• 제목/요약/키워드: Rotaviru

검색결과 34건 처리시간 0.026초

Reverse Tetracycline-regulated Retroviral Vector System을 이용한 human Iactadherin 유전자의 유도적인 발현

  • 권모선;구본철;이용석;박재복;김태완
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
    • /
    • pp.50-50
    • /
    • 2003
  • 모유에 존재하는 유지방구의 막을 구성하는 주된 당단백질인 하나인 lactadherin(과거에는 BA46로 일컬어짐)은 rotavirus에 의한 감염증상을 예방하는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 retrovirus vector system을 이용하여 Chinese Hamster Ovary (CHO) 세포에 tetracycline에 의해 발현이 제어되는 promoter 하의 lactadherin 유전자를 전이시킨 후lactadherin이 tetracycline에 의해 발현이 유도되는지의 여부를 실험하였다. 먼저 기초 실험으로 E. coli LacZ유전자를 이용하여 tetracycline에 의한 유도 여부를 조사하였다. Tet-On과 RevTRE-LacZ retrovirus를 co-infection시킨 NIH3T3 세포는 doxycycline (tetracycline 유도체)의 투여량에 비례하여 E. coli LacZ 유전자의 발현 정도가 증가하는 양상을 나타내었는데, 최대의 발현에 대한 doxycycline 농도는 1 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 이상으로 나타났다. 이 예비실험의 결과를 바탕으로 Tet-On과 RevTRE-Ltd retrovirus vector를 이용하여 사람의 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 검정하였는데, CHO 세포에서 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 RT-PCR 기법을 이용하여 확인하였다. 표적세포 내에서 외부에서 도입된 유전자가 지속적으로 발현될 경우 심각한 생리적 부작용을 야기시킨다는 사실을 감안할 때, 본 실험의 결과는 유전자 치료와 형질전환동물의 생산에 크게 도움이 될 것으로 예상된다.

  • PDF

Negative stain을 이용한 Rotavirus의 투과전자현미경적 구조 (An Electron Microscopic Structure of Rotavirus by Negative Stain)

  • 권중균
    • Applied Microscopy
    • /
    • 제24권4호
    • /
    • pp.107-114
    • /
    • 1994
  • The Rotaviruses are members of the family Reoviridae and are the major cause of severe childhood gastroenteritis worldwide. Recently, electron microscopy has been used to detect non-group A rotaviruses to determine a relatively high resolution structure of the rotavirion. Mature, infectious virions(double-shelled particles) have a diameter of approximately 70nm, and have a capsid structure composed of two concentric protein layers. We have studied patient's stool specimen by negative staining technique complete removal of sucrose suspension. This negative staining technique that could be carried out in about 30 minutes and that could be used with crude stool specimen was an advantage of major significance. Removal of sucrose in the sample by has been completed washing with distilled of sucrose and by washing with distilled water. Ultrastructurally, typical feature of rotavirus has a double capsid construction with an inner capsid of 55nm and on outer 65-70nm diameter can be clearly demonstrated.

  • PDF

Kefir가 HumanRotavirus의 세포 감염 억제 및 당뇨병 Mouse에 미치는 영향;총설 (The Effects of Kefir on MA-104 Cells Infected with Human Rotavirus and Diabetic Mouse; Review)

  • 이종익;송광영;천정환;현지연;서건호
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
    • /
    • 제29권1호
    • /
    • pp.1-15
    • /
    • 2011
  • 국내는 물론 해외에서도 kefir 섭취 요법에 의한 당뇨병의 치료 효과에 관한 연구는 거의 없는 현실이다. 따라서, kefir가 당뇨병 치료 보조식품으로서 이용 가능성이 있는지를 검토하고 연구할 가치가 있다고 본다.

  • PDF

제주도 Bovine Rotavirus의 분리와 그 특성 (Isolation and Characterization of Jeju Island Bovine Rotavirus (JBR))

  • 유제현;이영건;주지선;김유성;김순재;해로명탁삼랑;중입치;포택정삼;곡구효보
    • 대한바이러스학회지
    • /
    • 제26권2호
    • /
    • pp.181-189
    • /
    • 1996
  • Fecal samples of calf diarrhea were taken on farms in Jeju island, rotavirus was isolated and cytopathic effect (CPE) was determined after infection to MA104 cell. Morphological evaluation on electron microscopy proved it as rotavirus. Also, its infection to MA104 cell was reidentified using a fluorescence antibody method. Genotype of Jeju island bovine rotavirus (JBR) analyzed through PAGE was 4: 2: 3: 2 pattern, which was unique in bovine and that analyzed through general PAGE was somewhat different from NCDV, UK, KK3, A5-3A, 61A, B223 and similar to N stool-5, N culture-5 and Kawatabi (Japan). By titration after plaquing, the level was $1-3\;{\times}\;10^6\;PFU/ml$, which was lower than those of NCDV and UK. Electrophoresis analysis of RNA-RNA hybridization, ELISA, and first and second PCR products of VP7 and VP4 in 1% agarose ($TAE+1{\mu}l$ EtBr) revealed that the rotavirus was a serotype of G6P11.

  • PDF

cDNA Cloning and Expression of Human Rotavirus Outer Capsid Protein VP7 in Insect Cells

  • KANG, DU KYUNG;KI WAN KIM;PYEUNG-HYUN KIM;SEUNG YONG SEOUNG;YONG HEE KIM;ICK CHAN KWON;SEO YOUNG JEONG;EUI-YEOL CHOI;KYUNG MEE LEE
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제8권4호
    • /
    • pp.369-377
    • /
    • 1998
  • Rotavirus is a major cause of severe gastroenteritis in young children and animals throughout the world. The VP7 of rotavirus is thought to induce the synthesis of neutralizing antibodies and to be responsible for determining viral serotypes. The cDNA coding for the VP7 capsid protein of human rotavirus, obtained from Korean patients (HRV-Y14), was cloned and its nucleotide sequence was determined. Comparative analysis of the nucleotide sequences between VP7 of Y14 and that of other foreign isolates showed $92.7~95.2\%$ homology to G1 serotypes (RV-4, KU, K8, WA), $74.2\%$ homolgy to G2 serotype HU-5, $76.4\%$ homology to G3 serotype SA-11, and $77.6\%$ homology to G4 serotype A01321. These data suggest that HRV-Y14 can be classified as a G1 serotype. cDNA coding for VP7 of HRV-YI4 was subcloned into the baculovirus vector and the VP7 glycoprotein was expressed in insect cells. The expressed proteins in Sf9 cell extract and tissue culture fluid were separated on SDS-PAGE, and Western blot analysis with monoclonal antibody raised against the synthetic peptide containing 21 amino acids within the VP7 conserved region was performed. The molecular weight of recombinant VP7 was estimated to be 36 kDa which is about the same size as the native VP7. Addition of tunicamycin in the culture media caused a reduction of the molecular weight of the recombinant VP7 indicating that the expressed protein was glycosylated.

  • PDF

1998-2000년 부산지역 소화기계 바이러스의 탐색 (Detection of Alimentary Tract Viruses in Busan: 1998-2000)

  • 조경순;김영희
    • 미생물학회지
    • /
    • 제37권4호
    • /
    • pp.289-293
    • /
    • 2001
  • 감염성 바이러스의 발생은 세계적인 현상으로 어린이는 물론 성인의 건강을 위협하고 있는 설정이다. 1998년-2000년 사이에 부산지역 바이러스성 전염병 유행예측사업의 과정에서 소화기계 바이러스가 탐색되었다. 의심되는 환자의 대변 및 뇌척수액, 인후가검물에서 세포배양, Latex 응집반응, 간접면역형광항체법, 전자현미경 관찰 등을 행하여 바이러스를 확인하였다. 총 검체 중에서 바이러스의 확인 율은 12.5% 이었다. 이 과정을 통하여 3 사례의 장 adenovirus 및 , 23 사례의 echovirus, 31 사례의 coxsackievirus, 36 사례의 rotavirus, 45 사례의 small round structued virus (SRSV), 7 사례의 poliovirus가 확인되었다. 확인된 주요 혈청형으로는 장 adenovirus 41형 및 echovirus 6, 9, 11, 25, 30형, coxsackievirus B2, B3, B4, B6 형 등이 탐색되었다. 각 바이러스의 월별 발생별로는 SRSV는 12월에서는 다음해 4월 사이, echovirus와 coxsackievirus는 4월에서 10월 사이에, rotavirus는 1월에서 4월사이에 각각 분리 율이 높았다. 전자현미경 관찰에서는 30-80 nm의 작은 크기의 바이러스들이 확인되었다.

  • PDF