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Effects of Increased NADPH Concentration by Metabolic Engineering of the Pentose Phosphate Pathway on Antibiotic Production and Sporulation in Streptomyces lividans TK24

  • Jin, Xue-Mei;Chang, Yong-Keun;Lee, Jae Hag;Hong, Soon-Kwang
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제27권10호
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    • pp.1867-1876
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    • 2017
  • Most of the biosynthetic pathways for secondary metabolites are influenced by carbon metabolism and supply of cytosolic NADPH. We engineered carbon distribution to the pentose phosphate pathway (PPP) and redesigned the host to produce high levels of NADPH and primary intermediates from the PPP. The main enzymes producing NADPH in the PPP, glucose 6-phosphate dehydrogenase (encoded by zwf1 and zwf2) and 6-phosphogluconate dehydrogenase (encoded by zwf3), were overexpressed with opc encoding a positive allosteric effector essential for Zwf activity in various combinations in Streptomyces lividans TK24. Most S. lividans transformants showed better cell growth and higher concentration of cytosolic NADPH than those of the control, and S. lividans TK24/pWHM3-Z23O2 containing zwf2+zwf3+opc2 showed the highest NADPH concentration but poor sporulation in R2YE medium. S. lividans TK24/pWHM3-Z23O2 in minimal medium showed the maximum growth (6.2 mg/ml) at day 4. Thereafter, a gradual decrease of biomass and a sharp increase of cytosolic NADPH and sedoheptulose 7-phosphate between days 2 and 4 and between days 1 and 3, respectively, were observed. Moreover, S. lividans TK24/pWHM3-Z23O2 produced 0.9 times less actinorhodin but 1.8 times more undecylprodigiosin than the control. These results suggested that the increased NADPH concentration and various intermediates from the PPP specifically triggered undecylprodigiosin biosynthesis that required many precursors and NADPH-dependent reduction reaction. This study is the first report on bespoke metabolic engineering of PPP routes especially suitable for producing secondary metabolites that need diverse primary precursors and NADPH, which is useful information for metabolic engineering in Streptomyces.

상산나무 잎 추출물의 항균활성 및 안정성 조사 (Investigation of Antimicrobial Activity and Stability of Orixa japonica Thunb. Leaf Extract)

  • 최수빈;강성태
    • 한국식품과학회지
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    • 제46권1호
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    • pp.39-43
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    • 2014
  • 상산나무 잎의 항미생물 활성을 알아보기 위하여 상산나무 잎을 메탄올, 70% 에탄올, $65^{\circ}C$ 열수로 추출하였고 각각의 추출물에 대하여 13종의 미생물에 대하여 항미생물 활성을 paper disc diffusion법으로 측정하였다. 그 결과 4개 균주 S. mutans, B. cereus, S. aureus, P. aeruginosa가 메탄올 추출물, 70% 에탄올 추출물에서 clear zone을 형성하여 추출물에 의하여 생육이 저해되는 것을 확인할 수 있었고 methanol 추출물이 70% ethanol 추출물에 비하여 항균활성이 크게 나타났다. 이에 methanol 추출물을 극성이 다른 여러 용매로 분획추출하고 항균활성을 측정한 결과 dichloromethane 분획물에서 항균활성을 나타냈으며 다른 분획물인 n-hexane, ethyl acetate, butanol, water 분획물에서는 항균활성이 나타나지 않았다. 가장 활성이 크게 나타났던 메탄올 추출물의 항균활성을 보인 4개의 균에 대하여 최소저해농도를 측정한 결과 S. mutans, S. aureus, P. aeruginosa는 추출물의 농도가 49.22 mg/mL에서 항균활성이 나타났으며 B. cereus의 경우 24.61 mg/mL에서 항균활성을 나타내었으며 S. mutans, B. cereus, S. aureus, P. aeruginosa에 대한 dichloromethane 분획물의 최소저해농도는 각각 3.31, 0.21, 1.7, 1.7 mg/mL으로 나타났다. 메탄올 추출물의 pH에 대한 안정성을 알아보기 위하여 pH 3, 7, 11로 조절하여 1-3시간 동안 처리한 결과 항균활성에는 영향을 주지 않았고 열에 대한 안정성을 확인하기 위하여 80, $100^{\circ}C$에서 1-6시간 동안 처리한 결과 대조군과 차이가 없었고 $120^{\circ}C$ 처리한 경우 항균활성이 약간 저하되었으나 항균활성이 완전히 실활 되지 않은 것으로 보아 상산나무 잎 methanol 추출물은 열과 pH에 비교적 안정하여 식품의 가공 처리에도 적합한 천연 식품첨가물로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

단일 수술자에 의한 초기와 중기에 시행한 무지외반증에 대한 Scarf 절골술의 결과 비교 (Comparative Analysis of the Results between the Early Period and the Midterm Period of a Single Surgeon's Experience in the Treatment of Hallux Valgus Using Scarf Osteotomy)

  • 이영현;남일현;이태훈;안길영;이용식;황성현;이경진
    • 대한족부족관절학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.135-141
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    • 2020
  • Purpose: This study evaluated the results of two groups-the early group and midterm group-comparatively in the treatment of hallux valgus using a scarf osteotomy. Materials and Methods: From January 2005 to December 2009 (Group 1) and from January 2010 to December 2013 (Group 2), this study compared hallux valgus cases treated by a scarf osteotomy by a single surgeon with at least a five-year follow-up. Results: The average ages of Group 1 and Group 2 were 50.5 and 51.7 years old, respectively. The average follow-up of Groups 1 and 2 were 7.4 and 6.2 years, respectively. Groups 1 and 2 had 86 cases (53 patients) and 93 cases (64 patients) with at least a five-year follow-up, respectively. The average hallux valgus angle (HVA) and 1-2 intermetatarsal angle (IMA) of Group 1 were improved from 31.3° and 13.9° preoperatively to 11.3° and 6.8° at the final follow-up, respectively (p<0.001). The average HVA and 1-2 IMA of Group 2 were improved from 31.7° and 13.4° preoperatively to 8.9° and 6.6° at the final follow-up, respectively (p<0.001). The mean American Orthopaedic Foot and Ankle Society (AOFAS) score of both groups increased from 48.5 and 45.0 points preoperatively to 73.7 and 82.4 points at the final follow-up, respectively. The numbers of patient-assessed subjective satisfaction of Groups 1 and 2 at the final follow-ups were as follows: excellent, 27 and 36 (31.4%, 38.7%); good, 34 and 49 (39.5%, 52.7%); fair, 13 and 5 (15.1%, 5.4%); poor, 12 and 3 (13.9%, 3.2%); respectively. Neither troughing nor stress fractures occurred in both groups. Conclusion: Scarf osteotomy for treating hallux valgus is an excellent surgical method with a relatively low incidence of complications. The results in Group 2 were better than those in Group 1, showing that more surgical experience and evolution of the techniques provided better results.

제주연안 갯녹음(백화) 지역의 해수에 분포하는 세균군의 분자생물학적 분석 (Molecular Analysis of Bacterial Communities Distributed in Sea Water of Whitening Areas of Jeju Coast)

  • 강형일;강봉조;김미란;윤병준;이동헌;오덕철
    • 미생물학회지
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    • 제38권2호
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    • pp.127-132
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    • 2002
  • 본 연구에서는 갯녹음(백화)현상이 세균생태계와 어떤 관련 이 있는 지에 대한 기초자료 및 정보를 얻기 위하여 갯녹음 현상이 일어난 제주도 성산과 강정지역 연안의 해수에 존재하는 세균군을 16S rRNA중폭기법을 이용하여 조사하였다. 강정지 역에서는 Alcanivorax, Paracoccus, Damselae, Pseudomonas, Rhodovulum, Silicibacter, Sulfitobacter, Roseobacter등 다양한 종류의 세균이 분포되어 있었으며, Alcanivorax가 20%의 빈도로 가장 많이 나타났다. 반면, 성산 지역에서는 Pseudomonas속 균주가 우점종으로서 존재하였으며, Pseudomonas tolaasii (혹은 Pseudomonas corrugata)와 유연관계가 가까운 세균은 44%, Pseudamonas mandeli와 가까운 세균이 24%, Verrucomicrobiales와 가까운 세균은 4%,기타 동정되지 알은 세균은 세 group으로 구분되었으며, 각각 8%,8%, 12%를 차지하여, 두곳에 분포되어 있는 세균군상이 상당한 차이점 이 있음을 확인하였다. 갯녹음 지역인 강정과 성산 해수의 8월(표품 채집시기)의 수온은 $27^{\circ}C$~$27.4^{\circ}C$, 염분의 농도는 30.24-30.60%, pH는 8.23~8.36,용존산소량(DO)은 각각 7.20~7.28로, 두지역에서 매우 비슷한 것으로 조사된 바 있는 데, 이는 수온이나 염분의 농도, 또는 pH보다는 다른 원인에 의하여 두 갯녹음 지역에 분포하는 세균군의 차이를 가져왔음을 제시해 주었다.

율무의 지질에 관한 연구 (A research on the characteristics of Job's tears oil)

  • 한영숙
    • 대한가정학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.59-64
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    • 1986
  • The contents of proximate components of the polished adn unpolished Job's tears, Coix agrestis, were determined. And also the phisical and the chemical properties of fatty acids composition and the oxidative rancidity of the crude oil extracted from Job's tears were examined. RESULTS : 1.The contnets of moisture, total ash, crude protein, crude fat, and carbohydrate in Job's tears were shown to be about 9.2%, 2.1~5.0%, 19.5~20.8%, 3.7~7.2%, 60.7~67.0%. 2. The average values of specific gravity, refractive index iodine value, saponification value, acid value of the crude oil extracted from Job's tears were 0.917~0.920, 1.47574, 107~111, 198~199, 1.3~2.0, respectively. 3. The fatty acids composition in the crude Job's tears oil showed oleic acid 48.97~49.97%, linoleic acid 37.33~36.16%, palmitic acid 13.70~13.87%. 4. Generally, the peroxide values and thiobarbituric acid values of the Job's tears oils and control during 40 storage days at 40±1℃ showed very low increase. After 32 days, the peroxide values and TBA values of soybean oil showed higher than those of the Job's tears oils. Conclusively, the Job's tears oils were shown to be more stable than the soybean oil.

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GRASS와 Arc/Info를 이용한 DEM 데이터의 정확도와 에러 측정 (The Measurements of Data Accuracy and Error Detection in DEM using GRASS and Arc/Info)

  • 조성민
    • 한국지리정보학회지
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    • 제1권1호
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    • pp.3-7
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    • 1998
  • GIS 데이타의 정확도 문제는 DEM과 같은 데이터의 유용성과 적용에 대한 서로 다른 견해를 불러 일으킨다. 데이터의 정확성은 좌표의 정확한 위치와 속성정보를 무작위적으로 검색하여 결정할 수 있다. DEM은 과거 보다는 손쉽게 취득할수 있고 이를 처리할수 있는 소프트웨어도 다양해 졌으나 GIS의 응용은 이미 만들어진 데이터에 따라 그 결과가 달라질수 있으므로 데이터의 정확도와 에러에 대한 주의를 기울일 필요가 있다. 본 연구의 목적은 1:24,000과 1:250,000 DEM 데이터를 이용하여 DEM의 정확도를 검색하고 데이터가 지닌 에러를 찾아내는 방법을 모색하는데 있다. GRASS와 Arc/Info를 이용하여 DEM을 레이어로 만들어내는 과정 또한 연구 되었다. 연구지역은 250 $km^2$의 면적을 지녔으며 연구 결과 1:250,000 DEM에서는 실제 등고값이 정상적으로 처리 되었으나 1:24,000 DEM에서는 실제의 등고값이 아닌 0으로 표현된 에러가 발견되었다.

Comparing Pre- and Post-Operative Findings in Patients Who Underwent Laparoscopic Proximal Gastrectomy With a Double-Flap Technique: A Study on High-Resolution Manometry, Impedance pH Monitoring, and Esophagogastroduodenoscopy Findings

  • Hyun Joo Yoo;Jin-Jo Kim
    • Journal of Gastric Cancer
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    • 제24권2호
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    • pp.137-144
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    • 2024
  • Purpose: Laparoscopic proximal gastrectomy (LPG) is a viable choice for treating proximal gastric lesions. However, the occurrence of severe reflux has limited its widespread adoption. To address this issue, the double flap technique (DFT), which incorporates artificial lower esophageal sphincteroplasty, has been developed to prevent reflux problems after proximal gastrectomy. In this study, we aimed to investigate the usefulness of this technique using high-resolution manometry (HRM), impedance pH monitoring, and esophagogastroduodenoscopy (EGD). Materials and Methods: The findings of pre- and postoperative 6-month HRM, pH monitoring, and EGD were compared for 9 patients who underwent LPG with DFT for various proximal gastric lesions at Incheon St. Mary's Hospital from January 2021 to December. Results: A total of 9 patients underwent proximal gastrectomy. Approximately half of the patients had Hill's grade under II preoperatively, whereas all patients had Hill's grades I and II in EGD findings. In the HRM test, there was no significant difference between distal contractile integral (1,412.46±1,168.51 vs. 852.66±495.62 mmHg·cm·s, P=0.087) and integrated relaxation pressure (12.54±8.97 vs. 8.33±11.30 mmHg, P=0.27). The average lower esophageal sphincter (LES) pressure was 29.19±14.51 mmHg preoperatively, which did not differ from 19.97±18.03 mmHg after the surgery (P=0.17). DeMeester score (7.02±6.36 vs. 21.92±36.17, P=0.21) and total acid exposure time (1.49±1.48 vs. 5.61±10.17, P=0.24) were slightly higher, but the differences were not statistically significant. Conclusions: There is no significant functional difference in HRM and impedance pH monitoring tests after DFT. DFT appears to be useful in preserving LES function following proximal gastrectomy.

서해안 곰소만 갯벌 온도의 구조 및 변화 (Structure and Variation of Tidal Flat Temperature in Gomso Bay, West Coast of Korea)

  • 이상호;조양기;유광우;김영곤;최현용
    • 한국해양학회지:바다
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    • 제10권1호
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    • pp.100-112
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    • 2005
  • 갯벌의 온도구조와 열적 특성변화를 조사하기 위해 서해안 공소만 갯벌조간대에서 고도가 다른 3개 지점을 설정하여 40 cm깊이까지 계절별로 1개월간의 온도관측을 수행하였다. 표층에서 평균온도는 하계에 아래층보다 높고 동계에는 낮아져 표층가열과 냉각에 의한 온도구조와 변화 형태를 보여주었으며 표준편차는 아래층으로 갈수록 감소하였다. 주기성이 뚜렷한 일사량과 조위 변화가 주로 단기적 온도변화를 야기하였고, 간헐적으로는 강우와 강한 풍속도 영향을 주었다. 시계열분석에 의하면 24시간, 12시간 그리고 8시간 주기 성분에 강한 에너지 첨두(peak)를 보였으며, 24시간 주기성분이 가장 큰 에너지를 보였다. 24시간 주기 성분은 일사량변화, 12시간 주기는 반일주조 조위변화 그리고 8시간 주기성분은 일사량과 조위변화의 상호작용에 의한 온도파동으로 해석되었다. EOF분석에서 제 1모드와 제 2모드가 수직온도구조 변화의 96%를 차지하였다 제 1모드는 갯벌 표층에서의 가열과 냉각에 의한 현상으로, 제 2모드는 갯벌내부의 열 전파과정에서 발생하는 지연효과로 해석되었다. 교차스펙트럼 분석에서 24시간 주기성분 온도파동에 의한 열전달위상은 깊이에 따라 선형적으로 증가하는 평균위상 차이를 보였고, 표층에서 10 cm, 20 cm, 40 cm 깊이까지의 위상 차이에 의한 지연시간은 각각 3.2시간, 6.5시간 9.8시간이었다. 일차원적 열확산모델에서 산출된 24시간 주기성분 온도파동의 수직 확산계수는 깊이와 계절에 걸쳐 평균하였을 때 중부조간대 정점에서는 $0.70{\times}10^{-6}m^2/s$, 하부조간대 정점에서는 $0.57{\times}10^{-6}m^2/s$의 값을 보였다. 깊이 평균된 확산계수는 봄철에 크고 여름철에 작았고, 계절 평균된 확산계수는 2cm부터 10cm깊이까지 증가하고 10cin부터 40cm깊이까지는 감소하는 수직구조를 보였다. 평균 열확산계수를 사용하여 구한 온도전파 확산속도는 2 cm 깊이로부터 10 cm, 20cm, 40cm까지 각각 $8.75{\times}10^{-4}cm/s,\;3.8{\times}10{-4}cm/s,\;1.7{\times}10^{-4}cm/s$정도의 값이 되어 표층에서 깊어질수록 작아졌다.

건조방법에 따른 분말 고추장의 성분변화와 관능적 특성 (Sensory Evaluation and Changes in Physicochemical Properties of Gochujang Powder with Different Drying Methods)

  • 김청규;이정석;오경근;이상덕;오만진
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제13권1호
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    • pp.24-29
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    • 2006
  • 고추장의 보존성, 편리성을 증진시키기 위하여 공장생산 고추장을 분무, 진공 및 동결건조하여 분말 화 한 후 수화시킨 고추장의 관능과 물성, 색도, 성분변화를 검토하였고 분말고추장을 밀봉하여 $35^{\circ}C$에서 90일간 저장하면서 저장과정 중 색도 및 성분변화를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 관능검사 결과 건조 고추장의 품질은 동결건조 고추장이 대조구와 가장 비슷하였고 분무건조 고추장, 진공건조 고추장 순 이었다. 원료 고추장을 동결, 분무, 진공건조 하였을 때 pH, 환원당, amino nitrogea NaCl의 변화는 인정되지 않았으며 점도는 $15\%$정도 감소하였다. 저장과정 중 고추장 분말의 산도는 $15\%$ 정도 증가하였고 환원당, amino nitrogen, ethanol은 약간 감소하는 경향이었으며 Hunter L값은 24.8-27.3에서 23.6-24.4, a 값은 10.8-12.0에서 8.3-9.3, b값은 7.1-7.9에서 4.4-5.5로 저하하였다.

주정의존 환자에서 7분선별검사를 이용한 인지장애의 평가 (Assessment of Cognitive Disorders in Alcoholics Using the 7 Minute Screening Battery)

  • 전진숙;윤한철;이광영;오병훈
    • 생물정신의학
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    • 제8권2호
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    • pp.258-265
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    • 2001
  • Objectives : Chronic alcohol consumption has been known to result in various neurocognitive deficits. Many neuropsychological studies revealed that the major disturbances occurred in the executive function, learning and short-term memory, visuospatial performance function, perceptuo-motor skills, and abstraction and problem solving abilities. This study was done to identify which cognitive areas might be mainly affected. Methods : The cognitive disturbance was evaluated using the Korean Version of the Mini Mental State Examination(MMSEK) and the 7 Minute Screen(7MS) in male inpatients with alcohol dependence(N=3 : as well as in age and education level matched healthy male controls(N=30). Four individual tests of the 7MS were consisted of the Benton Temporal Orientation Test, the Enhanced Cued Recall, the Clock Drawing and the Category Fluency. Results : 1) The average scores of four individual test of the 7MS for the alcoholics were $2.77{\pm}4.38$ for the Benton Temporal Orientation Test, $13.90{\pm}2.02$ for the Memory Test(the Cued Recall $6.77{\pm}1.94$, the Uncued Recall $7.10{\pm}2.45$), $5.84{\pm}1.86$ for the Clock Drawing, and $12.58{\pm}3.29$ for the Category Fluency. Except the Benton Temporal Orientation Test, there were statistically significant differences between test scores of alcoholics and those of controls(p<0.01). 2) The alcoholics who had MMSE-K score <24 were 9.68%. The average(${\pm}S.D.$) score of the MMSE-K for the patient group($27.23{\pm}2.62$) was significantly(p<0.001) lower than that of the healthy controls($29.20{\pm}1.24$). There were no statistically significant differences between four individual test scores of the 7MS of alcoholics with the MMSE-K score <24(N=3) and those of alcoholics with the MMSE-K score ${\geq}24$(N=28). 3) Four individual test scores of the 7MS seemed to have statistically significant association with such variables as MMSE-K, duration of alcohol drinking, blood magnesium concentration, liver function and thyroid function. Conclusion : Mild deficits of cognitive areas such as orientation, memory, visuospatial abilities and verbal fluency could be found in alcohol dependence.

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