• 한국응용곤충학회지
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• 제61권3호
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• pp.449-460
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• 2022

광식성 난방제 해충인 파밤나방(Spodoptera exigua)의 친환경적 방제원으로써 이용을 위해 국내에서 분리된 파밤나방 핵다각체병바이러스(S. exigua nucleopolyhedrovirus K1: SeNPV-K1)의 형태 및 전체 유전체 서열을 분석하였다. SeNPV-K1의 다각체(polyhedra)는 0.6-1.8 um 크기의 부정형으로, 기 보고된 SeNPV와 외형적 차이는 보이지 않았다. 전체 유전체의 염기서열을 분석한 결과, 기 보고된 SeNPV와 비교할 때 145 bp 더 많은 135,756 bp로 확인되었으며, G+C 함량은 44% 였고 상동반복영역은 6개로 두 바이러스간에 차이는 없었다. ORF 분석결과, SeNPV-K1은 기 보고된 것과 비교할 때 2개 더 적은 137개를 가지며, SeNPV-K1에만 존재하는 ORF는 4개가 확인되었다. 이들 4개의 ORF는 비필수 유전자로 바이러스의 특성에는 큰 영향을 주지 않을 것으로 여겨졌다. 유전체의 vista 분석 결과, SeNPV-K1과 기 보고된 SeNPV의 전체 염기서열 유사도가 매우 높은 것으로 확인되었다. 국내에서 처음으로 분석한 SeNPV-K1의 전체 유전체는 기 보고된 SeNPV와 유사한 것으로 나타났으나 서로 다른 분리주로 국내 고유자원임을 확인하였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제30권2호
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• pp.144-149
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• 1991

국내에서 분리된 파밤나방 핵다각체병바이러스(Spodoptera exigua nuclear polyhedrosis virus: SeNPV)의 생화학적인 특성을 규명하기 위하여 몇가지 실험을 행하였다. SeNPV는 하나의 envelopeso내에 다수의 nucleocapsid가 존재하는 MNPV(multiple embeded NPV)형태였다. 다각체단백질은 분자량 30kb의 단일 band로 나타났으며, Spodoptera litura NPV와 Bombyx mori NPV의 다각체단백질 항체에 반응하여 뚜렷한 침강선을 형성하였다. 비리온 단백질을 은염색한 결과, 많은 수의 minor band들이 포함된 49개의 band로 나타났으며, 바이러스 DNA를 분리하여 여러종의 제한효소에 의한 대략적인 genome size는 약 110kb 였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권2호
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• pp.161-166
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• 1998

AcNPV에 대해 감수성을 보이는 파밤나방 세포주인 Se301 세포주의 AcNPV를 이용한 발현 벡터계에서의 유용성을 알아보기 위하여 Se301세포주에서 AcNPV의 감염 특성을 Sf-21 세포주에서와 비교하였다. 그 결과, 바이러스의 감염상은 두 세포주에서 거의 유사하였으나 감염 7일 후에 세포로부터 방출된 다각체의 비율은 Se301 세포주에서 훨씬 높았다. 또한 전체 다각체 생성율은 Se301 세포주에서 약간 높았지만 그 차이는 매우 근소하여 대체적으로 두 세포주에서 거의 비슷하였으나 생성된 다각체의 크기는 Se301세포주에서 더욱 컸다. 한편, 세포주나 바이러스의 증식율과는 무관하게 AcNPV에 의한 다각체 단백질의 발현량이 Se301 세포주에서 약 2.4배 높게 나타남으로써 Se301 세포주가 AcNPV를 이용한 발현 벡터계에서 숙주 세포로서 매우 유용하게 이용될 수 있음을 보여 주었다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제3권1호
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• pp.13-18
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• 2001

The role of polyhedrin in the polyhedra production in baculovirus Autograha californica Nucelopolyhedro-sisvirus (AcNPV) was studied by over-expression of AcNPV polyhedrin or heterologous polyhedrin from Bombyx mori (Bm) NPV or Spodoptera exigua (Se) NPV. The transfer vectors containing additional polyhedrin from AcNPV, BmNPV, or SeNPV were constructed and cotransfected with bacmid bApGOZA into Sf9 cells. The resulting recombinants, designated as vApAcPol, vApBmPol, and vApSePol were tonstructed, and the polyhedra production of the recombinant was characterized. All of the recombinants produced polyhedra in the nucleus, and the polyhedrin was over-expressed. Among three recombinants, vApAcPol and vApBmPol were discriminated by their larger polyhedra size than that of wild type AcNPV, and vApSePol also produced larger polyhedra than wild type SeNPV polyhedra.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제38권2호
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• pp.144-149
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• 1996

곤충 바이러스인 Baculoviridae의 subgroup A에 속하는 핵다각체병 바이러스는 미생물 살충제로서, 또는 유용물질의 생산을 위한 발현벡터로서 현재 널리 연구·이용되고 있다. 본 연구에서는 이러한 NPV중 국내에서 분리된 SeNPV의 다각체 단백질 유전자의 구조적 특성을 구명함으로써 새로운 발현벡터를 제작하고자 하였다. 이를 위해 SeNPV의 다각체 모양을 전자현미경으로 관찰하고, 다각체 단백질의 분자량과 그 유전자의 구조를 각각 SDS-PAGE 및 염기서열 결정법에 의해 결정하였다. 그 결과, SeNPV의 다각체는 분자량 30 kDa의 단일 단백질로 이루어진 부정형의 구조였으며, 다각체 단백질 유전자의 염기서열을 포함한 876 염기의 서열을 결정하였다. 또한, SeNPV 전체 DNA상에서 다각체 단백질 유전자는 Xho I 3.0 Kb와 Nco I 6.0 Kb에 각각 존재함을 확인하고, 각각 cloning하여 제한효소 지도를 작성하였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제38권2호
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• pp.145-149
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• 1999

야생주 핵다각체병 바이러스의 낮은 병원성에 대해 살충제로서의 파밤나방 핵다각체병 바이러스(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus: SeNPV)의 병원성 향상을 꾀함과 동시에 재조합 바이러스가 다각체 내에 매립됨으로써 살충제로의 적용시 야외에서의 안정성을 확보할 수 있는 p10 유전자의 프로모터를 이용한 새로운 발현벡터를 개발하기 위하여 국내분리주 SeNPV의 p10 유전자 구조를 분석하였다. 그 결과, SeNPV p10 유전자의 프로모터와 구조유전자 부위를 포함한 545염기서열을 결정하여 기존에 보고된 SeNPV p10 유전자(Zuidema et al., 1993)와 비교한 결과 구조유전자 부위에서는 100%의 상동성을 보였으나 5` 및 3` flanking region의 4개의 염기서열에서 차이를 보였다. Southern hybridization에 의하여 SeNPV전체 genomic DNA상에서 p10 유전자는 Sph I 2.4Kb와 Cla I 4.0Kb 단편내에 각각 존재함을 확인하였으며, p10 유전자를 포함하는 이들 단편을 각각 클로닝하여 제한효소 지도를 작성한다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제43권4호
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• pp.329-332
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• 2004

파밤나방 핵다각체병바이러스(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus: SeNPV)의 온도별, 농도별로 병원활성을 조사한 결과는 다음과 같다. SeNPV의 온도에 따른 $LC_{50}$은 2령 $20^{\circ}C$에서는 $9.797{\times}10^{3}PIBs/mL$, $32^{\circ}C$에서는 $3.351{\times}10^{2}PIBs/mL$로 온도가 높아질수록 낮아졌으며, 다른 영기에서도 같은 경향이었다. $20^{\circ}C$에서 SeNPV $1.0{\times}10^{3}PIBs/mL$의 파밤나방 3령 유충에 대한 $LT_{50}$은 9.0일이었으나 SeNPV $1.0{\times}10^{4-6}PIBs/mL$에서는 6.9일-3.5일로 더 짧았다. 24, 28, $32^{\circ}C$의 SeNPV $1.0{\times}10^{4}PIBs/mL$에서는 5.7일, 5.5일, 4.9일의 병원 활성을 보여 온도가 올라갈수록 $LT_{50}$은 짧아졌다. 또한 바이러스 농도가 높고 유충의 영기가 어릴수록 짧아져 $LT_{50}$은 온도 바이러스 농도, 유충영기에 따라 차이가 있었다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제35권3호
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• pp.228-231
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• 1996

파밤나방 유충을 이용한 효율적인 SeNPV의 생산을 위하여, 파밤나방유충의 령기와 접종농도에 따른 병원성과 관련하여 바이러스 생체 증식 효율을 조사하였다. 그 결과, 파밤나방 유충을 이용한 SeNPV의 대량생산은 4령 유충에 1.0$\times${TEX}$10^{6}${/TEX} 다각체/ml 농도로 접종하였을 시 약 86.7%의 사충율과 함께 최대 바이러스 생산성을 보여 가장 효율적임을 알 수 있었다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제12권2호
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• pp.63-67
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• 2006

Suppressor of cytokine signaling (SOCS) is known to playa key role as a negative feedback regulator in JAK/STAT signaling cascade in innate immunity. Our laboratory has recently been interested in elucidating the interactions between Spodoptera exigua (Se) and SeNPV. This context leads us to clone and characterize SeSOCS that may have important functions in response to SeNPV infection. Using the RT-PCR and TA cloning approach, we found a partial fragment (416 bp) of SeSOCS. Blast search and multiple alignment data showed that it has a homology to various insects such as Anopheles gambiae (78%), Aedes aegypti (75%), Drosophila melanogastar (77%), Mus musculus (69%), and Homo sapiens (69%). Temporal induction patterns of SeSOCS were analysed after being immune-challenged with either NPV or laminarin. It showed that the level of SeSOCS mRNA was strongly induced in a biphasic manner in response to SeNPV and laminarin, respectively. It seems that SOCS, a negative regulator of JAK/STAT signaling system is also present in S. exigua and may playa role in innate immunity albeit its precise role should be further elucidated at the molecular and cellular level in the early phase of SeNPV infection in larvae.

• 한국유기농업학회지
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• 제23권4호
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• pp.797-811
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• 2015

곤충병원성 미생물을 이용한 배추 파밤나방을 방제하기 위한 시험을 실시한 결과, 실내 실험의 경우 시중에 판매되는 4종의 비티제는 그 파밤나방 유충에 대해 10% 이하의 살충 효과를 보여주었다. 곤충병원성 선충의 경우 파밤나방에 대해 $1{\times}10^2$, $3{\times}10^2$, $1{\times}10^3$ 마리/ml에서 살충효과가 각각 33.3, 83.3, 100%로 나타났다. 비티와 곤충병원성 선충의 혼합처리에 의한 파밤나방 유충의 발육억제 효과가 크게 나타났다. 파밤나방핵다각체 바이러스(SeNPV)는 $10^5$ 다각체/ml의 농도에서 70% 이상의 높은 살충효과를 보여주었다. SeNPV 생산량은 초기접종농도, 사료 공급량 및 사육온도가 높을수록 증가하였다. 온실시험에서는 비티와 선충 혼합처리가 단독처리보다 파밤나방에 방제효과가 높았으며 SeNPV는 $10^7$ 다각체/ml에서 100% 방제효과를 보여주었다. 유기배추재배 포장에서는 미생물제와 유기농업자재 혼합처리에서 파밤나방을 비롯한 나방류해충 발생이 무처리구나 비티단독처리구 보다 낮게 나타났다.