A bacterium DGUM 2011 has been selected from various samples of industrial wastewater and soil. Based on the morphological and physiological characteristics, the isolate DGUM 2011 was identified as Rhodococcus sp. and named as Rhodococcus sp. DGUM 2011. The optimal temperature and pH for the cell growth of Rhodococcus sp. DGUM 2011 were 37$\circ$C and 7.6, respectively. When phenol was added to the minimal media as a sole source of carbon and energy, the concentrations of maximum and optimum for cell growth was 0.10% and 0.08%, respectively. When 0.05% phenol was given in the minimal media, Rhodococcus sp. DGUM 2011 completely utilize it within 24 hrs. The isolate could utilize benzoic acid, p-hydroxybenzoate, p-cresol, tyrosine and phloroglucinol. The isolate possessed both catechol 1,2-dioxygenase and 2,3-dioxygenase activity. However, the activity of catechol 1,2-dioxygenase was much higher than that of 2,3-dioxygenase, which suggests that the isolate might degrade phenol via both ortho- and meta-cleavage, mainly via ortho-cleavage.
Park, Geun-Tae;Son, Hong-Joo;Kim, Jong-Goo;Lee, Sang-Joon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제8권1호
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pp.61-66
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1998
A microorganism which degrades phenol and co-metabolizes trichloroethylene (TCE) was isolated from Yangsan stream after enrichment in a medium containing phenol as the sole carbon source. The isolate EL-43P was identified as the genus Rhodococcus by its morphological, cultural and physiological characteristics. Phenol-induced cells of Rhodococcus sp. EL-43P degraded TCE. Toluene and nutrient broth could not replace the phenol requirement. The optimal conditions of initial pH and temperature of media for growth were 7.0~9.0 and $30~50^{\circ}C$, respectively. Rhodococcus sp. EL-43P could grow with phenol up to 1,000 ppm. Growth was inhibited by phenol at a concentration above 1,500 ppm. It was observed that Rhodococcus sp. EL-43P was able to degrade 90% of phenol (1,000 ppm) after 40 h in a culture. Phenol-induced cells of Rhodococcus sp. EL-43P degraded 95% of $5{\mu}M$ TCE in 6 h. Rhodococcus sp. EL-43P hardly degraded TCE above $100{\mu}M$.
탈황공정에 많이 이용되는 미생물인 Rhodococcus sp. Strain IGTS8이 hexadecane과 배지 수용액 혼합물에서 생성하는 biosurfactant의 성분분석과 계면물성을 연구하였다. TLC를 이용한 정성적 성분분석 결과 생성되는 biosurfactant는 glucose mycolate와 trehalose monomycolate임을 확인하였고 임계 미셀농도는 pH 6∼6.5와 pH 10∼10.5에서 100 mL의 수용액에 biosurfactant가 0.1∼0.15 g 첨가될 때였으며 유화파괴 속도는 pH가 높을수록 증가하였다.
디젤 오염 토양 정화를 위해 식물과 미생물의 상호관계를 활용하는 생물복원에 관한 연구를 수행하였다. 디젤을 분해하는 근권 세균인 Rhodococcus sp. 412와 디젤에 내성을 가지고 있는 식물인 옥수수(Zea mays)를 이용하여 디젤로 오염되어진 토양의 디젤 제거능과 미생물 군집변화를 조사하였다. 실험 개시 30일 후, 디젤 오염 토양에서 Rhodococcus sp. 412를 접종한 토양의 옥수수의 성장이 412균주를 접종하지 않은 토양에서의 옥수수 성장보다 약간 우수하였다. 또한 식물을 식재하거나 412균주를 접종한 토양에서 존재하는 토양에서 디젤의 잔류농도도 낮게 나타났다. 이러한 결과를 디젤 오염 토양 정화를 위해 옥수수와 Rhodococcus sp. 412를 동시에 활용하는 것이 유리함을 의미한다. 토양세균 군집 변화를 16S rDNA-PCR과 DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis) fingerprinting 방법을 이용하여 분석하였다. 비오염 토양 시료와 디젤 오염토양 시료의 DGGE fingerprint의 유사도는 $20.8{\sim}39.3%$이었다. 또한, 비오염 토양 시료 사이의 DGGE fingerprint의 유사도는 $21.9{\sim}53.6%$, 그리고 디젤 오염 토양 시료 사이의 유사도는 $31.6{\sim}50.0%$이었다. 이러한 결과는 디젤 오염으로 인해 토양 세균 군집구조가 영향을 받았음을 시사한다.
Six bacterial strains capable to grow on medium containing cholesterol as sole carbon source were isolated from soil, pork fat and cheese. Three of them were tentatively identified as Rhodococcus species, Rhodococcus sp. CD-1, R. sp. CD-2, and R. sp. CD-3. All the isolates showed a varying amount of cholest-4-en-3-one as the degradation product, and three strains of Rhodococcus spp. showed rapid degradation of cholesterol. Radioisotopic studies revealed that cholesterol was degraded to non-sterol hydrophilic compounds via cholest-4-en-3-one, and presumably to C0$_{2}$- These strains showed two distinct patterns in further degradation of cholest-4-en-3-one. By one group, R. sp. CD-1 and R. sp. CD-3, cholest-4-en-3-one was rapidly converted to non-sterol inter- mediates without significant accumulation of sterol derivatives in the culture broth. In contrast, by another group, R. sp. CD-2, the substantial amount of cholest-4-en-3-one was accumulated indica- ting a lower conversion of the compound to the next metabolites.
Hexane을 유일 탄소 에너지원으로 하여 농화배양한 배양액으로부터 hexane 분해능이 우수한 EH741 균주를 순수 분리 동정하였고, 분리균주에 의한 hexane 생분해 특성을 조사하였다. EH741 균주는 Rhodococcus sp.로 동정되었고, 액상 배양계에서 hexane 용해도를 향상시키기 위해 첨가한 계면활성제 Pluronic F68(PF68)은 hexane 생분해 속도에 영향을 미치지 않았다. Hexane을 유일 탄소원으로 첨가한 무기염 배지에서 EH741의 최대 비성장속도(${\mu}_{max}$)값은 $0.04h^{-1}$이었고, 최대 hexane 분해속도($V_{max}$)와 포화상수($K_s$)는 각각 $161{\mu}mol{\cdot}g-DCW^{-1}{\cdot}h^{-1}$ 및 10.5 mM이었다. Rhodococcus sp. EH741은 hexane 처리를 위한 생물학적 공정에 유용하게 활용될 것으로 사료된다.
본 연구는 방향족 화합물질 중 페놀폐수에 대한 생물학적 처리를 위해 본 실험실에서 분리한 페놀분해능이 우수한 Rhodococrus sp. EL-GT를 이용하여 catechol 분해 catechol 1,2-dioxygenase 분해활성을 측정하였고, 이것이 ortho-pathway임을 확인할 수 있었다. 또한 다른 연구에서 보고된 Rhodococcus rhodochrous NCIMB 13259 균주의 catechol 1,2 dioxygenase를 기초로한 primer를 이용하여 PCR을 수행하였으며 이 분해 유전자의 cloning실험을 수행 중이다. 이들 실험을 통하여 Rhodococcus sp.의 페놀분해균의 유전적 구조 및 특성을 검토하고 밝혀지는 단백질 정보를 이용하여 방향족 화합물의 분해능이 보다 우수한 균주의 개발을 시도하고자 한다.
본 연구에서는 Rhodococcus sp. strain IGTS8을 이용한 미생물 탈황공정에 있어서 비이온 계면활성제인 SPAN의 영향을 조사하였다. 탈황 효율 연구에 있어서 모델 오일로는 DBT가 함유된 hexadecane, 수상으로는 배지 용액을 이용하였다. 연구에 있어서 실험 변수로는 오일/물 혼합물에 있어서 오일의 부피 %, SPAN 20의 농도, 용액의 pH로 하였으며 일반적으로 오일의 부피 비율, 계면활성제의 농도가 증가할 수록 탈황 효율이 감소되었다. 이러한 결과는 오일의 부피비가 증가할수록 계면활성제의 농도가 증가할수록 오일상의 OBT와 균주의 효율적인 접촉이 저해되기 때문으로 고려된다.
Vinclozolin, an endocrine disrupting chemical, is a chlorinated fungicide widely used to control fungal diseases. However, its metabolite 3,5-dichloroaniline is more toxic and persistent than the parent vinclozolin. For the biodegradation of vinclozolin, vinclozolin- and/or 3,5-dichloroaniline-degrading bacteria were isolated from pesticide-polluted agriculture soil. Among the isolated bacteria, a Rhodococcus sp. was identified from a 16S rDNA sequence analysis and named Rhodococcus sp. T1-1. The degradation ratios for vinclozolin or 3,5-dichloroaniline in a minimal medium containing vinclozolin $(200{\mu}ml)$ or 3,5-dichloroaniline $(120{\mu}g/ml)$ were 90% and 84.1%, respectively. Moreover, Rhodococcus sp. T1-1 also showed an effective capability to biodegrade dichloroaniline isomers on enrichment cultures in which they were contained. Therefore, these results suggest that Rhodococcus sp. T1-1 can bioremediate vinclozolin as well as 3,5-dichloroaniline.
본 연구는 방향족 화합물질 중 페놀폐수에 대한 생물학적 처리를 위해 본 실험실에서 분리한 페놀분해능이 우수한 Rhodococcus sp. EL-GT의 catechol 분해시 1,2-dioxygenase 분해활성이 높은 것으로 보아 분해경로가 ortho-pathway임을 알 수 있었다. 향후 Rhodococcus sp. EL-GT의 페놀분해 균의 유전학적 연구를 통하여 방향족 화합물의 분해에 보다 우수한 균으로 개발시켜 효율적인 처리에 이용가능성을 예측할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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