Cho Seung-Hak;Kim Jong-Hyun;Kim Jong-Chul;Shin Hyun-Ho;Kang Yeon-Ho;Lee Bok-Kwon
Journal of Microbiology
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제44권3호
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pp.327-335
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2006
An epidemiological survey of human enterobacterial infections was conducted to determine the prevalence of enteropathogens in the Republic of Korea during one year, 2003. We tested for infectious diseases in 26,992 stool samples obtained from people who visited clinics located in six big cities and six rural provinces. From these samples, we isolated 1,291 cases of enteritis bacterial infection (4.8%). In the urban areas, 821 cases of bacterial infection (6.4%) were identified and, in the rural areas, 479 bacterial strains (3.3%) were isolated. Seasonal patterns were seen for diarrhea associated with S. aureus, S. coli and V. parahaemolyticus, while Salmonella and Shigella infections showed slight seasonal variation. We found that S. aureus and Salmonella were more frequently isolated from children and the elderly; however, the prevalence of E. coli, V. parahaemolyticus, and Shigella were similar in different age groups. Routine monitoring of these infections is considered a worthwhile means by which to elucidate their epidemiology and modes of transmission and ultimately to control them more effectively. Continuous laboratory-based surveillance for findings of enteritis bacterial infection should be emphasized in the prevention of these infections.
본 연구에서는 E. coli. Salmonella, Shigella, Vibrio 등 4속의 주요 식중독유발 그람 음성 세균들을 대상으로 반복성 염기서열인 REP DNA sequence를 응용한 REP-PCR을 실시하였다. 이전의 보고에서 이들 4속의 식중독 유발세균 중 각각 혹은 일부를 대상으로 반복성 염기서열을 이용한 PCR을 적용한 사례는 있지만 그때 적용한 primer, PCR 반응조건 및 전기영동조건 등이 다양하였다. 그러므로 본 연구에서는 이와같은 4속의 세균들에 대하여 최적화된 동일한 primer와 PCR 반응조건 및 전기영동조건을 표준조건으로서 적용하였다. 그 결과로서 모든 4속의 식중독 세균 균주마다 REP-PCR 후 생성되는 fingerprinting pattern에서 속마다 1-3개의 공통적이며 독특한 band가 생성되는 것이 확인되어 이러한 pattern을 이용한 속 수준의 분리 동정과 그와 같은 주요 band들 이외의 부수적인 band들을 고려하여 종 수준까지의 분리도 가능함을 확인하였다. 따라서 본 연구를 통하여 반복적 DNA 염기서열을 이용한 REP-PCR이 주요 식중독 세균의 분리 동정 방법으로 사용될 수 있음을 확인하였다. 또한 본 연구를 통하여 얻은 결과는 더 많은 속(genus)의 식중독세균을 대상으로 한 새로운 분리 동정 방법을 확립하기 위하여 사용될 수 있을 것이다.
약리실험 결과 강심작용, 지혈촉진작용, 항균작용, 항암작용 등이 밝혀진바 있는 천초근을 이용하여 항균성 및 천연 식품보존제로서의 이용가능성을 검색하여 보았다. 먼저 천초근의 뿌리성분을 petroleum ether, chloroform, ethylaetate, methanol 및 증류수를 이용하여 항균성분을 추출하여 9종의 식중독균(Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Salmonella Enteritidis, Shigella flexner, Escherichia coil, Salmonella Typhi, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei)에 추출물의 농도를 250ppm, 500 ppm, 1,000ppm으로 달리하여 disc method로 실험한 결과 Salmonella Typhimurium애서 아주 약한 clear zone이 형성되긴 하였으나 거의 모든 균에서 항균작용이 있는 것으로 나타났다. 가장 큰 clear zone이 형성된 균은 Pseudomonas aeruginosa였고 추출물의 농도가 높아질수록 비례하여 항균효과가 크게 드러났다. 또 methanol 추출물에서 항균활성이 가장 잘 나타났으며 그 다음으로는 ethylacetate, chloroform, petroleum ether, 증류수 순이었다. 항균활성이 가장 잘 나타난 천초근의 methanol 추출물과 또 다른 겨우살이 추출물을 사용한 상승효과 여부를 알아보기 위한 실험결과 그람 양성균인 Bacillus cereus와 그람 음성균인 Pseudomonas aeruginosa에 대해 상승적인 항균효과를 나타내었다. 천초근의 methanol 추출물이 Bacillus cereus와 Pseudomonas aeruginosa균의 성장에 미치는 효과를 검정해 본 바 천초근 추출물의 농도가 진해짐에 따라 균의 증식을 억제하는 것으로 나타났고 Pseudomonas aeruginosa에서 더 두드러지게 증식이 억제되었다. 또 72시간 동안 그 성장 억제 효과가 지속됨을 알 수 있었다.
유통중인 계란의병원성균 오염상태를 시판되는 multiplex polymerase chain reaction (mPCR) kit로 검사한 결과, 총 90개의 검사시료 가운데 한 가지 이상의 미생물이 검출된 계란시료는 30개로, 검사시료의 미생물 오염도는 약 33.3% 수준이었다. 미생물별 검출 빈도는 B. cereus가 17개 시료(18.9%)에서 검출되어 가장 높은 빈도를 보였으며 Y. enterocolitica는 16개(17.8%), L. monocytogenes 15개(16.7%), St. aureus 12개(13.3%), E. coli O157:H7 4개(4.4%)의 검출빈도를 보였다. 한편, 선택배지를 이용한 viable cell count 방법에서는 27개의 시료에서 미생물이 검출되어 검사시료의 미생물 오염도는 약 30.0% 수준이였으며, 미생물별 검출 빈도는 B. cereus가 17개 시료(18.9%)에서 14개(15.6%) 시료로, Y. enterocolitica는 16개(17.8%)에서 12개(13.3%)로, L. monocytogenes는 15개(16.7%)에서 13개(14.4%)로, St. aureus는 12개(13.3%)에서 10개(11.1%)로 감소하였으며, E. coli O157:H7은 두 가지 검출방법간의 차이가 나타나지 않았다. 검출 대상 미생물 9종 가운데 Campylobacter jejuni, Vibrio parahaemolyticus, Salmonella spp., 및 Shigella spp.는 두 방법 모두에서 검출되지 않았다. 이상의 결과에서 살펴본 바와 같이 PCR을 이용한 병원성 미생물의 검출 방법은 viable cell count 방법보다 감도가 높음을 알 수 있었다.
본 연구는 2010년 1월부터 4월까지 제주도 제주시 해안가에 위치한 21곳의 용천수를 대상으로 하여 미생물학적 오염도를 조사하였다. 용천수의 이화학적 분석 및 수질환경기준에 포함되는 병원성 미생물외에 식중독 유발 및 인체에 유해한 식품병원성 미생물 중 총대장균군수, 분원성대장균, Staphylococcus aureus, Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp., Shigella spp., Vibrio parahaemolyticus를 조사하였다. 이화학적 검사 결과 용천수의 평균 수온 값은 $15.4{\pm}0.63^{\circ}C$를 나타냈으며, 염분농도의 평균값은 $1.6{\pm}3.01$‰, pH 조사결과 $7.86{\pm}0.43$로 전반적으로 pH 7~8 범위안의 조사결과를 얻었으며, 용존산소량(DO)은 조사결과 $6.06{\pm}1.86$ mg/l로 대부분의 지점에서 평균 6~7 mg/ml의 용존산소량을 보였다. 용천수의 미생물학적 검사 결과 전체 정점별로 총대장균군 범위는 <1.8->1,600 MPN/100 ml로 조사되었으며, 분변계대장균의 경우 <1.8->1,600 MPN/100 ml를 나타냈다. 분변계대장균수의 범위를 정점별 평균값을 살펴보면 용천수 정점 1번, 2번, 10번, 11번을 제외한 모든 정점에서 기하평균치가 14 MPN/100 ml 이상의 평균값을 나타냈으며, 그중 3번, 16번 정점에서 기하평균치값 100 MPN/100 ml 이상의 높은 값을 나타내었으며, 조사한 21곳의 용천수에서 E. coli O157:H7은 검출되지 않았다.
유전자 검색법(PCR)은 환경시료중의 병원성 미생물을 검출하는데 있어서 전통적인 배양법이 가지고 있는 문제점을 보완할 수 있는 장점을 지니고 있다. 이러한 PCR을 이용하여 부산시 취수원과 정수공정별 지점을 대상으로 병원성 미생물의 검출과 분포특성에 대해 조사하였다. 2004년 8월에서 2005년 10월까지의 실험 결과에 의하면 상수원수의 92개 시료중 80개 시료에서(87.0%) 병원성 미생물이 검출되었고, Shigella spp. 46.2%, Yersinia spp. 40.7%, Legionella spp. 17.6% 그리고 Salmonella spp. 9.9%의 검출율을 각각 보였다. 원수중의 병원성 미생물은 늦은 가을에서 겨울에 걸쳐 주로 분포하는 특징을 보였으며, 지점별로는 매리 원수가 물금 원수보다 높게 검출되었다. 정수처리 공정별 실험에서는 Shigella의 검출빈도가 높았으나 모든 병원성 미생물은 후오존 처리 공정 단계에서 완전히 제거되는 것으로 나타났다. 따라서 부산시 정수장은 병원성 미생물에 대해 안전함을 알 수 있었다.
Trifoliate orange seed extracts (TSEs) were prepared from different solvents, water (TW), ethanol (TE), and n-hexane (TH), and assessed for their antimicrobial activities against six gram-negative food-borne pathogens (Escherichia coli KCTC 1039, Escherichia coli O157:H7 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 3311, Salmonella Typhimurium KCCM 11862, Shigella sonnei KCTC 2518, and Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802). Among the tested TSEs, TE and TH showed a slight inhibition activity on V. parahaemolyticus ATCC 17802, but a good growth inhibition activity on Sal. Typhimurium KCCM 11862. TH and TE showed steady growth inhibition activity with increasing growth time after 6 hr when compared to the control (p<0.05). From these results, we confirmed the possibility of TH and TE as antimicrobial materials.
개에서 설사를 일으키는 주요 원인이 되는 장내 병원균으로 Salmonella spp., Shigella spp., Campylobacter spp., Clostridium spp.가 있다. 이들 세균은 배양으로 검출이 어렵다. 본 실험에서는 Salmonella spp., C. coli, C. jejuni, 그리고 Cl. perfringens를 신속하고 민감하게 검출할 수 있는 방법을 고안하였다. 정상견 71마리와 설사증상이 있는 66마리에서 수집한 분변 시료에서 장내 병원균의 유병률을 알아보고자 하였다. 장내 병원균은 실시간 중합효소 연쇄 반응 분석을 이용하여 검출하였다. 설사변에서 Salmonella spp., C. coli, C. jejuni, Cl. Perfringens는 정상변보다 검출률이 높았다. 개발한 다중실시간 중합효소연쇄반응은 분변시료의 병원균 존재 및 양 또는 기타 고유 서열을 확인하는데 유용하였다.
Ha, Tai-You;Lee, Jeong-Ho;Lee, Hern-Ku;Whang, Hee-Sung;Park, Jae-Seung
대한미생물학회지
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제35권3호
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pp.225-237
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2000
Vibrio vulnificus, a halophilic vibrio is an estuarine gram-negative bacteria that is associated with severe and frequently fatal wound infections and life-threatening septicemia. Bacteriocins are defined as antibacterial substance produced by various species of bacteria which are usually active against closely related organisms. Bacteriocins have found widespread application in epidemiological studies as specific markers of bacteria. It was proposed by Ha et al. (1990. J. Korean. Soc. Microbiol. 25: 586.) to give the bacteriocins produced by V. vulnificus the name "vulnificins". In the present study, a total of 72 strains of V. vulnificus isolated from patients and oysters were subjected to screen potential producers and indicators of vulnificin, applying ultraviolet induction method. Sensitivity of several strains of Serratia marcesans, Pseudomonas aeruginosa, Shigella flexneri, Salmonella typhi and Yersinia enterocolitica to vulnificins were also examined out. All the tested strains of V. vulnificus produced vulnificins active against indicator strains with various different inhibitory patterns. The spectrum of vulnificin activity and sensitive spectrum of indicator strains were considerably broad. Interestingly, almost all strains of S. marcescens, P. aeruginosa, Salmonella sp., Shigella sp. and Y. enterocolitica tested were sensitive to 1-7 vulnificin(s). Taken together, the present study demonstrated that all of the isolates of V. vulnificus produced vulnificins and that 8 good vulnificin producers and 10 good indicators were detected. These strains can be employed efficiently for establishing vulnificin typing scheme of V. vulnificus and for the detection of bacteriocinogeny and sensitivity in V. vulnificus. Biological role of vulnificin remains to be further elucidated.
장조림 원료 쇠고기 우둔살과 가열 처리한 쇠고기 우둔살에서 중온성균, 저온성균 등 11종의 미생물에 대한 분포도를 측정하였고, B. cereus, C. botulinum, C. perfringens, L. monocytogenes 등과 같은 9종류의 주요 병원성세균의 분리를 시도하였다. 원료육에서 미생물분포는 대부분 높은 분포를 보였으나 가열 처리육에서는 대부분 검출되지 않았다. 원료육에서 저온성균은 오염지표세균 중에서 가장 높은 분포를 나태낸 반면, 가열처리 후 급격하게 감소하였다. 식중독균인 B. cereus, C. perfringens 및 L. monocytogenes 등 3균주가 원료육에서 분리된 반면 C. botulinum, E. coli O157:H7, Salmonella spp., Shigella spp., S. aureus 및 Y. enterocolitica는 분리되지 않았다. 원료 쇠고기에서 분리된 B. cereus는 CERT-RPLA 방법에 의해 enterotoxin을 생성한 반면, C. perfringens는 PET-RPLA 방법에 의해 독소를 생성하지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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