Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2002.05b
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pp.20-45
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2002
In this study, we demonstrated the in vitro and in vivo formation of carcinogen-lipid adduct and its correlation with DNA or protein adducts. The lipids from serum or hepatocyte membranes of Spragu-Dawley rats. human serum, and standard major lipids were in vitro reacted with benzo[a]pyrene(BP) and BP metabolites. 7,8-Dihydroxy-9,10-epoxy-7,8,9,10-tetrahydrobenzo[a]-pyrene(BPDE-I), an ultimate carcinogenic form of BP, was covalently bound to triglyceride(TG). BPDE-I-TG adducts isolated by thin-layer chromatography (TLC) were further detected by high performance liquid chromatography(HPLC). TGs, including triolein, tripalmitin and tristearin, showed positive reactions with BPDE-I. However, cholesterol, phospholipids(Phosphatidylcholine, phosphatidyl-ethanolamine, phosphatidyl-inositol and sphingomyelin) and nonesterified fatty acids(palmitic acid, oleic acid, linoleic acid and stearic acid) did not react with BPDE-I. In addition, other BP metabolites (BP-phenols and -diols) did not react with TG, which TG appeared to be the most reactive lipid yet studied with respect to its ability to form an adduct with BPDE-I. There was a clear-cut dose-respect to its ability to form an adduct with BPDE-I-lipid adduct in vitro between TG and [1,3-3H]BPDE-I. In an animal study, BPDE-I-TG was also formed in the serum of rats orally treated with BP(25 mg/rat). Also, obvious correlations between [3H]BP related-biomolecule adducts (DNA, protein) or lipid damage and the BPDE-I-TG adduct were obtained in various tissues of mice i.p. treated with [3H]BP. These data suggest that TG can form an adduct with BPDE-I, as do other macromolecules (DNA, RNA, and protein). Therefore, a carcinogen-lipid adduct would be a useful biomarker for chemical carcinogenesis research and cancer risk assessment.
Objective: This study was carried out to investigate the possible application of Broussonetia papyrifera (B. papyrifera) silage as a functional feeding stuff in dairy cattle. Methods: Seventy-two Holstein cows were divided into four groups randomly and allocated to 6 pens with 3 individuals in each group and fed the original total mixed ratio (TMR) in the dairy farm or the new TMR with 5%, 10%, and 15% B. papyrifera silage, separately. Feed intake were recorded, milk and blood samples were collected, and milk composition, blood metabolites and milk fatty acids composition were measure at the end of the experiment. Results: Dry matter intake of cows decreased when they fed on diet with B. papyrifera, but no differences were observed in body condition score, milk yield, milk protein and lactose, feed efficiency and serum metabolites between groups. Both 10% or 15% of B. papyrifera silage in the diet significantly increased the immunoglobulin A (IgA) and IgG in serum, 15% of B. papyrifera silage increased the content of serum catalase, superoxide dismutase, total antioxidant capacity, and decreased the content of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine. Furthermore, 10% or 15% of B. papyrifera silage resulted in a significant decrease in the milk somatic cell count, and increased the polyunsaturated fatty acids content in the milk. Conclusion: The diets with 10% to 15% of B. papyrifera silage might enhance the immune and antioxidant function of dairy cows and increase the polyunstaturated fatty acid concentration in the milk.
Simultaneous monitoring of catecholamines and serotonin with their appropriate extraction from the biological samples is required in order to understand thoroughly the regulation of the central and peripheral nervous system. In the present research the segmented gradient elution with the solid phase extraction using a C18 cartridge rather than the previous isocratic elution with alumina extraction is successfully employed to determine norepinephrine (NE), epinephrine (E), dopamine (DA), serotonin (5HT), 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) and 5-hydroxyindoleacetic acid (5HIAA) simultaneously within 20 minutes using 3,4-dihydroxyhydrocinnamic aicd as the internal standard (IS). Linearities were obtained in the concentration range between $5{\times}10^{-6}M$ and $1{\times}10^{-4}M$ for all 7 compounds with detection limits of 0.6~1.9 ${\mu}M$. The present HPLC/ECD method yielded reasonable accuracy (relative error; -1.4~1.1%) and precision (relative standard deviation; 0.4~1.9%) for 9 measurements of the standard solution consisting of NE, E, DA, 5HT, DOPAC and 5HIAA compounds. Recoveries of catecholamines, serotonin and their metabolites from human serum were in the range of 57%~86%. While the concentrations of NE and 5HT in the serum of normal Sprague-Dawley rat were found as $1.4{\times}10^{-6}M$ and $2.6{\times}10^{-6}M$, respectively, the contents of NE and 5HT in the serum of the stressed rat were increased 5.6 times and 1.4 times more, respectively.
Species are facing strong selection pressures to adapt to inhospitable high-altitude environments. Yaks are a valuable species and an iconic symbol of the Qinghai-Tibet Plateau. Extensive studies of high-altitude adaptation have been conducted, but few have focused on metabolism. In the present study, we determined the differences in the serum metabolomics between yaks and the closely related species of low-altitude yellow cattle and dairy cows. We generated high-quality metabolite profiling data for 36 samples derived from the three species, and a clear separation trend was obtained between yaks and the other animals from principal component analysis. In addition, we identified a total of 63 differentially expressed metabolites among the three species. Functional analysis revealed that differentially expressed metabolites were related to the innate immune activation, oxidative stress-related metabolism, and energy metabolism in yaks, which indicates the important roles of metabolites in high-altitude adaptation in yaks. The results provide new insights into the mechanism of adaptation or acclimatization to high-altitude environments in yaks and hypoxia-related diseases in humans.
To monitor the reproductive patterns of endangered orangutan, Time-resolved fluorescence immuno assay (TR-FIA) were used to analyze metabolites of sex hormones in feces. Orangutan had long-term interbirth intervals (amenorrhea) during lactation period in which the secretion of sex hormones was repressed. The concentration of progesterone in the serum of pregnant orangutan was 30fold higher than that in non-pregnant orangutan. However, the concentration of hCG during pregnant period was different from the result of other primates. The present study suggested that age is not the important factor in determining the reproduction capability, because it is rather greatly influenced by the combination of various factors. Tracing metabolites of sex hormones in orangutan feces seems to be provide the effective solution for the infertility in orangutan. This study result shows the basic data in operating conservation project for endangered orangutan.
In order to confirm whether or not Acacia leaf inhibits the increase of serum total cholesterol content of rabbits administered with cholesterol, this paper is conducted. Thirty rabbits were equally divided into three groups: A, B and C. The group A was fed with the stock diet only throughout the experimental period of 42 days. The group B was fed with the stock diet and cholesterol for the first 21 days and then Acacia leaf was given to the rabbits in addition to the above diet for the remainder of the experimental period. The group C was fed with the stock diet, cholesterol and Acacia leaf for the first 21 days and then the Acacia leaf was removed from the diet for the latter part of 21 days. The results of the serum total cholesterol determination of each group were illustrated in the tables, 1-11, and figure 1. From the data, therefore, following conclusion might be drawn: 1. The Acacia leaf inhibits the increase of serum total cholesterol of rabbits administered with cholesterol. 2. It is not clear whether Acacia leaf expedites the excretion of the metabolites of the given cholesterol or blocks the transfer of the absorbed cholesterol into the blood stream.
We aimed to identify predictive markers of peri- and postpartum disorders in dairy cows. Data regarding peri- and postpartum disorders, serum metabolites, body condition score (BCS), and rectal temperature, were collected from 227 dairy cows, which were allocated to healthy (n = 57) and diseased (n = 170) groups. Serum non-esterified fatty acid (NEFA) concentration was higher in diseased than healthy cows 4 weeks before (p < 0.01) and immediately after (p = 0.05) calving. Serum alanine aminotransferase (AST) activity was higher (p < 0.05) in diseased than healthy cows 1 and 2 weeks after calving, whereas total cholesterol (TCH) concentration was lower (p < 0.05-0.0001) in diseased cows 4 weeks before, and after calving. BCS was higher (p < 0.05) in diseased than healthy cows 4 weeks before calving, but lower (p < 0.01) in diseased cows 8 weeks after calving. Rectal temperature was higher (p < 0.05-0.01) in diseased than healthy cows between 2 and 14 days postpartum. In conclusion, high serum NEFA and AST concentrations and lower TCH concentration during the peripartum period, and high prepartum BCS and postpartum rectal temperature, could be used as biomarkers to predict the subsequent development of peri- and postpartum disorders.
This study was conducted to compare the effects of feeding high protein and low energy milk replacer (HPR; CP 25%, ME 3.6 Mcal/kg DM) with low protein and high energy milk replacer (HPR; CP 21%, ME 4.2 Mcal/kg DM) on feed consumption, body weight (BW) gain, health and selected blood metabolites in Holstein calves during the pre-weaning period. At each feeding, each milk replacer (MR) was prepared by mixing 0.125 kg of dry MR in 1L of warm ($60^{\circ}C$) water. The calves were fed either HPR (n = 10) or HER (n = 10) using mobile plastic bottles fitted with soft rubber nipples. All calves received 1.8L diluted MR at each feeding 3 times daily during the first 4 weeks of age; feeding frequency was reduced to 2 times daily for the next 2 weeks of age and then to once daily during the last week of the experiment. Jugular blood was sampled in calves at day 7, 14, 21, 35 and 49 of age to enumerate selected metabolites. Daily MR, starter and hay intake during the pre-weaning period were similar in calves fed HPR and HER. Consumption of starter, MGH and total DM steadily increased with the age of calves. Final BW, daily BW gain and feed efficiency of calves were not affected by treatments. Serum glucose, cholesterol, creatinine were decreased (p<0.05) and blood urea N was increased (p<0.05) in calves fed HER or HPR as they grew older. Serum glucose, total protein and albumin concentrations in calves were not affected by treatments. Serum GPT and GOT concentrations were higher (p<0.05) in calves on HPR than on HER. Scouring score, days scoured, respiratory score, rectal temperature and general appearance were similar in calves fed HPR and HER. Poor general appearance (dullness and droopy ears) of calves fed either HPR or HER reflected nutritional insufficiency and stress. In conclusion, energy and protein concentrations in MR did not affect feed intake and BW gain in Holstein calves during the pre-weaning period. Poor general appearance and lower BW gain of calves compared to those reported in the literature for milk fed calves prompt a demand for further research to improve the daily nutrient supply to MR-fed calves.
Ginsenosides, major active ingredients of Panax ginseng, that exhibit various pharmacological and physiological actions are transformed into compound K (CK) or M4 by intestinal microorganisms. CK is a metabolite derived from protopanaxadiol (PD) ginsenosides, whereas M4 is a metabolite derived from protopanaxatriol (PT) ginsenosides. Recent reports shows that ginsenosides might playa role as pro-drugs for these metabolites. In present study, we investigated the effect of bovine serum albumin (BSA), which is one of major binding proteins on various neurotransmitters, hormones, and other pharmacological agents, on ginsenoside $Rg_{2-}$, CK-, or M4-induced regulation of $\alpha3\beta4$ nicotinic acetylcholine (ACh) receptor channel activity expressed in Xenopus oocytes. In the absence of BSA, treatment of ACh elicited inward peak current ($I_{Ach}$) in oocytes expressing $\alpha3\beta4$ nicotinic ACh receptor. Co-treatment of ginsenoside $Rg_2$, CK, or M4 with ACh inhibited IAch in oocytes expressing $\alpha3\beta4$ nicotinic ACh receptor with reversible and dose-dependent manner. In the presence of 1% BSA, treatment of ACh still elicited $I_{Ach}$ in oocytes expressing $\alpha3\beta4$ nicotinic ACh receptor and co-treatment of ginsenoside $Rg_2$ or M4 but not CK with ACh inhibited $I_{Ach}$ in oocytes expressing $\alpha3\beta4$ nicotinic ACh receptor with reversible and dose-dependent manner. These results show that BSA interferes the action of CK rather than M4 on the inhibitory effect of $I_{Ach}$ in oocytes expressing $\alpha3\beta4$ nicotinic ACh receptor and further suggest that BSA exhibits a differential interaction on ginsenoside metabolites.
The study was conducted to evaluate the effects of trivalent chromium from different sources on growth, carcass composition, and serum parameters in finishing pigs. Ninety-six crossbred pigs with an initial average body weight of 65.57${\pm}$1.05 kg were blocked by body weight and randomly assigned to four treatments with three replicates. Pigs were offered one of four diets including a control diet or the control diet supplemented with 200 ${\mu}g/kg$ chromium from either chromium chloride ($CrCl_{3}$), chromium picolinate (CrPic) or chromium nanocomposite (CrNano) for 40 days. After completion of the feeding trial, eight pigs from each treatment were selected to collect blood samples, and slaughtered to measure carcass composition. The results showed that supplemental chromium had no significant effect on growth performance, while CrNano increased carcass lean proportion and loin Longissimus muscle area (p<0.05), and decreased carcass fat proportion and 10th rib backfat depth (p<0.05). CrPic supplementation also resulted in lower fat proportion and larger Longissimus muscle area (p<0.05). The addition of Cr from CrNano or CrPic decreased serum glucose (p<0.05) and increased concentrations of total protein and free fat acid in serum (p<0.05). Serum urea nitrogen, triglyceride and cholesterol were decreased (p<0.05), and serum high density lipoprotein and lipase activity were increased (p<0.05) with the supplementation of CrNano. Serum insulin was decreased (p<0.05) by supplemental Cr from CrNano or CrPic, and serum insulin-like growth factor I was increased significantly in the CrNano treated group. These results suggest that chromium nanocomposite has higher efficacy on carcass composition in pigs compared to the traditional chromium sources.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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