To investigate symbiotic relationship of 'Chunma (Gastrodia elata) and the rhizomorph of Armillaria mellea, volatile organic acids and alcoholic compounds which were considered to be contained in Gastrodia elata were tested to determine stimulatory effects on rhizomorph growth on a chemically defined medium. Also, volatile organic acids were isolated from Gastrodia elata and analyzed by gas chromatography. The growth of rhizomorph was stimulated by the presence of alcohols and volatile organic acids, but acetic acid and methanol were ineffective. In the presence of valeric acid and ethanol, Armillaria mellea produced abundant rhizomorph at concentrations of 0.1 and 1%, respectively. Ethanol and valeric acid supplemented at regular intervals of 3 days as lower concentrations in the medium stimulated the growth of Armillaria mellea. The concentrations of ethanol and valeric acid as low at 0.01% added 3 days intervals for 15 days were more effective than initial concentrations of 0.1 and 1% in stimulating rhizomorph development of Armillaria mellea. Eight kinds of volatile organic acids were identified and quantified by gas chromatography. The major compounds were n-propionic, valeric, iso-carproic and caproic acids, and the minor compounds were iso-butyric, butyric, iso-valeric and hepatanoic acids. Valeric acid was the most abundant among them.
Five strains of Armillaria mellea were collected from the forest of Chonbuk province and isolated from the tissue of fruit bodies. Nutritional and environmental characteristics of mycelial cultivation and rhizomorph production of Armillaria mellea isolated were determined in sawdust media, woody inocula and soils. The sawdust media of Styphnolobium japonicum, Culhamia simplex, Populus monilifera and Populua davidiana were proper for mycelial growth. The ranges of optimum pH, temperature and moisture content for mycelial growth were in the range of $4.5{\sim}5.0$, ${\sim}25^{\circ}C$ and $65{\sim}70%$, respectively. Among the various additives and inorganic salts added, 10% rice bran and 3% $CaCO_3$ were effective to mycelial growth. The woody inocula of Styphnolobium japonicum, Culhamia simplex, Quercus acutissima and Quercus veriabilis were proper for rhizomorph production. The ranges of optimum pH, moisture content and temperature for rhizomorph production were in the range of $4.5{\sim}4.9,$$45{\sim}55%\;(w/w)$ and $20{\sim}24^{\circ}C$, respectively. Distribution of rhizomorphs in soil was varied with depth, but the main concentration occurred in the range of $7.5{\sim}12.5\;cm$. They were rarely found below 25.0 cm.
Armillaria isolates (KNU-A110, KNU-A234, KNU-A1022 and KNU-A1030) were excellent isolates for producing Gastrodia tuber in farm cultivation. Depth of soil between $10\;cm{\sim}19\;cm$ was favorable for producing Gastrodia tuber and rhizomorph at cultivated area. Eighty nine isolates were collected from 5 countries; 16 from Japan, 22 from USA, 26 from France, 4 from Africa and 21 from Korea. Mycelial fan of most isolates were better formed on basal medium with lemon extract than without lemon.A. mellea (KNU-A997) were strongly pathogenic to Gastrodia but A. gallica (KNU-A110) were excellent symbiotic to Gastrodia tuber. Mycelial growth were good on basal medium containing $0.25%{\sim}0.5%$ ethanol and sawdust spawn added wheat bran and corncob. Liquid culture inoculation were not only fast growth of mycelium but also reduction of contamination.
Yoo, Young-Bok;Oh, Jin A;Oh, Youn-Lee;Moon, Jiwon;Shin, Pyung-Gyun;Jang, Kab-Yeul;Kong, Won-Sik
Journal of Mushroom
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v.11
no.2
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pp.63-68
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2013
The fruiting body of honey mushroom, Armillaria gallica, was collected from Gastrodia elata cultivated fields. Pure cultures were isolated from fruiting body tissue of the mushrooms, and cultured on MCM (mushroom complete medium) or PDA (potato dextrose agar) medium. Then, 12 different types of mycelial growth characteristics such as growth rate, colony morphology and rhizomorph formation were obtained. The vitality of the mycelial growth and rhizomorph formation of the fruiting body culture isolates were better on MCM than PDA, suggesting that the optimal culture medium for A. gallica mycelia was MCM. To observe the feature of colony morphology, the subculture of isolates were incubated on MCM. Consequently, we could find the segregated or differentiated colony morphology from isolate type 11 that was similar morphology to isolate type 12. For phylogenetic analysis of the 12 isolates, RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) were performed. The isolate type 12 was not only shown different band patterns of RAPD variation in other 11 isolates, but also commercial strain known as Chunmagyun No. 1. Among the tissue culture isolates of fruiting, strains with better mycelial growth characteristics than Chunmagyun No. 1 were selected. We expect that the new strain can be substituted to commercial strain Chunmagyun No. 1.
One hundred and ninety two isolates of Armillaria were obtained from mycelial fans on infected hosts, rhizomorphs, and single basidiospores or trauma tissue of fruiting bodies. Mating tests showed that two of these isolates were A. mellea, eight were A. tabescens, 20 were A. ostoyae, and 162 were A. gallica. Armillaria ostoyae was mainly isolated from Pinus koraiensis and Qurecus spp., A. tabescens from fruiting bodies on Pinus densiflora and Qurecus spp., and A. gallica from many tree species but not Pinus koraiensis. Armillaria mellea, A. gallica, A. ostoyae and A. tabescens showed distinct protein banding patterns. Mycelial growth and rhizomorph formation was good on basal medium with ethanol added. A. gallica and A. mellea formed many rhizomorphs, but A. ostoyae did not. A. gallica showed the best rhizomorph formation on media with tannic acid and ethanol, but a. mellea formed the most rhizomorphs on gallic acid. Rhizomorphs showed monopodial branching for A. gallica and dichotomous branching for A. ostoyae. Fruiting bodies. formed in the laboratory on sawdust media most abundantly by A. tabescens. In nature, fruit body formation by A. tabescens was from early to mid August. A. ostoyae and A. gallica fruit bodies were formed from early August to late October. While there are common names in Korea for A. mellea and A. tabescens, such as mulberry mushroom relative, no common names are available for A. gallica and A. ostoyae. Therefore, we refer to a. gallica as the Gastrodia mushroom because it has been used to produce Gastrodia and A. ostoyae as the Korean pine mushroom because it is frequently found as mushrooms on Korean pine.
Sung, Jae-Mo;Yang, Kun-Joo;Kim, Soo-Ho;Harrington, Tom
The Korean Journal of Mycology
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v.25
no.1
s.80
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pp.46-67
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1997
From 1985 to 1993, we collected 20 isolates throughout Kangwon and obtained 6 isolates from other sources. A. mellea formed rhizomorph actively, and some of A. osroyae were poor in the formation of rhizomorph and some without formation of rhizomorph. A. tabescens was active in the growth of aerial mycelium and poor in the development of rhizomorph. In A. gallica, the mycelium development among the isolates were variable greatly, and especially in isolate A8(KNU-250), the mycelial development was similar to that of A. osroyae, but A8(KNU-250) showed the feature of A. gallica to change medium into brown color. In PCR-RFLP analysis of the IGS region in rDNA, the homology between each isolate in the A. mellea and A. ostoyae showed 100% homology. A. tabescens showed $0.919{\sim}0.974$ homology, and A. gallica showed $0.619{\sim}1.000$ homology. A19 and A12 showed 100% homology as the same group, but compared with other subgroups they showed less than 10% homology as $0.051{\sim}0.108$ value. In RAPD analyses, the isolates of A. mellea showed high homology among themselves as $0.983{\sim}1.000$, and A. ostoyae also showed high similarity. The homology between isolates of A. tabescens showed $0.594{\sim}0.953$ value because A. gallica showed $0.280{\sim}0.733$ value, and the variations between isolates were greater than other species. Especially, A19 and A22 were identified as new novel group which were remoted from other groups, and the homology between these two isolates showed 0.921 value, and the genetic similarity between these groups and other 4 groups showed less than 7% as $0.012{\sim}0.069$ value. Of 5 species identified in this study, 4 species were identified as A. mellea, A. ostoyae, A. tabescens, and A. gallica that were already reported ones and 1 species was suggested as a new specie in Korea.
Objective: This study investigated the effects of 1,3-1,6 beta-glucan added to the diet of Haidong chicks reared under hypoxic conditions, to ascertain the growth performances, immunity and intestinal morphology changes. Methods: A total of 750 chicks were divided into five groups and fed diets containing 0.5 g/kg, 1.0 g/kg, and 2.0 g/kg 1,3-1,6 beta-glucan from yeast (G1, G2, G3, respectively), 0.2 g/kg Taylor rhizomorph and a control feed. Results: The body weight and body weight gain were higher in chicks fed 1,3-1,6 beta-glucan and Taylor rhizomorph than in control group. Feed conversion ratio significantly differed for G2 and G3 groups in comparison to control group. The relative weight of bursa was higher in G1, G2, and G3 groups. The white blood cells and lymphocytes were significantly increased in groups fed 1,3-1,6 beta-glucan. The immunoglobulin G of serum peak appeared in the G3 group. The villous height of the duodenum was higher in 1,3-1,6 beta-glucan feed groups. In the jejunum, the villous height was higher in G2 and G3 groups and crypt depth for all the groups fed ${\beta}$-glucan. At ileum level the villous height and crypt depth was higher for groups G1, G2, and G3. Conclusion: The growth performance of Haidong chicks is improved when 10 and 20 g/kg 1,3-1,6 beta-glucan is included in the diet; hence, it is suggested that 1,3-1,6 beta-glucan be included in poultry diet to reduce and replace the use of antibiotics.
Sclerotial development of Grifola umbellata(Pers. : Fr.) Donk was investigated through microscopic examinations. The sclerotium of G. umbellata was bumpy and rugged, multi-branched, and dark-brown to black in color. The sclerotial development of G. umbellata was categorized into three stages such as sclerotial initial, development and maturation. Sclerotium development was initiated as the white fungal mass. The superficial part of white sclerotium changed into gray, light brown and then black as its development proceeded further. As a distinctive characteristic of this fungus, a large number of crystals were observed in the medulla layer of sclerotium during its maturation. For development of new sclerotium, G. umbellata formed a white sclerotial primordium on the matured sclerotium. Development of sclerotium in G. umbellata was intimately associated with rhizomorphs of Armillariella mellea and the developing sclerotia were often penetrated by rhizomorphs of A. mellea into medulla layer.
Kim, Yong-Kyoo;Km, Myung-Kon;Yoon, Sook;Hong, Jai-Sik
The Korean Journal of Mycology
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v.28
no.1
/
pp.41-45
/
2000
The histological studies were conducted to investigate the symbiotic relationships between Gastrodia elata and Armillaria mellea by using light and electron microscopes. The fungus, A. mellea, penetrated into the cortex of G. elata, in which endomycorrhizal mycelia in the cortical cells appeared to be dissolved and digested, and seemed to be consequently used as nutritional sources for G. elata growth. Staining of infected tissues revealed that protein- and fat-like substances were localized in the cells. The nuclei of cells infected by the fungal mycelia were hypertrophied 1.5 to 2 times as those without the fungal infection.
The ectomycorrhizal roots were collected from the soils around the bases of basidiocarps of the four edible mushrooms in the stands of Pinus densiflora or Querus acutissima communities (Mt. Wol-Ak in Eastern Chung-Puk): The basidiocarps of Tricholoma matsutake (TM), Sarcodon asparatus (SA), S. imbricatum (SI), and Polyozellus multiplex (PM) are usually collected. The ectomycorrhizal roots of TM, PM and SI were related to the roots of P. densiflora, but the other to the roots of Q. acutissima in Korea. Particularly, the basidiocarps of PM were collected in the mixed stand of both P. densiflora and Q. acutissima. The morphologies of the ectomycorrhizal roots were observed to be the yellowish brown coral (dichromatous) or pyramid types in the roots of the pine, but dark brown un-branched sticks (roots) in the ends of ectomycorrhizal roots of Querus plants. The un-branched roots were covered with the dark mycelia (rhizomorph) around them. Therefore, the ectomyorrhizal roots of PM were observed to have two kinds of types; The single blackish un-branched roots were observed to be attached to the yellowish coral type roots. The bundles of TM mycelia were filled with cortical cells (in the roots of P. densiflora), but the mycelia of the other fungi (Aphylloporales) were massed between the cortical cells of P. densiflora or Q. acutissima. Their anatomical and gross features were considered to be simailar but very important in the ectomycorrhizal roots for these edible mushrooms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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