인삼부산물 및 인삼밭 토양에서 분리한 9균주 중 𝛽-Glucosidase 생성 균주 GYP-1과 GYP-3-3 균주를 선발하였다. 선발된 𝛽-Glucosidase 생성 균주에 대하여 16S rRNA 유전자 염기서열과 ITS 염기서열을 기반으로 계통 분석을 실시한 결과, GYP-1 균주는 Rhodotorula 속에 속하며, GYP-3-3은 Brachybacterium 속에 속하는 것으로 확인되었다. 특히, Rhodotorula sp. GYP-1 균주는 호기성 효모종으로 biomass 생산량이 높아 최종 우수 균주로 선발하였다. Rhodotorula sp. GYP-1가 생성하는 𝛽-Glucosidase의 온도 및 pH에 따른 효소 활성 및 안정성을 검정한 결과, 30 ℃에서 6.7 unit/ml로 가장 높은 활성을 나타내었고, 20 ℃ ~ 40 ℃에서 효소 활성의 약 70 % 이상을 유지하는 것으로 확인하였다. pH에 따른 효소의 활성 및 안정의 경우, pH 5에서 6.8 unit/ml으로 가장 높은 활성을 나타내었고 pH 5~pH 8까지 93.3 % 이상의 효소 활성을 유지하는 것으로 확인하였다. Rhodotorula sp. GYP-1가 생성하는 𝛽-Glucosidase는 ginsenoside Rb1 minor 진세노사이드로 분해하는 것으로 확인되었다. 또한, 인삼 뿌리 병원균(Botrytis cinerea)에 대해 항진균능을 갖는 것으로 확인되었다.
Rhodotorula sp. CL-82 유래 의 epoxide hydrolase 활성을 이용하여 라세믹 styrene oxide에 대한 입체선택적 가수분해 반응을 실시하였다. Rhodotorula sp. CL-82 생촉매의 입체선택적 가수분해속도를 나타내주는 반응표면 곡선에 대한 분석을 통해 pH, 반응주도, cosolvent 첨가량에 대한 최적조건을 각각 7.6,$33.3^{\circ}C$ , 3%(v/v)으로 결정하였다. 최적반응조건에서 약 4시간 정도의 반응을 통해 ee값이 99% 이상인 광학적으로 순수한 (S)-styrene oxide를 이론 수율대비 40% 수율로 얻을 수 있었다.
알바비스커스 잎으로부터 세포외 지질을 대량 생산하는 효모를 분리하고 동정한 결과 Rhodotorula graminis SW 214로 확인하였으며, $25^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양시 Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량은 7.31g/l였다. 배지내의 질소원과 탄소원의 농도는 세포의 지질 생산에 큰 영향을 주었는데 배지내의 질소원이 효모 성장에 거의 이용되고 탄소원이 아직 남아 있을때 지질 생산이 활발히 이루어졌다. 배지내에 질소원 농도가 높은 동안에는 지질 생산이 더디게 이루어졌다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 gluaminis SW 214 세포의 지질 생산량의 최적조건으로는 glucose 8%, yeast extract 2.5g/l, $KH_{2}PO_{4}\;1g/l,\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O\;0.2g/l$, pH6에서 8일간 배양할 때임을 알 수 있었고 효모건조 균체량은 8.05g/l, 지방 생산량은 8.89g/l였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지질의 TLC에 의한 분별 정량 결과는 triglyceride 75.16%, phospholipid 10.77%, free fatty acid 5.88, esterified sterol 4.94%, free sterol 3.25%였다. Rhodotorula graminis SW 214 세포의 지방의 주된 지방산 조성은 3-hydroxypentadecanate 37.90%, 3-hydroxypentadecanate 20.80%, trans-9-octadecanate 11.53%, cis-9-headecanate 10.93%, 15-methylhexadecanate 9.82%, 18-methylnonadecanate 4.63%, octadecanate 2.64%, 3-hydroxytridecanate 1.75%였다.
The sequences of the D1/D2 region of 26S rDNA from seven Sporobolomyces species, Bensingtonia subrosea, and Rhodosporicium toruloides were determined and compared with those from representatives of the genera Leucosporidium, Rhodosporidium, Rhodotorula, and Sporidiobolus. The five species of Sporobolomyces analyzed were distantly related to a monophyletic clade consisting of species of Sporidiobolaceae and Sporobolomycetaceae. Sporobolomyces falcatus was found to be closely related to Tremella exigua. The members of Sporidiobolaceae and Sporobolomycetaceae were divided into four groups. Group 1 was composed of Leucosporidium scottii and two Rhodotorula species, and group 2 contained three Rhodotorula species. Group 3 was designeate as the Sporobolomyces/Sporidiobolus core group, as it contained Sporidiobolus johnsonii, the type species of Sporidiobolus and the teleomorphic state of Sporobolomyces salmonicolor (the type species of Sporobolomyces). Group 4, named the Rhodotorula/Rhodosporidium core group, included Rhodosporidium toruloides and Rhodotorula glutinis, the type species of the genera Fhodosporidium and Rhodotorula, respectively. The four groups were differentiated on the basis of their physiological characteristics including the assimilation of D-glucosamine, glucuronate, 2-keto-gluconate, L-arabinitol, raffinose, methyl-$\alpha$-glucoside, and satrch. The taxonomy of the genera Leucosporidium, Rhodosporidium, Rhodotorula, Sporidiobolus, and Sporobolomyces will require a major revision when more data becomes available.
지질 생산 효모인 Rhodotorula glutinis K -501이 생산하는 세포외지질(extracellular lipid)의 물리화학적 성질을 조사하여 생체 계면활성제로서의 응용 가능성을 검토하였다. 분석실험 결과 생산된 세포외지질은 당지질계 물질임을 알 수 있었다. 세포외지질의 임계미셀농도와 표면장력은 각각 89mg/L와 31dyne/cm로서 계면활성제로서 매우 우수한 표면활성을 가지고 있었으며 넓은 범위의 pH에서 표면장력의 값은 일정하였다. 상용 계면활성제인 Tween 80과 Triton X-100에 비하여 세포외지질은 각각2-3배 높은 유화도와 1.3배 높은 분산력을 가지고 있었다.
The surface tension-decreasing biosurfactant was purified from Rhodotorula muciloginosa G-1. The purification procedure was the solvent extraction of culture broth. To ensure complete extraction, the sample was extracted twice with equal volume of ethylacetate. The crude solution was washed with n-hexane to remove unconsumed soybean oil. The crude sample of biosurfactant was applied to Silica gel column chromatography equilibrated with chloroform, and eluted with chloroform : methanol gradient. Serveral solvent system was used to developed the thin layer chromatography (TLC). The purified biosurfactant sample gave one spot (Rf 0.78). It was estimated that biosurfactant was glycolipid about having M.W.1,500 with standard of polyethyleneglycol by Sephadex LH-20 column chromatography.
227 red yeast strains were isolated from air (60 isolates), plant flowers (45 isolates), soil (40 isolates), water (37 isolates) and dairy products (45 isolates). On the basis of 33 different physiological and morphological properties, the isolated strains were assigned to 6 species belonging to 4 genera. Rhodotorula mucilaginosa and Cryptococcus albidus were the most dominant species among red yeasts of the air, plant flowers, water and dairy products, whereas Cryptococcus albidus and Rhodotorula glutinis were prevailed in soil. Cryptococcus laurentii was represented by considerable number of strains, whereas the other spesies were of low occurrence. Noteworthy was the isolation of 2 different groups of isolates belonging to Rhodotorula glutinis. These groups were differentiated from each other on the basis of rhamnose, cellobiose and arabinitol assimilation and growth at $37^{\circ}C$. Systematic position of Rhodotorula glutinis was discussed.
Some microorganisms including yeasts produce surface tension-decreasing biosurfactants. The strain G-1, the best producer of biosurfatants was isolated from the soil and identified as Rhodotorula sp., which was not discribed any report. The Rhodotorula sp. G-1 produced biosurfactant from vegetable oils, but failed to produce it from n-alkane or carbohydrate. Yeast extract was found to be more effective for the biosurfactant production as nitrogen source than any other inorganic nitrogen source. The composion of the optimal medium contained the following conponents: soybean oil 4%, glucose 2%, yeast extract 0.5%, KH$^{2}$PO$^{4}$ 0.1%, K$^{2}$HP0$^{4}$ 0.l%, MgSO$^{4}$ 5%, CaCl$^{2}$ 0.01%, NaCl 0.01%, pH 6.0. The surface tension activity was increased to 14% when, at first, the culture broth was fermented with only soybean oil as carbon sourse, and after 90 hours, feeded glucose, than that Of glucose and soybean oil added to it simultaneously. The maxium yield of the biosurfactant was about 15 g/l by after 90 hours, the feeding method of glucose.
경상북도 울릉도와 경상남도 욕지도의 야생화들에 분포하고 있는 효모 종 다양특성을 알아보고자 이들로부터 효모를 분리하고 분자생물학적인 26S rDNA의 D1/D2 영역 염기서열을 확인, 비교하여 동정하였다. 울릉도 야생화들에서는 22종 48균주, 욕지도에서 야생화들로부터는 25종 60균주 효모들을 분리, 동정하였다. 두 섬에서 분리한 효모들 중 Cryptococcus albidus, Cryptococcus laurentii, Metschnikowia reukafii, Pichia scolyti, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula graminis and Rhodotorula mucilaginosa 등 7종이 공통으로 분리되었고 나머지 33종이 두 섬에서 특이적으로 분리되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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