• 제목/요약/키워드: Ribosomal intergenic spacer 1

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Cloning and Characerization of the Ribosomal RNA Gene from Gonyaulax polyedra

  • Lee, Hee-Gyun;Lee, Ji-Yeon;Lee, Dong-Hee
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권3호
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    • pp.515-523
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    • 2001
  • The dinoflagellates have some primitive nuclear features and are evolutionarily intermediate between prokaryotes and eukaryotes. The small subunit ribosomal RAN gene, the 5.8S ribosomal RNA gene, and the internal transcribed spacer (ITS) of Gonyaulax polyedra were cloned, and their sequences were analyzed to better understand their evolutionary position. The small subunit ribosomal RNA gene was 1,794 nt long, the large subunit ribosomal RNA gene was approximately 3,500 nt long, and the 5.8S ribosomal RNA gene was 159 nt long. The first internal transcribed spacer (ITS1) was 191 nt long, and the second internal transcribed spacer (ITS2) was 185 nt long. The intergenic spacer of the ribosomal RNA gene (IGS) was about 2,200 nt long, indicating that 5,800 nt of transcribed sequences were separated by roughly 2,200 nt of intergenic spacer. The ribosomal RNA genes were repeated many times and arranged in a head-to-tail, tandemly repeated manner. The repeating unit of ribosomal RNA gene of G. polyedra was proposed to be 8,000 nt long. Based on the lengths of ribosomal RNA, sequence alignments with representative organisms, and phylogenetic analysis on ribosomal RNA, G. polyedra appears to be one of the alveolates branched from the eukaryotic crown and, among dinoflagellates, it seems to not have emerged early.

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Nuclear Ribosomal DNA Intergenic Spacer(IGS) I 영역의 분석에 의한 목질진흙버섯의 계통분류학적 위치 (Phylogenetic Analysis of Nuclear Ribosomal DNA Intergenic Spacer (IGS) I Region of Phellinus linteus)

  • 류영현;이진형;김종국
    • 한국균학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.148-151
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    • 2004
  • 본 연구는 Phellinus linteus와 관련 담자균류 속간의 IGS I 영역의 분석에 기초한 분류체계를 정립하기 위해서 실시하였다. 실험에 사용된 Phellinus linteus 균주의 IGS I 영역은 730 bp였고 다른 담자균류의 IGS I 영역과 비교시 5' 말단부위의 $1{\sim}280\;base$까지는 각 균주들간의 보존성이 높게 나타났으며 3' 말단부위로 갈수록 보존성이 감소하다가 다시 증가하는 경향을 보였다. 담자균류의 IGS 영역에 대한 연구가 앞으로 진행된다면 ITS 영역의 비교와 더불어 새로운 계통분류지표로 이용될 수 있을 것이다.

느티만가닥버섯의 ITS (internal transcribed spacer) 영역의 2차구조 분석 (Secondary Structure of the Ribosomal Internal Transcribed Spacer (ITS) Region of Hypsizygus marmoreus)

  • 우주리;윤혁준;유영현;이창윤;공원식;김종국
    • 생명과학회지
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    • 제23권10호
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    • pp.1260-1266
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    • 2013
  • 본 연구에서는 H. marmoreus 3-10균주와 H. marmoreus 1-1균주의 ribosomal DNA (rDNA) cluster의 분석이 수행되었다. Small subunit (SSU)와 intergenic spacer 2 (IGS 2)는 부분적으로 염기서열이 결정되었고, internal transcribed spacer 1 (ITS 1), 5.8S, internal transcribed spacer 2 (ITS 2), large subunit (LSU), intergenic spacer 1 (IGS 1), 5S는 완전하게 염기서열이 결정 되었다. 팽이버섯 H. marmoreus 3-10균주와 H. marmoreus 1-1균주의 rDNA cluster는 총 7,049 bp로 결정되었다. SSU은 1,796 bp, ITS1은 229 bp, 5.8S은 153 bp, ITS2는 223 bp, LSU은 3,348 bp, IGS1은 390 bp, IGS2은 900 bp로 염기서열이 분석되었다. 결정된 rDNA cluster의 총 7,049 bp 중에서 17 bp가 다름이 확인되었고, 각각 SSU (2 bp), ITS (3 bp), LSU (9 bp), IGS (3 bp)에서 차이를 확인하였다. ITS regions의 2차 구조 결과 5개의 stem-loop가 있음이 드러났다. 흥미롭게도, 이들 stem-loop 사이에서 stem-loop V에서 한 개의 상이한 염기가 다른 2차 구조를 나타냄을 확인하였다.

Fusarium section Liseola 균주들에서 rDNA Intergenic Spacer 부위의 PCR-RFLP 분석 (PCR-RFLP Analysis of Ribosomal DNA Intergenic Spacer Region in Fusarium section Liseola.)

  • 이경은;최영길;민병례
    • 미생물학회지
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    • 제38권1호
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    • pp.7-12
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    • 2002
  • Fusarium section Liseola에 속하는 균주들의 rDNA IGS 부위를 중폭하고 여러개의 제한 효소로 처리하였다. 증폭된 IGS 부위의 길이는 F. moniliforme 12 만이 약 2.9 Kb 이고 나머지 균주들은 모두 약 2.6 Kb였다. 제한 효소 EcoRI, HincII, SalI, PstI 등은 ICS 부위를 절단하여 11균주들에서 9 haplotypes을 확인할 수 있었다. 본 연구에서의 Section Liseola에 속하는 균주들에 대한 결과에 앞서 연구되어진 Section Elegans에 속하는 균주들의 결과를 종합하여 dendrogram을 그렸을 때, IGS 부위를 종내에서와 마찬가지로 종간, section 간의 관계를 밝힐 수 있는 가능성을 제시하여 주었다.

Ribosomal Intergenic Spacer 1 Based Characterization of Button Mushroom (Agaricus bisporus) Strains

  • Kwon, Hyuk Woo;Choi, Min Ah;Kim, Dae Wook;Oh, Youn-Lee;Hyun, Min Woo;Kong, Won-Sik;Kim, Seong Hwan
    • Mycobiology
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    • 제44권4호
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    • pp.314-318
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    • 2016
  • Breeding the button mushroom requires genetic information about its strains. This study was undertaken to genetically characterize four domestically bred button mushroom strains (Saea, Saejung, Saedo, Saeyeon cultivars) and to assess the possibility of using the intergenic spacer 1 (IGS1) region of rDNA as a genetically variable region in the genetic characterization. For the experiment, 34 strains of Agaricus bisporus, two strains of A. bitorquis, and one strain of A. silvaticus, from 17 countries were used. Nucleotide sequence analysis of IGS1 rDNA in these 37 Agaricus strains confirmed that genetic variations exist, not only among the four domestic strains, but also between the four domestic strains and foreign strains. Crossing two different haploid strains of A. bisporus seems to generate genetic variation in the IGS1 region in their off-spring haploid strains. Phylogenetic analysis based on the IGS1 sequence revealed all A. bisporus strains could be differentiated from A. silvaticus and A. bitorquis strains. Five genetic groups were resolved among A. bisporus strains. Saejung and Saeyeon cultivars formed a separate genetic group. Our results suggest that IGS1 could be complementarily applied in the polymorphism analysis of button mushroom.

Cloning and Organization of the Ribosomal RNA Genes of the Mushroom Trichloma matsutake

  • Hwang, Seon-Kap;Kim, Jong-Guk
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제5권4호
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    • pp.194-199
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    • 1995
  • A portion (7.4 kb) of ribosomal DNA tandem repeat unit from a genome of the mushroom T. matsutake has been cloned. A 1.75 kb EcoRI fragment was cloned first using S. cerevisiae 255 rRNA gene as a probe, and this was then used for further cloning. A chromosomal walking experiment was carried out and the upstream region of the 1.75 kb fragment was cloned using SmaI/BamHI enzyme, the size was estimated to be 5.2 kb in length. Part of the downstream region of the 1.75 kb fragment was also cloned using XbaI/BamHI enzymes. Restriction enzyme maps of three cloned DNA fragments were constructed. Northern hybridization, using total RNA of T. matsutake, and the restriction fragments of three cloned DNAs as probes, revealed that all four ribosomal RNA genes (large subunit[LSU], small subunit [SSU], 5.85 and 5S rRNA genes) are present in the cloned region. The gene organization of the rDNA are regarded as an intergenic spacer [IGS]2 (partial) - SSU rRNA - internal transcribed spacer [ITS]1 - 5.8S rRNA - ITS2 - LSU rRNA - IGS1 -5S rRNA - IG52 (partial).

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Sequence and phylogenetic analysis of Intergenic spacer (IGS) region of ten microsporian isolates infecting Indian vanya silkworms (Samia cynthia ricini and Antheraea assamensis).

  • Hassan, Wazid;Surendra Nath, B.
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제33권2호
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    • pp.121-131
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    • 2016
  • Ten microsporidian isolates from Samia cynthia ricini, and Antheraea assamensis in India along with a Nosema reference strain (NIK-1s_mys) from B. mori India were characterised morphologically and molecular based tools. The test isolates observed elongated oval in shape while reference strain was oval and ranging from 3.80 to 4.90 m in length and 2.60 to 3.05 m in width. The ribosomal DNA region 'IGS' of test isolates assessed by PCR amplification, followed by cloning and sequencing. IGS sequence and phylogenetic analysis of test microsporidian isolates showed very close relationship with three Nosema references species: N. philosamia, N. antheraea isolated from Philosamia cynthia ricini and Antheraea perny in China respectively and N. disstriae from Malacosma disstriae in Canada. The clustering pattern of dendogram reveals all test isolates appear distinct from Nosema std. (NIK-1s_mys) India used as reference strain in the study. The result suggests IGS indeed a suitable and highly applicable molecular tool for identifying and characterise the microsporidian isolates in similar population.

3종의 페루산 entomopathogenic fungi의 전자현미경적 구조와 ITS1, 5.8S ribosomal RNA gene, ITS2의 염기서열 다양성 (Comparison of scanning electron microscopic structures and nucleotide sequences variation of ITS1, 5.8S ribosomal RNA gene and ITS2 region in three Peruvian entomopathogenic fungal isolates)

  • 한상훈;남성희;이희삼;여주홍
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제51권2호
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    • pp.137-141
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    • 2013
  • ITS 1, 2, 5.8S ribosomal RNA gene 염기서열 분석과 주사전자현미경 구조 분석을 통해 3종의 페루산 곤충병원성진균들의 동정을 수행하고자 하였다. 이를 위해 두개의 ITS 부위와 5.8S rRNA gene 부위를 포함하는 PCR product를 증폭하여 염기서열 분석을 수행하였으며 분석된 염기서열을 이용하여 NCBI의 BLAST를 이용하여 가장 높은 상동성을 보이는 종들의 ITS1-5.8S-ITS2 염기서열 정보와 비교분석을 위한 근연종들의 염기서열 정보를 다운로드하여 neighbor joining 분석을 수행하였다. 이를 통해 5.8S rRNA 유전자 염기서열은 속 수준에서도 거의 차이를 보여주지 않을 정도로 매우 안정적으로 보존되어 있음을 확인할 수 있었으며 종간 구분이 모호한 결과를 보여주었다. 그와 반대로 ITS 부위의 염기서열은 종에 매우 특이적임을 확인할 수 있었으며, 비교분석에 사용된 Beauveria bassiana strain 간의 차이는 확인할 수 없었다. ITS 염기서열 분석결과를 뒷받침하고자 곤충병원성 진균류의 동정을 위한 분류 key로 사용되는 미세구조 관찰을 위해 주사전자현미경 관찰과 광학현미경 관찰을 통해 B. bassiana 및 Lecanicillium attenuatum의 전형적 구조를 관찰할 수 있었다.

세발당귀(Angelica gigas Jiri)의 판별을 위한 ARMS-PCR용 분자표지 개발 (Development of molecular markers for the differentiation of Angelica gigas Jiri line by using ARMS-PCR analysis)

  • 이신우;이수진;한은희;신용욱;김윤희
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제48권1호
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    • pp.26-33
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    • 2021
  • 당귀는 일반적으로 이용되는 대표적인 다년생의 약용식물이다. 최근 국제적 추세에 따라 자국의 유전자원의 발굴, 보존 등이 강화됨에 따라 인접국가와 국내 자생 당귀 계통을 판별할 수 있는 기준설정에 관한 연구의 필요성이 대두되고 있지만, 분자생물학적 판별 기술의 개발은 아직 미흡한 실정이다. 본 연구에서는 국내 토종 당귀인 참당귀와 세발당귀, 그리고 해외 유래 당귀 종의 기원을 판별하기 위해 핵의 리보솜에 존재하는 ITS 유전자단편에서 SNP를 이용한 판별 프라이머를 확보하였으며, 이를 보완하여 보다 신속하게 판별하기 위하여 ARMS-PCR 기술을 이용한 판별 마커와 그 조건을 확립하였다. 그러므로, 본 연구에서 개발된 SNP 마커는 다양한 지역 또는 국가에서 서식하는 당귀 종들의 신속한 확인을 위해 매우 유용하게 이용될 것으로 생각된다.