옻나무(Rhus verniciflua)는 한국에서 위장병, 변비, 어혈, 구충 등에 효과가 있다고 알려져 있어 민간요법과 보양식품으로 옻닭으로 식용하고 있으나 독성(allergy, 옻 오름)이 심각하여 주의를 요하는 식품이다. 옻의 독성 제거방법을 사용하여 옻나무 껍질을 물로 추출한 후 항산화 작용을 갖는 수용성 물질을 분리하여 물리, 화학적 특성과 기기 분석을 통하여 (UV, IR, EI (HR)-MS, $^1$H-NMR, $^{13}$C-NMR, elemental analyzer) 구조 분석한 결과 gallic acid (3,4,5-hydroxylbenzoic acid) 임을 확인하였다.
옻 allergy 유발물질을 분리하고 그 특성을 연구하기 위하여 국내산, 중국산 및 일본산 생 옻을 사용하였다. 옻의 crude extracts로부터 crude urushiol을 정제하고, 다시 allergy 유발물질로 알려져 있는 3종의 urushiol congeners를 분리하였다. 분리한 urushiol congeners는 RV-1 였으며, 전체의 80%에 해당하였다. RV-1의 함량은 중국산에서 70.07%로 가장 많았으며, 일본산에서 62.38%로 가장 적었다. 반면에 RV-2는 일본산은 9.25%로서 국내산과 중국산의 4.28 및 3.09%에 비하여 약 2$\sim$3 배정도 많았다. Allergy 유발특성을 보면, RV-1은 초기유발강도가 강하고 지속적이어서 회복속도도 늦었다. RV-2는 초기유발강도는 약하지만 회복속도는 늦었다. 반면에 RV-3는 초기유발강도는 비교적 약했지만, 감작 후 48시간 째에 가장 강하게 유발되었고, 회복속도가 빨라서 72시간이 경과하였을 때에는 거의 대조군 수준으로 회복되었다. 따라서 allergy유발에 가장 큰 영향을 미치는 urushiol은 RV-1이었으며, RV-1의 함량이 가장 많은 중국산이allergy의 유발강도가 가장 강하였고 회복속도도 늦음을 알 수 있었다.
옻나무는 독성이 있는 금기물질임에도 불구하고 한국에서는 민간요법으로 옻닭 등의 가공식품 형태로 사용하여 왔다. 항산화 물질은 옻나무 껍질에 물을 가하여 추출하여 분리하였다. 물 추출물은 DEAE, CN, ODS 컬럼을 사용하여 HPLC로 정제하였다. 정제된 순수물질 안정성은 pH 3.0~6.0의 산성영역에서는 안정하였으나, pH 6.5 이상에서는 불안정하였으며, 10$0^{\circ}C$에서 5시간 열처리하여도 80%의 활성을 보였다. 항균력 실험에서는 그람양성, 음성 균주에 대하여 항균 활성이 없었다. 항산화력은 DPPH 방법으로 조사한 결과 동일한 농도에서 (20$\mu\textrm{g}$/m1) BHT, BHC 보다 좋았으나, ascorbic acid 보다 낮았다.
This study investigated the utilization of detoxified Rhus verniciflua (RV) extract as a natural antioxidant to extend the shelf life of chicken breast meat during storage. Pre-heating at (35℃, 100℃, 120℃, and 140℃) was conducted on heartwood of RV prior to extraction to improve its antioxidant activity and remove the allergenic compound urushiol. The antioxidant activity was the highest when RV pre-heated at 120℃ with the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and azinobis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) scavenging activity observed at 62.29 EC50 ㎍/mL and 12.11 IC50 mg/mL, respectively. Pre-heating also significantly increased the total phenolic content (TPC), with the highest improvement was seen at 120℃, 100℃, and 140℃ respectively, wherein 35℃ shared no difference with the raw RV (RRV). Urushiol content was vanished following pre-heating at 120℃ and 140℃. With respect to these result, pre-heating treatment at 120℃ was applied before the extraction of the heartwood of RV. Prepared breast meat sample was dipped into distilled water as a negative control, 0.02% butylated hydroxytoluene (BHT) as positive control, and a solution containing detoxified RV extract (0.10%, 0.25%, 0.50%, 1.00%) at 4℃ for 60 min. Treatment group with 0.50% and 1.00% addition increased the redness and yellowness value on day 6 and day 3 of storage respectively (p < 0.05). The pH value of breast meat was also increased in treatment of 0.50% and 1.00% on day 0, but subsequently lower until end of storge day compared to control negative (p < 0.05). Furthermore, 0.50% treatment exhibited a higher antioxidant activity, stronger inhibition of the microbial growth evaluated by total viable count and maintaining a lower total volatile basic nitrogen among treatments (p < 0.05), unless for BHT and 1.00% treatment groups (p > 0.05). It indicates a similar efficacy of detoxified RV extract with that of positive control treated with BHT. The results of this study suggested that dipping chicken breast meat into a solution containing 0.50% of previously pre-heated RV heartwood at 120℃ could be a promising natural antioxidant for extending the shelf life, and at the same time improve its quality during storage.
본 연구에서는 고지방식이로 비만 유도된 쥐를 대상으로 10주간 옻식초를 급여하였을 때 비만에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 옻식초는 무독화된 옻을 이용하여 알코올 발효 후 아세트산 발효를 거쳐 제조하였으며, 흰쥐를 일반식이(normal chow diet)와 고지방식이(fat 60 %kcal) 섭취군으로 나누어 12주 동안 비만 유도를 한 후 총 5군으로 나누었다. 일반식이와 정제수를 음용한 CON군, 고지방식이와 정제수를 음용한 OB-DW군, 고지방식이와 1% 아세트산을 음용한 OB-AA군, 고지방식이와 1% 옻식초를 음용한 OBRV군, 고지방식이와 0.1% 카페인 용액을 음용한 OB-CF군으로 나누어 총 10주 동안 해당 식이와 실험시료를 공급하였으며, 연구 종료 후 체중, 지방 무게, 지방구 크기 및 개수, 혈액과 간 조직의 지질 profile, 지방조직의 glycerol-3-phosphate dehydrogenase와 lipoprotein lipase(LPL) 효소 활성을 분석하였다. 그 결과 OB-DW군과 비교하여 OBRV군에서 체중 증가량과 식이효율이 유의적으로 감소하였고, 혈중 총 콜레스테롤과 중성지방 함량, 심장동맥경화지수(CRI), LPL 활성이 유의적으로 감소하였으며, 또한 혈중 유리지방산과 분변 중성지방의 함량이 유의성 있게 증가하였다(P<0.05). 항비만 효과를 살펴보기 위해 비만 흰쥐에게 옻식초를 음용시켰을 때 혈청이나 간의 지질 함량을 개선시키고 지질 배설을 증가시켜 부작용 없이 식품소재로서 비만을 일부 개선시키는 효과를 규명하였다.
8주간 옻나무 추출액을 섭취하며 운동을 병행하였을 때 혈중 지질 성분, 인슐린 저항성에 미치는 영향에 대해 연구하였다. 6주된 SD계 수컷 쥐를 대상으로 CON(대조군), RVS(추출액 섭취군), EXE(운동군), 그리고 RVS-EXE(추출액 섭취와 운동 병행군)로 구분하였다. 각 집단의 체중은 EXE(202%)와 RVS-EXE(203%)가 CON(253%)과 RVS(239%)에 비해 통계적으로 유의하게 낮은 증가를 보였다. 저장지방은 옻나무 추출액 혹은 운동에 의해 유의하게 감소하는 것으로 나타났다. 혈중 지질성분은 RVS와 RVS-EXE에서 CON에 비하여 통계적으로 유의하게 개선되는 것으로 나타났다. 혈중 글루코스는 CON에 비하여 다른 집단에서 유의하게 낮은 것으로 나타났으며, 인슐린 역시 동일하였으나, RVS-EXE에서 유의한 상승작용이 나타났다. HOMA 지수는 인슐린과 동일한 결과를 나타내었다. 이와 같은 결과를 종합해 볼 때 옻나무 추출액 섭취와 함께 운동의 병행은 저장지방을 감소시키고 혈중 지질을 억제하며, 인슐린 저항성을 개선시키므로 대사증후군 즉, 당뇨병, 비만, 고지혈증 등을 효과적으로 억제할 수 있다는 점을 시사한다.
본 연구는 LPS 처리 큰포식 세포에서 옻 추출물, 옻 첨가 된장 및 간장 추출물의 항염증 및 산화방지 효과를 확인하였다. 염증 반응은 자극이 가해지면 히스타민, 세로토닌, 프로스타글란딘과 같은 혈관 활성물질에 의해 혈관 투과성이 증대되어 염증을 유발하고 사이토카인, 활성산소종, lysosomal enzyme 등 다양한 매개 인자가 관여한다. 자극에 의한 큰포식세포의 염증반응은 $TNF-{\alpha}$, IL-6, $IL-1{\beta}$와 같은 pro-inflammatory cytokine의 발현이 유도되고, iNOS와 COX-2에 영향을 받는 유전자의 발현을 자극하게 되어 NO 및 $PGE_2$ 등의 염증 인자가 생성된다. 이에 따라 옻 추출물, 옻 첨가 된장 및 간장 추추물의 염증 및 산화방지시스템 관련 유전자 발현을 분석하였다. 그 결과 옻 추출물은 LPS 자극에 의해 생성된 NO, 염증성 사이토카인 및 $PGE_2$의 생성을 유의적으로 감소시켰다. 옻 추출물은 산화방지관련 핵 내 전사인자인 Nrf2 및 관련 유전자의 발현에 영향을 미치지 않았다. 옻첨가 된장 및 간장 추출물은 NO 및 염증성 사이토카인의 생성을 억제하였지만, 염증 및 산화방지관련 유전자의 발현에 영향을 미치지는 않았다.
The Rhus verniciflua contains alkly(en)-catechol type allergens with a saiurated or unsaturated alkly chain of 15 or 17 carbon atoms. It has been recognized as an extremely active allergen causing skin reactions similar In poison ivy. The allergic contact dermatitis induced by the urushiol is known to be mediated be T lymphocytes whicht specifically recognize the hepten urushiol. Therefore. direct use of this plant as a medicinal purpose might imply a considerable hazard in Korea. In this study, using the established method for the detoxification from the stem bark of Rhus verniciflua, an strong antioxidant substance was isolated and characterized DPPH (diphenypricryl hydrazyl) assay measures hydrogen atom-donating activity and hence provides a measure of free radical scavenging antioxidant activity. DPPH, a purple-colored stable free radical, is reduced to yellow-colored diphenylpicryl hydrazine by antioxidants to deducing agents. Antioxidative effects of the water extract from RV were measured by DPPH assay. Twenty microliters of the extract was added to 1ml of 100mM DPPH solution in ethanol The mixture was shaken and left to stand for 10min at room temperature. The crude water extracts was purified by using HPLC method with a DEAE (anionic type), CN, ODS column. The purified compound remained stable at pH 3.0-6,0, but unstable above pH 6.5. It was stable heat at 10$0^{\circ}C$ for 4 hours, but still had about 80% of residual activity after treatment at 10$0^{\circ}C$ for 5 hours. The elemental composition of the HR-EI mass spectrum at m/z 170.02 was estimated the empirical formula as $C_{7}$$H_{6}$$O_{5}$. $C_{10}$$H_4$$O_2$N$_1$, $C_{5}$$H_4$$O_4$N$_3$, $C_{8}$$H_2O$$_1$N$_4$. In antimicrobial test, no inhibition was observed against Gram-positive and negative bacteria. This compound was stronger than that of commercial antioxidant by DPPH test, such as BHT, BHC at the same concentration (20$\mu$g/ml).ml).
Objectives : The aim of this study was to examine anti-thrombotic effect of traditional herbal extracts in a rat model of ferric chloride ($FeCl_3$)-induced carotid arterial thrombosis. Methods : Thirty minutes prior to a 35% $FeCl_3$ application, Sprague Dawley(SD) rats were injected with the 10 types of traditional herbal extracts (100mg/kg, intraperitoneal injection), respectively. The effect of these herbal extracts was examined for time to occlusion(TTO) using the Laser doppler flow meter and measured for thrombus weight (TW) in $FeCl_3$-induced thrombosis model. Results : In the TTO, Salvia miltiorrhiza (Sm, $2.30{\pm}0.28$ min, p<0.001) and Santalum album (Sa, $2.19{\pm}0.19$ min, p<0.001) showed significantly delayed TTO more than twice compared with Saline-treated group. Cnidium officinale (Co), Psoralea corylifolia (Pc), Scutellatia baicalensis (Sba), Panax notoginseng (Pn), Angelica tenuissima (At), Scrophularia buergeriana (Sbu), Rhus verniciflua (Rv) and Picrasma quassioides (Pq), except for Rhus verniciflua (Rv) also meaningfully impeded TTO more than one fold. In addition, Salvia miltiorrhiza, Santalum album, Cnidium officinale, Psoralea corylifolia and Scutellatia baicalensis significantly reduced TW more than 10% compared with Saline-treated group. Especially, Salvia miltiorrhiza and Santalum album showed the most excellent anti-thrombotic effect among the 10 herbal extracts tested on the restoration of altered TTO and TW. Conclusions : These results suggest that Sm and Sa extracts have outstanding anti-thrombotic effect in $FeCl_3$-induced thrombosis model and is potentially useful as herbal medicines for the treatment and prevention of thrombosis.
추출 온도와 시간에 따른 옻나무의 주요 페놀화합물의 함량을 부위별로 분석하고 이들의 효율적인 추출조건을 확립하였다. 옻나무 추출물의 gallic acid 함량은 추출 온도가 증가함에 따라 증가하여 수피의 $160^{\circ}C$, 5시간 처리구에서 385.33 mg%로 가장 높았다. Protocatechuic acid 함량은 수피의 $120^{\circ}C$, 1시간 처리구에서 9.25 mg%로 높았지만 그 이상의 온도에서는 크게 감소하였다. Fustin은 $120^{\circ}C$ 이상에서는 감소하였으며 목질의 $100^{\circ}C$, 3시간 처리구에서 206.97 mg%로 가장 높았다. Fisetin은 추출 온도가 증가함에 따라 증가하여 목질부의 $160^{\circ}C$, 5시간 처리구에서 가장 높았다. Sulfuretin은 fisetin과 유사한 경향을 나타내었으며, 목질부의 $160^{\circ}C$, 3시간 처리구에서 16.40 mg%로 가장 높았다. Butein은 추출 온도 및 추출 시간이 증가함에 따라 증가하였으며, 목질부의 $160^{\circ}C$, 5시간 처리구에서 1.49 mg%로 가장 높았다. 통계분석 결과 옻나무의 주요 페놀화합물 추출에 영향을 미치는 요인은 추출 온도가 가장 큰 것으로 나타났다. 유효성분, 추출 수율, 경제성 등을 감안할 때 옻나무 부위별 효율적인 추출조건은 추출 온도 $140^{\circ}C$와 추출 시간 3시간이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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