This study investigated the production of antioxidant from Actinomyces culture supernatant. For the research of the natural marine antioxidant, several bacteria were isolated from the coast of Je-ju in Korea. An actinomycetes strains, S-1 was identified to a genus level 16S ribosomal DNA sequence and fatty acid analysis. From these results and other characteristics described in the Bergey's Manual, this strain was identificated as a Nocardiopsis dassonvillei. Strain S-1 showed high activity of 1,1-diphenyl-2-prcrylhydrazyl radical scavenging. The hydroxyl radical scavenging ability of Nocardiopsis sp. S-1 supernatant was 53%. Nutritional and cultural conditions for the production of antioxidant by this organism under shake-flask conditions have optimized. Similary initial medium pH 7.6, incubation temperature of $25^{\cicr}C$, sodium chloride concentration 2.5 and incubation time of 8 day were found to be optimal.
For a studyon the production of ${\gamma}$-linolenic acid(GLA) by fungi 3 fungal strains were isolated from soil. Their cell growth lipid content and fatty acid composition were compared in shake flask culture. Among these fungi the fungus designated as FA-007 has high lipid content(21.1%) and GLA content(15.6% of total fatty acids) The fungal strain FA-007 was tentatively identified as Mucor sp. on the basis of morphological characteristics, Fungal oil produced by this fungus was composed of 75.2% neutral lipid 5.3% glycolipid and 19.5% phospholipid. Although the GLA content in phospholipid was higher than it in neutral lipid the GLA content in neurtal lipid was high as 15.5%.
In the previous report, we described the marked antitumor and immunomodulatory activities of PVp, a protein-polysaccharide fraction of a Korean wild mushroom Psathyrella velutina. In this study, a protein-polysaccharide fraction, PVMP, was prepared from the shake-cultured mycelia of the same mushroom and its immunoactivities as well as chemical compositions were investigated. At 200 $\mu\textrm{g}$/ml, PVMP weakly stimulated the BALB/c mouse splenic lymphocytes to form lymphoblasts and upregulated the expression of CD25 molecules, but failed to stimulate peritoneal macrophages. In chemical analysis these two protein-polysaccharide fractions were found to be quite different in that the carbohydrate contents of PVMP and PVP, respectively, was 85.3% and 41.2%. These results reveals that PVMP, unlike PVP, is a moderate immunostimulator on the immune system.
본 연구에서는 Streptomyces peucetius subsp. caesius 돌연변이주에 의한 doxorubicin의 생산에 있어서 배양조건 및 배지의 성분을 확립하여 doxorubicind의 생산을 높이는데 목적이 있다. Doxorubicin 생산을 위한 최적 배지조성은 4% maltose, 0.5% HEPES, 0.02% $K_2HPO_4$, 0.01% $MgSO_4$로 나타났고, 가장 적합한 종균 접종량과 시기는 10% (v/v), 72시간이었다. Doxorubicin생산에 적합한 소포제를 찾기위해 여러 종류의 소포제를 배지에 첨가한 결과 가장 적합한 소포제는 KG(10% K+10% G)이었으며 최적농도는 0.01%이었다. 교반식반응기에서 배양할 경우 적합한 통기량은 1.5v/v min으로 최대 29mg/l의 doxorubicin을 생산하였고, 1.0v/v min의 경우에도 플라스크 배양보다 15% 증가된 23mg/l의 doxorubicin을 생산하였다.
트레할로스 합성효소(trehalose synthase)의 효율적인 생산을 위하여, 5 종류의 plasmid를 형질전환 시킨 재조합 E. coli를 이용하여 균체생산량과 효소발현량을 비교하였다. Trehalose synthase의 활성은 fusion partner를 이용한 system 에서는 활성이 나타나지 않았으며, IPTG 유도 발현 시스템보다 항시적 발현 시스템을 사용하는 E. coli K12/pHCETS에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 선별된 재조합 E. coli K12/pHCETS를 사용하여 회분식 및 유가배양을 수행하였으며, 유가식 배양의 경우 균체논도는 20 g/L, 최종 trehalose synthase 활성은 13.7 U/ml을 나타내었다. 이러한 결과는 트레할로스 생산을 위한 trehalose synthase가 재조합 E. coli의 발효에 의해 경제적으로 생산되어질 수 있다는 가능성을 보여 주었다.
Kim, Seon-Won;Lee, In-Young;Jeong, Jae-Cheol;Lee, Jung-Heon;Park, Young-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권5호
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pp.548-553
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1999
A production of $\beta-Carotene$was attempted in a fed-batch culture of Blakeslea trispora by controlling both foam and dissolved oxygen in the presence of surfactant, Span 20. Results obtained from the shake flask cultures indicated that a high concentration of dissolved oxygen was needed for both cell growth and $\beta-Carotene$ synthesis, and the optimal concentration of glucose was found to be in the range of 50-100 g/l. In order to maintain the dissolved oxygen concentration level at higher than 50% of air saturation, pure oxygen was automatically sparged into the medium with air. Foam was controlled by bypassing air from the submerged aeration to the headspace in response to the foam that was caused by Span 20. High agitation speed was found to be detrimental to the cell growth due to shear damage, even though it provided sufficient dissolved oxygen. On the other hand, a low aeration speed caused stagnant regions in the fermentor because of improper mixing. Thus, for the fed-batch operation, agitation speed was increased gradually from 300 to 700 rpm to prevent cell damage at the initial stage of fermentation and to give efficient mixing for a viscous culture broth as the culture proceeded. By controlling dissolved oxygen and foam, a high concentration of $\beta-Carotene$otene (1,190 mg/l) was obtained in 6 days of the fed-batch culture of B. trispora with 2.5% of the dry cell weight, which was approximately 5 times higher than that of the batch cultures.
본 연구에서는 온실가루이 방제를 위하여 감염된 이병체로부터 균주 분리 및 농촌진흥청 및 경상북도농업기술원에서 균주를 분양 받아 5 종의 균주를 확보하여, 최종적으로 활성이 가장 높은 분리균주 M130을 선발하였다. Beauveria bassiana M130을 이용하여 균주가 갖는 효소학적 활성을 분석하였다. Chitinase와 protease의 활성을 조사한 결과, 타 균주에 비하여 높은 효소학적 활성을 가지는 조건을 얻었으며, 선발된 균주의 포자생산의 최적화를 위한 방안으로 PDB (potato dextrose broth)배지와 미강추출물을 이용한 ERBM (extracted rice bran medium)을 비교하여, 더 높은 생육도와 포자 생성량을 보인 ERBM을 본 균주를 배양하는 기본배지로 선발하였다. ERBM을 이용한 액체배양시의 최적조건으로, 기본배지인 ERBM에 0.5% $(NH_4)_2SO_4$를 첨가하여 pH 5, $28^{\circ}C$에서 배양최적화를 하였다. 향후 곤충병원성곰팡이 Beauveria bassiana M130의 최적화 조건에 따라 배양을 한다면 포자의 생산량 및 방제효과가 높아질 것으로 사료된다.
Rodrigues, Maria Elisa;Costa, Ana Rita;Fernandes, Pedro;Henriques, Mariana;Cunnah, Philip;Melton, David W.;Azeredo, Joana;Oliveira, Rosario
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권9호
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pp.1308-1321
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2013
The emergence of microcarrier technology has brought a renewed interest in anchorage-dependent cell culture for high-yield processes. Well-known in vaccine production, microcarrier culture also has potential for application in other fields. In this work, two types of microcarriers were evaluated for small-scale monoclonal antibody (mAb) production by CHO-K1 cells. Cultures (5 ml) of microporous Cytodex 3 and macroporous CultiSpher-S carriers were performed in vented conical tubes and subsequently scaled-up (20 ml) to shake-flasks, testing combinations of different culture conditions (cell concentration, microcarrier concentration, rocking methodology, rocking speed, and initial culture volume). Culture performance was evaluated by considering the mAb production and cell growth at the phases of initial adhesion and proliferation. The best culture performances were obtained with Cytodex 3, regarding cell proliferation (average $1.85{\pm}0.11{\times}10^6$ cells/ml against $0.60{\pm}0.08{\times}10^6$ cells/ml for CultiSpher-S), mAb production ($2.04{\pm}0.41{\mu}g/ml$ against $0.99{\pm}0.35{\mu}g/ml$ for CultiSpher-S), and culture longevity (30 days against 10-15 days for CultiSpher-S), probably due to the collagen-coated dextran matrix that potentiates adhesion and prevents detachment. The culture conditions of greater influence were rocking mechanism (Cytodex 3, pulse followed by continuous) and initial cell concentration (CultiSpher-S, $4{\times}10^5$ cells/ml). Microcarriers proved to be a viable and favorable alternative to standard adherent and suspended cultures for mAb production by CHO-K1 cells, with simple operation, easy scale-up, and significantly higher levels of mAb production. However, variations of microcarrier culture performance in different vessels reiterate the need for optimization at each step of the scale-up process.
현재까지 연구로는 흰목이 균사체에서 EPS 생산과 균사생장에 대한 적정 정치배양 조건이 연구되었다. 본 연구로부터 탄소원과 질소원의 처음 농도, 균사 형태와 발효조의 타입의 선택은 흰목이 균사체 EPS 생산에 가장 영향을 미친다는 것을 알게 되었다. 이들 결과는 공기주입식 반응기에서 EPS 생산성은 진탕탱크 반응기 보다 더 높았다는 점을 증명하였다. 또한 흰목이 균사의 정치배양의 생리적 생장에 대한 지식은 아직도 제한적이다.
Scutellaria baicalensis. G. 식물 세포의 현탁 배양에서 세포의 성장과 flavonoid glycosides 생산에 관한 구조적 성장 모텔 을 제안하였다 제안된 모델식은 현탁 배양의 형광을 측정함으 써 결정될 수 있는 세포 생존도와 세포 활동도 등플 세포의 생리학적 변수로서 고려하였다. 제안된 모델식에서는 세포의 상태에 따라 세포블 크게 생존 세포와 비생존 세포로 나누고 생존 세포를 분화 가능한 생존 세포와 비분화 생존 세포로 나누어 각 각의 모델을 구성하였다. 이 중 생존 세포 중량은 광섬유 형광 센서로 측정한 상대 형광 세가로부터 결정될 수 있었다. Flavonoid 배당체의 생산 속도는 분화 가능한 생존 세포와 바 분화 생존 세포에 의해 지배되며, 배양액의 삼투압에 의한 서l포 팽창과 세포내 생성불절의 방출은 비생존 세포에 의해 이루어진다고 가정하였다. 종속변수는 가칠농도(포도당), 세포 중량(건조 세포중량과 생체중량), 대사산물농도(flavone glycosides), 활동도와 생존도플 포함한다 Scutellaria baicalensis. G. 식물 세포 의 푹라스크 배양으로부터 모델과 실험결과가 잘 일치함을 알 수 있었다. 제시된 모델은 세포의 성장, flavone glycosides 및 중간매개체 합성을 예측할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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