract agar (> 80 mm, 5 days at $25^{\circ}C$) compared to CYA and PDA (< 68 mm, 5 days at $25^{\circ}C$). Penicillate conidiophores of the fungus are hyaline, smooth walled, branching above typically in four stages, and $120\sim240\;{\mu}m$ in length. Club-shaped or slender phialides are formed on the metulae. Conidia of the fungus were ovate and elliptic, yellowish brown and green, and $2.5\sim3.0\;{\mu}m\times1.8\sim2.3\;{\mu}m$ in size. Typically, slimy conidia are formed in a mass and colored brown to dark green to almost black. The internal transcribed spacer rDNA and translation elongation factor 1 alpha gene sequences of the fungus isolated here show 99% identity with previously identified G. viride strains.
본 연구를 통하여 표고버섯의 효능 중 콜레스테롤 조절물질로 알려진 에리타데닌의 분석은 효과적이고 정밀한 분리분석 결과를 나타내었는데 MS/MS pairing 분석으로 m/z 254-178와 m/z 254-136 두개의 ion paring을 이용하여 정확한 분석이 가능하였다. 에리타데닌은 수용성 비형광성 물질로 기존의 GC나 GC-MS를 이용한 분석 방법의 경우 수용성을 휘발성 물질로 전환하기 위해 BATFA와 같은 silylation을 하여야하는 것에 비해 위험성과 편리성에서 뛰어나다. 총18개 표고균주의 건조시료를 LC-MS/MS를 이용하여 에리타데닌의 함량을 조사한 결과, 표고균주 야생형 40에서 가장 높은 3.912 mg/g, 수향고에서 3.352 mg/g, 산림 9호에서 3.008mg/g, 천백고에서 2.832mg/g 가을향과 KFRI 675에서 2.792mg/g 순으로 분석되었다. 수향고와 천백고는 2010년에 출원된 품종으로써 수향고는 고온성의 집중발생형이며 4년의 재배기간 중 1년차에 수확량이 90%이상이 집중되어 있어 초기 자본 회수가 빠르다. 또한 천백고는 중온성 집중발생형이며 봄철에 화고를 생산할 수 있는 우수한 품종이다. 야생형 40 균주는 에리타데닌 함량이 높은 표고 신품종을 개발할때 모균주로 사용할 수 있을 것으로 판단된다.
가평에서 낮은 생산성을 보이는 저온성 품종과 고온성 품종의 균사상태 및 골목 표면에 형성된 해균에 대한 조사를 시도했다. 순수배지에서의 균사생장력을 조사한 결과, 저온성 균주는 분리균에 비해 보존균의 생장력이 1.1% 정도 떨어지는 것으로 나타났으며, 고온성 균주는 분리균의 생장력이 보존균의 생장력에 비해 8.0% 정도 떨어지는 것으로 나타났다. 톱밥배지에서의 균사생장력을 조사한 결과, 고온성 분리균은 보존균에 비해 10.8%정도 생장력이 떨어졌으며, 저온성 분리균은 보존균에 비해 25.1% 떨어지는 것으로 나타났다. 중량감소율 조사결과, 고온성 분리균은 보존균에 비해 20.1% 정도 중량감소율이 낮았으며, 저온성 분리균도 보존균에 비해 19.0%정도 낮은 것으로 나타났다. 무처리에 비해서는 고온성 보존균이 107.0%, 고온성 분리균이 49.5%, 저온성 보존균이 85.4%,저온성 분리균이 50.0% 더 감소된 것으로 나타났다. 대치배양한 결과, 고온성 분리균과 저온성 분리균 모두 각각의 해당 보존균들과 동일한 균주임을 확인할 수 있었다. 또한 골목에서 검은혹버섯(Hypoxylon truncatum), 구름버섯(Coriolus versicolor), 기와층버섯(Inonotus xeranticus), 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor), 이중껍질버섯(Graphostroma platystoma), 점균류(Myxomycetes) 2종, 푸른 곰팡이(Trichoderma sp.), Hypoxylon fragiforme, Hypoxylon howeianum, Nitschkia confertula 등 총 11종의 해균이 발견되었으며, 골목들의 상태는 좋지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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