살모넬라증과 부루셀라증은 가축 및 사람에 심각한 피해를 유발하는 질병으로, 축산업과 식품산업에 많은 경제적 손실을 초래하고 있다. 본 연구에서는, 자몽종자추출물, 구연산, 사과산 그리고 염화벤잘코늄을 주성분으로 하는 스프레이형 소독제의 Salmonella Typhimurium과 Brucella ovis에 대한 효력시험을 수행하였다. 살균효력시험은 배지희석법에 따라 수행하였으며, 스프레이형 소독제와 시험 세균들을 처리조건에 따라 경수와 유기물로 희석하여 반응을 시켰다. 유기물 조건에서, Salmonella Typhimurium과 Brucella ovis에 대한 스프레이형 소독제의 살균력은 경수조건에서의 살균력과 비교하여 낮게 나타났는데, 이는 유기물들에 의한 소독제의 살균 유효성분에 대한 저해작용에 따른 것으로 사료된다. 스프레이형 소독제는 Salmonella Typhimurium과 Brucella ovis와 같은 인수공통전염병 유발 병원균들에 대해 살균효과를 나타내어, 살모넬라증과 브루셀라증과 같은 세균성 질병의 확산을 제어하는데 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
The invasion genes from Salmonella typhimurium were identified by the construction of a cosmid library and subcloning genes into a plasmid vector, pGEM-7Z. The 4.65 kb fragment of the invasion-conferring genomic region of the subclone, pSV6235 was sequenced in both direction. The three open reading frames, which were located at downstream of a promoter region, were designated as sir (Salmonella invasion region)A coding for the 36 amino acids, sirB coding for the 132 amino acids and sirC for the 82 amino acids, respectively. Interesingly, the genomic region of pSV6235 was highly homologous to Yersinia enterocolitica genomic DNA for a high pathogenicity island and Salmonella enteritidis insertion element IS1351 and IS200 DNA. These results show that there could be a significant relationship between S. typhimurium, Y. enterocolitica and S. enteritidis with respect to horizontal evolution process and acquisition of virulence determinants by means of transposon, plasmid or bacteriophage.
The mutagenic activities of the pyrolyzates (300, 600, 750 and 85$0^{\circ}C$ ) of extracts from three saponeous expectorants (Platicodi Radix, Polygalae Radix and Asiasari Radix) and two nonalkaloidal antitussives (Lirionis Tuber and Codonopsis lanceolata Radix), medicinal plants, were studied in the Ames Salmonella/microsomes test system. The pyrolysates of Codonopsis lanceolata Radix and Asiasari Radix extracts at 85$0^{\circ}C$ were slightly mutagenic to tester strain TA98( frame shift ) and TA100(base-pair substitution) of Salmonella typhimurium, and the mutagens in these pyrolyzates required the metabolic activation by a liver microsomal fraction However, the extracts and pyrolyzates of all medicinal plants tasted except the above two results dud not show the significant increase in revertant colonies.
We have established a SYBR Green-based realtime PCR method using AnyDirect solution, which enhances PCR from whole blood, for direct amplification of the virA gene of Shigella flexneri and the invA gene of Salmonella typhimurium from human feces without prior DNA purification. When we compared the efficiency of conventional or realtime PCR amplification of the virA and invA genes from the supernatant of boiled feces supplemented with S. flexneri and S. typhimurium in the presence or absence of AnyDirect solution, amplification products were detected only in reactions to which AnyDirect solution had been added. The detection limit of real-time PCR was $1{\times}10^4\;CFU/g$ feces for S. flexneri and $2{\times}10^4\;CFU/g$ feces for S. typhimurium; this sensitivity level was comparable to other studies. Our real-time PCR assay with AnyDirect solution is simple, rapid, sensitive, and specific, and allows simultaneous detection of S. flexneri and S. typhimurium directly from fecal samples without prior DNA purification.
The essential oil fraction from the aerial parts of A. annua was analyzed by GC-MS. As the results, caryophyllene oxide (11.7%), caryophyllene (7.54%), camphor (7.32%), 1,8-cineol (4.98%), and borneol (3.99%) were confirmed as the main components of the oil fraction. The effects of this oil and its main components on antibiotic-susceptible and -resistant strains of Salmonella enteritidis and S. typhimurium were assessed. A. annua oil fraction significantly inhibited all strains of the two Salmonella species examined, with minimum inhibiting concentrations (MICs) ranging from 2.0 mg/ml to 8.0 mg/ml. Among the main components of the oil, borneol and camphor showed relatively strong inhibiting activity with MICs between 1.0 mg/ml and 4.0 mg/ml. The MICs of caryophyllene and caryophyllene oxide were higher than 16 mg/ml. The combination effects of the oils with kanamycin were evaluated using a checkerboard microtiter assay. Against S. typhimurium KCCM11862 and CCARM8009 strains, the oil fraction of A. annua, camphor, and 1,8-cineol exhibited significant synergistic with kanamycin with fractional inhibitory concentration (FIC) indices in the range of 0.085 to 0.375. In conclusion, a combination of kanamycin and A. annua oil or its main component, camphor, and cineol, may be useful for reducing the minimum effective dose of antibiotic required for the treatment of resistant S. typhimurium infections.
Park, Jeong-Uck;Hwang, Sang-Gu;Moon, Ja-Young;Cho, Yoon-Kweon;Kim, Dong-Wan;Jeong, Yong-Kee;Rhee, Kwang-Ho
Journal of Microbiology
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제38권4호
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pp.270-274
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2000
Pathogenic Salmonella typhimurium can invade the intestinal epithelium and cause a wide range of diseases including gastroenteritis and bacteremia in human and animals. To identify the genes involved in the infection, the invasion determinant was obtained from S. typhimurium 82/6915 and was subcloned into pGEM-7Z. A subclone DHl (pSV6235) invaded HEp-2 and Chinese hamster ovary epithelial cells and contained a 4.4 kb fragment of S. typhimurium genomic region. Compared with the host strain E. coli DHl, the subclone DHl (pSV6235) invaded cultured HEp-2 and Chinese hamster ovary cells at least 75- and 68-fold higher, respectively. The invasion rate of E. coli DHl for the cells significantly increased by harbouring the genomic region derived from pathogenic S. typhimurium 82/6915.
This study aimed to characterize a lytic Salmonella Typhimurium-specific (ST) phage and its biofilm control capability against S. Typhimurium biofilm on polypropylene surface. ST phage was isolated, propagated, and purified from water used in a slaughterhouse. The morphology of ST phage was observed via transmission electron microscopy. Its bactericidal effect was evaluated by determining bacterial concentrations after the phage treatment at various multiplicities of infection (MOIs) of 0.01, 1.0, and 100. Once the biofilm was formed on the polypropylene tube after incubation at 37℃ for 48 h, the phage was treated and its antibiofilm capability was determined using crystal violet staining and plate count method. The phage was isolated and purified at a final concentration of ~11 log PFU/mL. It was identified as a myophage with an icosahedral head (~104 nm) and contractile tail (~90-115 nm). ST phage could significantly decrease S. Typhimurium population by ~2.8 log CFU/mL at an MOI of 100. After incubation for 48 h, biofilm formation on polypropylene surface was confirmed with a bacterial population of ~6.9 log CFU/cm2. After 1 h treatment with ST phage, the bacterial population in the biofilm was reduced by 2.8 log CFU/cm2. Therefore, these results suggest that lytic ST phage as a promising biofilm control agent for eradicating S. Typhimurium biofilm formed on food contact surfaces.
본 연구는 그람 양성균과 음성균인 S. aureus와 S. Typhimurium를 대상으로 시트랄의 농도와 pH에 따른 항균활성 특성 및 식품 적용 가능성을 조사하였다. 농도별 항균활성은 TSB에 시트랄을 0-1,000 ppm 농도로 처리하였으며, pH는 buffer를 이용하여 pH 4.0에서 pH 7.0로 조정하여 측정하였다. 시트랄 농도 별 항균활성 실험에서는 두 균주 모두 시트랄 농도가 높아질수록 항균활성이 증가하였다. S. Typhimurium는 250 ppm 처리구에서 대조구와 유의적 차이가 없었으나 S. aureus는 약 3 log 수준으로 감소되었다. pH에 따른 항균활성은 10분이 경과 후 S. aureus는 약 1-2 log의 감소효과를, S. Typhimurium는 약 2-5 log의 감소효과를 나타내었다. TSB와는 다르게 buffer 조건에서 그람 양성 균주인 S. aureus는 S. Typhimurium와 비교하여 pH 조건에 안정적인 경향을 나타내었다. 녹즙에 적용한 시트랄은 그람 음성균인 S. Typhimurium에 대한 항균활성은 미미하였으나 양성균인 S. aureus 에 대하여 농도가 증가할수록 효과적으로 항균활성이 증가하였다.
Filamentous hemagglutinin (FHA) is considered as an essential immunogenic component for incorporation into acellular vaccines against Bordetella pertussis, the causative agent of whooping cough. Classically, antipertussis vaccination has employed an intramuscular route. An alternative approach to stimulate mucosal and systemic immune responses is oral immunization with recombinant live vaccine carrier strains of Salmonella typhimurium. An attenuated live Salmonella vaccine sgrain($\Delta$cya $\Delta$crp) expressing recombinant FHA(rFHA) was developed. Stable expressionof rFHA was achieved by the use of balanced-lethal vector-host system. which employs an asd deletion in the host chromosome to impose in obligate requirement for diaminopimelic acid. The chromosomal $\Delta$asd mutation was complemented by a plasmid vector possessing the asd$^{+}$ gene. A 3 kb DNA fragment encoding immuno dominant regionof FHA was subcloned in-frame downstream to the ATG translation initiation codon in the multicopy Asd$^{+}$ pYA3341 vector to create pYA3457. Salmonella vaccine harboring pYA3457 expressed approximately 105kDa rFHA protein. The 100% maintenance of [YA3457 in vaccine strain was confirmed by stability examinations. Additionally, a recombinant plasmid pYA3458 was constructed to overpress His(8X)-tagged rFHA in Essherichia coli. His-tagged rFHA was purified from the E. coli strain harboring pYA3458 using Ni$^{2+}$-NTA affinity purification system.>$^{2+}$-NTA affinity purification system.
Salmonella typhi infection, which was the most frequent enteric infection in Korea, has been decreasing, while the infection of other serogroups of Salmonella has been increasing since the later part of 1970s. In 1986, the number of serogroup B isolated by us increased to 46, which corresponds 21.1% of all enteropathogenic bacteria isolated from stool specimens. Salmonella isolates resistant to antimicrobial agents were extremly rare in Korea, in the 1970s. However, 7 of 13 serogroup B isolates showed resistance to ampicillin or to chloramphenicol in 1984. Among the serogroup B isolates in 1986, 71.7% and 69.6% were resistant to ampicillin and to chloramphenicol respectively. The minimum inhibitory concentrations of ampicillin and chloramphenicol against these isolates were >$128\;{\mu}g/ml$ and $128\;{\mu}g/ml$ respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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