Genes related to Mycoplasma hyopneumoniae-induced inflammation were identified using the genefishing technology, an improved method for identifying differentially expressed genes (DEGs) using an annealing control primer (ACP) system in RAW264.7 cells. After treatment with M. hyopneumoniae, 16 DEGs were expressed in RAW264.7 cells using a pre-screening system. Among these 16 DEGs, 11 DEGs (DEGs 1, 4, 5-10, 12-15) were selected and sequenced directly, revealing that DEG12 (Grap), DEG14 (Gadd45), and DEG15 (secreted phosphoprotein 1) were related to inflammatory cytokines. This is the first report that intact M. hyopneumoniae induces the expression of Grap, Gadd 45${\beta}$, and secreted phosphoprotein 1 in RAW264.7 cells. Subsequently, these genes may be targets for screening novel inhibitors of the mycoplasmal inflammatory response.
We have constructed the Rice Genome Information Service System (RGISS), which is an information service system of the Oryza sativa L. ssp. japonica (rice) genome, using the released version of rice Build 3.0 pseudomolecules based on the Ensembl architecture. The nonredundant library, composed of 3,360 clones of BACs, PACs, and fosmids, was used to construct supercontigs. RGISS contains 50,717 annotated genes from GenBank, 56,161 predicted genes from FgeneSH, and information on 9,587 markers, which includes STS, SSR, and EST-based RFLP. The 20,180 ESTs sequenced by the Korea National Institute of Agricultural Biotechnology (NIAB) were aligned and mapped into 168,792 exons. By gene ontology analysis, the classified protein numbers in the rice genome were 6158, 4531, and 12,364 proteins, which were mapped to molecular function, cellular component, and biological process, respectively.
Lipase of Staphylococcus sp. was purified from the culture supernatant, and its molecular mass estimated to be 44 kDa by SDS-PAGE. Its optimum temperature and pH for the hydrolysis of p-nitrophenyl substrates was $28^{\circ}C$ and pH 8.5, respectively The gene encoding the lipase was cloned in Escherichia coli in the $NH_2$-teminally truncated form by using the shotgun method, and sequenced. The mature enzyme had a 49-93% amino acid sequence homology with other staphylococcal lipases. This lipase was used for the hydrolysis of the 3-O-acetate of cephalosporin-C to give an intermediate, deacetylated cephalosporin-C that is useful for further chemical elaborations.
The polymerase chain reaction was used to study the genes inducible under stress from the heavy metal cadmium. Schizosaccharomyces pombe, grown in the presence or absence of sublethal concentration of cadmium, was isolated to purify the total RNAs. The Induced RNA Random Fishing (IRRF) method in which random oligonucleotides were used as primers was applied to the identification of cadmium-induced gene expressions. A PCR-DNA product of 400-bp was cloned and sequenced. Computer analysis showed that this DNA has no homology with any known DNA sequences in GenBank or EMBL databases. The induction of this gene was confirmed by Northern blot analysis of total RNAs isolated from both cadmium-treated and untreated yeast cells.
Seo Jung-Chul;Kim Min-Jung;Lee Chan;Lee Jeong-Soo;Choi Kang-Duk;Leem Kang-Hyun
대한한의학회지
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제27권2호
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pp.225-231
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2006
Objectives : This study was performed to determine if unknown species of antler samples could be identified by genetic distance methods. Methods : The DNAs of 4 antler samples were extracted, amplified by PCR, and sequenced. The DNAs of antlers were identified by genetic distance. Genetic distance method was made using MEGA software (Molecular Evolutionary Genetics Analysis, 3.1). Results : By genetic distance methods, all 4 antler samples were closest to Cervus elaphus nelsoni among Cervus species. Conclusion : These results suggest that genetic distance methods might be used as a tool for the identification of Cervus species.
Bacteriocin J105 is a proteinaceous inhibitory substance produced by Latococcus latis subsp. lactis j105 isolated from Kimchi. Bacteriocin J105 was purified to homogeneity by the pH-dependent adsorption-desorption method and reverse-phase HPLC from the culture broth of Lactococcus lactis subsp. lactis J105. Purification of bacteriocin J105 resulted in a 1.47-fold increase in the specific activity and the recovery was 1.5%. Its molecular mass measured by the electrophoretic pattern in the sodium, dodecyl sulfate polyacrylamide gel was about 3.4 kDa. It was stable at $121^{\circ}C$ for 15 min at pH between 2 and 4. However, at pH above 5, bacteriocin was rapidly inactivated. Twenty-one residues from the N-terminal portion of bacteriocin J105 were sequenced using sequence analysis of lantibiotics. Bacteriocin J105 showed significant homology with known nisin A from lactic acid bacteria.
One of the three components of the phenanthrene dioxygenase which is required for conversion of phenanthrene to cis-phenanthrene dihydrodiol, Rieske-type ferredoxin encoded by phnR has been cloned and sequenced from Pseudomonas sp. strain DJ77. The gene phnR is positioned at the downstream of phnQ encoding 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase. The PhnR ferredoxin contains 108 amino acids with a Mr of 11,355. The deduced amino acid sequence of the PhnR ferredoxin is 35-79% identical to those of homologous ferredoxins encoded by various genes.
Kim, Ok-Mi;Kim, Hyun-Jeong;Kim, Dal-Sang;Park, Dong-Chul;Lee, Kap-Rang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제5권5호
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pp.250-256
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1995
The ddh gene encoding meso-diaminopimelate (meso-DAP)-dehydrogenase (DDH) in Brevibacterium lactofermentum was isolated by complementation of the Escherichia coli dapD mutation. It was supposed from subcloning experiments and complementation tests that the evidence for DDH activity appeared in about 2.5 kb Xhol fragmented genome. The 2.5 kb Xhol fragment containing the ddh gene was sequenced, and an open reading frame of 960 bp encoding a polypeptide comprising 320 amino acids was found. Computer analysis indicated that the deduced amino acid of the B. lactofermentum ddh gene showed a high homology with that of the Corynebacterium glutamicum ddh gene.
A newly designed Cytophaga-Flavobacteria-specific 16S rRNA gene primer pair was employed to investigate the CF community structure in the Bering Sea, revealing a previously unknown and unexpected high CF diversity in this high latitude cold sea. In total, 56 clones were sequenced and 50 unique CF 16 rRNA gene fragments were obtained, clustering into 16 CF subgroups, including nine cosmopolitan subgroups, five psychrophilic subgroups, and two putatively autochthonous subgroups. The majority of sequences (82%) were closely related to uncultured CF species and could not be classified into known CF genera, indicating the presence of a large number of so-far uncultivated CF species in the Bering Sea.
Thirty five juveniles belonging to the genus Collichthys were collected using a bag net at Gang-wha-do, in the eastern Yellow Sea, between July and September, 2012, and identified using combined genetic and morphological methods. We sequenced 316 base pairs of mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I of 35 individuals, of which 22 individuals were identified as Collichthys niveatus (12.9-47.6 mm in SL) and 13 as Collichthys lucidus (13.4-40.3 mm SL). Morphologically, the number of occipital crests, an important taxonomic character during the adult stage, could not distinguish the two species during the juvenile stage, but the shape of the first anal fin spine clearly distinguished the two species even among juveniles.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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