Arylsulfatase는 간단한 Phenols류의 황에스테르 화합물로부터 S $O_{4}$$^{[-992]}$ - 이온의 유리를 촉매한다. 이 효소는 토양센균을 포함한 많은 미생물과 동식물의 조직등에 널리 분포하여 있으며 이와 같은 넓은 분포는 이 효소의 기본적 기능이 환경학적으로 매우 중요한 의미를 갖는다고 하겠다. Arylsulfatase에 대한보고는 Klebsiella sp를 사용하여 몇몇 보고가 있다. 본 연구는 6종의 Serratia sp를 사용하여 arylsulfatase 합성조건을 검토하고 효소의 정제조건과 성질에 대하여 조사하여 Serratia marcescens를 선정하였다. Serratia mrcescens는 탄소원으로서 xylose rhamnose, glucosamine 그리고 arabinose등과 같은 몇몇 당을 이용하지 못했으며 glucose와 mannitol을 잘 이용하였으나 glucose methioniue의 경우 효소 합성을 억제시키었다. 유황원으로서는 무기유황염과 methionine의 첨가는 억제되었으며 tyramine의 첨가에 의해서 효소 함성의 억제효과는 해제되었다. 효소의 정제는 황산암모늄 포화용액의 분획과 DEAE-Cellulose, CM-Cellulose 그리고 DEAE-Sephadex A-25로 연결되는 구분 분획에 의해서 행하여졌다. 효소의 분자량은 SDS-gelelectrophoresis와 Sephadex G-100 column chromatography에 의하여 각각 46,000과 49,000으로 측정되었고 최적 PH는 6.8이었다. P-Nitrophenyl sulfate를 사용한 Km과 Vmak치는 각각 2.5$\times$$10^{4-}$M과 20 nmoles/min/mg protein이었다. 기질에 대한 특성은 phenylsulfte와 ο-, p-nit-rophenyl sulfate 그리고 p-nitro catechol sulfate에 대해서 높은 활성을 보였다. Hydroxylamine, inorganic fluoride, sulfide 그리고 Phosphate등은 강한 효소 저해작용을 나타내었고 무기유산염은 저해작용을 보여주지 않았다. Tyramine, octopamine그리고 dopamine과 같은 amino acid 또한 강한 저해 작용을 보였다.
Six strains of an obligate predatory bdellovibrio isolate that preys on Burkholderia glumae in rice paddy field water and rhizosphere soil, were identified and characterized. The numbers of Bdellovibrio cells varied from $3.2{\times}10^3$ to $9.2{\times}10^3$ plaque-forming unit/g after enrichment in cells of B. glumae. Prey range tests with six Bdellovibrio strains and 17 prey strains of rice-pathogenic, antibiosis-related, or nitrogen-fixing bacteria resulted in unique predation patterns in related prey cells. Strain BG282 had the widest prey range on 7 plant pathogenic bacteria among the 17 prey strains tested. However, no predation occurred with strains of Azospirillum brasilense, Paenibacillus polymyxa, Pseudomonas fluorescens, P. putida, and Serratia marcescens that are associated with antibiosis or nitrogen fixation in the rice ecosystem. Identification was confirmed by the presence of typical bdelloplast in the prey cells of B. glumae and by a PCR assay using B. bacteriovorus-specific primers. Furthermore, 16S rDNA sequencing of the six bdellovibrio strains showed a homology range of 97.2% to 99.2% to the type strain of B. bacteriovorus.
프로디지오신은 Serratia marcescens, Vibrio psychroerythrus, Hahella chejuensis 등이 생산하는 일반적인 pyrrolylpyrromethane 골격을 특징으로 하는 붉은색 색소이다. 프로디지오신은 항암, 면역억제, 항진균, 항말라리아, 살조 활성을 갖는 것으로 보고되어있다. 프로디지오신은 다양한 활성이 비해 생산율이 현저히 낮고, 생합성 조건이 까다롭다. 이로 인해 판매 가격이 높고, 활용성이 낮다. 본 연구는 Serratia의 배양 조건에 따른 생산 효율을 높이기 위한 다양한 연구를 진행하였다. 본 연구에서는 16S rDNA 유전자 서열 분석 및 생리학적 특성을 기반으로 prodigiosin을 생성하는 박테리아 균주 PDGS120915를 부산의 경미하게 오염된 하천수에서 분리하여 Serratia sp.의 균주로 확인하였다. PDGS120915의 붉은색 색소를 산성에탄올을 이용하여 직접 추출하고 특성분석을 실시한 결과 프로디지오신 화합물로 확인되었다. 색소 생성은 25℃, pH 7 및 0% NaCl 농도 조건에서 14시간 동안 배양했을 때 최적을 생성을 보였다. 또한 우리는 fructose와 beef extract 같은 탄소 및 질소원을 처리하면 프로디지오신 생산이 각각 약 6배와 4배 증가한다는 것을 발견하였다. 미네랄에서는 KCl이 프로디지오신 생산 증대에 가장 효과적이었다. 카세인은 또한 프로디지오신 생산에 가장 적합한 공급원이었다.
지난 약 반세기에 걸쳐서 Penicillin을 비롯하여 많은 항생제 및 화학요법제의 등장으로 급성 혹은 만성중이염의 치료에 많은 도움을 주었다. 그런데, 근래에 이같은 약제의 무절제한 사용 및 오용으로 인한 내성균의 출현과 균교대현상 등으로 치료에 곤란을 겪고 있는 실정이다. 연자 등은 만성적인 이루를 주소로 하여 내원한 만성중이염 환자 50례를 대상으로 무균상태하에서 이루를 채취하여 균을 배양 및 동정하였으며 pipemidicacid를 비롯한 여러 항생제에 대한 감수성검사를 시행하였다. 그결과 중이염환자 50례에서 staphylococcus aureus 및 epidermidis, pseudomonas aeruginosa 및 putrefasciens, proteus mirabilis, $\alpha$-hemolytic streptococcus, klebsiella pneumonia, unproved gramnegative rod, serratia marcescens, corynebacterium이 검출되었으며, pipemidic acid를 투여하여 pseudomonas와 proteus에 의한 중이염에 좋은 치료효과를 보였으며 staphylococcus를 비롯한 다른 감염균에도 괄목할만한 치료효과를 나타냈다. Pipemidic acid는 piromidic acid의 새로운 유도체로서 gram양성균 뿐만 아니라 pseudomonas를 포함한 gram음성체에도 저명한 항균효과가 있음을 알 수 있었다.
The objectives of this study were to identify the histamine-forming bacteria and bacteriocin- producing lactic acid bacteria (LAB) isolated from Myeolchi-jeot according to sequence analysis of the 16S rRNA gene, to evaluate the inhibitory effects of the bacteriocin on the growth and histamine accumulation of histamine-forming bacteria, and to assess the physico-chemical properties of the bacteriocin. Based on 16S rRNA gene sequences, histamine-forming bacteria were identified as Bacillus licheniformis MCH01, Serratia marcescens MCH02, Staphylococcus xylosus MCH03, Aeromonas hydrophila MCH04, and Morganella morganii MCH05. The five LAB strains identified as Pediococcus acidilactici MCL11, Leuconostoc mesenteroides MCL12, Enterococcus faecium MCL13, Lactobacillus sakei MCL14, and Lactobacillus acidophilus MCL15 were found to produce an antibacterial compound with inhibitory activity against the tested histamine-producing bacteria. The inhibitory activity of these bacteriocins obtained from the five LAB remained stable after incubation at pH 4.0-8.0 and heating for 10 min at $80^{\circ}C$; however, the bacteriocin activity was destroyed after treatment with papain, pepsin, proteinase K, ${\alpha}$-chymotrypsin, or trypsin. Meanwhile, these bacteriocins produced by the tested LAB strains also exhibited histamine-degradation ability. Therefore, these antimicrobial substances may play a role in inhibiting histamine formation in the fermented fish products and preventing seafood-related food-borne disease caused by bacterially generated histamine.
This study investigated the antibacterial activities of extracts and fractions of Sasa borealis against eight bacteria (Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Psedomonas aerginosa, Salmonella choleraesuis, Serratia marcescens and Vibrio vulnificus) by broth dilution assay. Using survival curves, the kinetics of bacterial inactivation upon exposure to the extracts and fractions were followed for 24 h. In this same manner, MIC (minimum inhibitory concentration) values were determined by broth microdilution assay and then confirmed to be the extract concentrations that inhibited bacterial growth. Sasa borealis extracts showed antibacterial activities against all tested bacteria. In particular, all tested fractions of Sasa borealis had stronger activities than 70% ethanol extract. MIC of Sasa borealis extract was determined to be 5 mg/mL against Salmonella choleraesuis. All fractions of Sasa borealis extract had extremely strong antibacterial activities. MIC of fractions were determined to be 0.03~2.5 mg/mL. These results suggest that the extracts and fractions of Sasa borealis effectively inhibited bacterial growth and thus are useful as natural antibacterial agents.
거미는 육식동물로 구강의 소화라는 독특한 방법을 통하여 곤충을 비롯한 작은 동물을 먹이자원으로 이용한다. 거미의 독샘에 함유되어 있는 단백질 분해 효소 환만 아니라 소화관에 존재하는 미생물도 거미의 소화에 중요한 역할을 할 것으로 추정된다. 본 연구에서는 한국산 무당거미(Nephila clavata)의 소화관내 미생물 군집의 분포와 단백질 및 지질 분해능을 확인하고, 거미의 장내 미생물을 분리 .동정하고자 하였다. 한국산 무당거미의 소화관에 존재하는 총 개체수는 거미 18개체를 통합하여 처리하였을 때와 개체별로 처리하였을 때 모두 거미 한 마리당 $10^3-10^5$CFUs 로 매우 유사하였다. 계수된 미생물 중에서 90% 이상이 단백질 또는 지질 분해능을 나타내었다. 그리고 계수된 미생물 중에서 군종별로 1균주씩 순수 분리하였고, 분리된 미생물 중 63.3%가 각각 단백질 또는 지질 분해능을 나타내었고, 이중 50%의 균주는 단백질과 지질 분해능을 동시에 함유하는 것으로 나타났다. 형태적, 생리 .생화학적 방법을 통하여 동정한 결과, 11종류의 그람음성균(Acinetobacter calcoaceticus, A. haemolyticus, Aicaligenes faecalis, Cedecea davisae, C. neteri, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, Serratia marcescens, Stenotraphamonas maltophilia, Suttonella indologenes)과 11종류의 그람양성균(Bacillus cereus, B. coagulans, B. pasteurii, B. thuringiensis, Cellulomonas flavigena, Corynebacterium martruchotii, Enterococcus durans, E. faecalis, Micrococcus luteus, Staphylococcus huminis, S. sciuri)으로 분류되었다.
본 연구에서는 생선 내장으로부터 분리된 유산균의 프로바이오틱 특성과 아민 산화효소(diamine oxidase, DAO) 및 박테리오신 생산을 통한 히스타민 분해능을 조사하였다. 조기, 가자미, 명태 및 우럭 내장으로부터 분리된 총 97종의 유산균 중에서 CIL08, CIL16, FIL20, FIL31, PIL45, PIL49, PIL52 및 RIL60 균주는 인공 소화액에 대한 저항성이 강하고, HT-29 상피세포에 대해서도 높은 부착력을 보였으며, 항생제(amoxicillin, ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin, tetracycline 및 vancomycin)에 대한 내성도 강한 것으로 나타났다. 게다가 이들 균주들은 히스티딘이 함유된 탈카르복시화 액체배지 내에서 히스타민을 생산하지 않았다. 특히 DAO를 생산하는 것으로 추정되는 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 등의 4균주는 히스타민 분해능이 유의하게 높았다. FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균이 생산한 박테리오신에 의해선 Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25 혹은 Aeromonas hydrophilia RIH28의 증식과 히스타민 생성량이 유의하게 감소되었다. 또한 생선 내장에서 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 혹은 박테리오신 생산능을 가진 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 유산균과 혼합 배양에 의해 히스타민 축적량이 감소되었다. 히스타민 생성을 억제하는 프로바이오틱 유산균의 배양학적 특성과 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 Pediococcus pentosaceus CIL08, Lactobacillus plantarum FIL20, Lactobacillus paracasei FIL31, Lactobacillus sakei PIL52 및 Leuconostoc mesenteroides RIL60으로 동정되었다.
SM-101 is a mixture of metampicillin and sulbactam(2:1). The antibacterial activities of SM-101 were compared with those of metampicillin, piperacillin and Augmentin. It showed powerful antibacterial activities against major strains. Except P. anruginosa and S. marcescens, the in vitro antibacterial activity of SM-101 was higher than those of metampicillin, piperacillin and Augmentin against Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Moganella morganii, E. Coil, and Proteus spp. The $ED_{50}$ values of SM-101 were two-fold or greater than those of metampicillin, piperacillin and Augmentin against $\beta-lactamase$ producing strains, p. mirabilis GN79 and M. morganiii MB4-11. The in vivo efficacy of SM-101 was more active than metampicillin and pipeeracillin and similar to Augmentin against S. aureus Smith, E coli MB4-01 and K. pneumoniae MB4-02.
Recently, the prevalence of 16S rRNA methylase conferring high-level resistance to aminoglycosides has been increasing in Gram-negative bacilli globally. We determined the prevalence and genotype of these methylase-producing bacteria, and characterized the co-resistance to ${\beta}$-lactam antibiotics and quinolone in Gram-negative clinical isolates collected in 2010 at a hospital in Korea. Among 65 amikacin-resistant isolates screened from 864 Gram-negative bacilli (GNB), 16S rRNA methylase genes were detected from 49 isolates, including Acinetobacter baumannii (43), Klebsiella pneumoniae (2), Proteus mirabilis (2) and Serratia marcescens (1), Empedobacter brevis (1). All of the 16S rRNA methylase genotype was armA and no variant sequences of amplified PCR products for armA were noted. The 16S rRNA methylase producing bacteria showed much higher resistance to aminoglycoside for Enterobacteriaceae and glucose non-fermenting (NF)-GNB and to imipenem for glucose NF-GNB, than the non-producing isolates. All of the 16S rRNA methylase producing Enterobacteriaceae had the extended-spectrum-${\beta}$-lactamase. In addition, two K. pneumoniae concurrently produced both plasmid-mediated AmpC ${\beta}$-lactamase and qnrB gene. All of the amikacin-resistant A. baumannii (43) co-harbored armA 16S rRNA methylase and $bla_{OXA-23}$ carbapenemase. In conclusion, 16S rRNA methylase producing bacteria were very prevalent among GNB in South Korea, and were commonly associated with co-resistance, including carbapenem and quinolone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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