In order to investigate the safety of Aralia elata extract causing the reduction in the blood glucose level and oxidative stress in diabetes animals, these genotoxicity studies in bacterial and mammalian cell assay system such as Ames bacterial reverse mutation test and chromosomal aberration assay were performed. As results, in Ames bacterial reversion assay the extract in the range of 5,000-625 ug/plate did not induce mutagenicity in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains with and without metabolic activation of S-9 mixture. For chromosomal aberration assay, $IC_{50}$ (50% inhibition concentration of cell growth) of the extract were determined; 792 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ without and 524 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ with S-9 mixture in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell culture. Any significant chromosomal aberration was not observed in CHL cells treated with the extract at the concentrations of 792, 396 and 198 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or 524, 262 and 131 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in the absence or presence of S-9 metabolic activation, respectively. From these results, Aralia elata extract did not induce any harmful effects on the gene in bacteria and mammalian cell system used in these experiments.
Ten species of herbae, which have been used to treat cancers in Chinese medicine, were tested to investigate their mutagenicity or antimutagenicity in S. typhimurium TA97, TA98, TA100, TA1535, and TA1538. Scolopendra centipede was weakly active in reversion of the frameshift mutation in S. typhimurium TA97 strain and the base-pair substitution in TA100 and TA1535 strains. Other herbae such as Coix lachryma, Dianthus superbus, Tricanthoshse kirilowii, Eupatorium formosanum, Lithospermum erythrorhizon, Ansaema japonicum, Curcuma zedoaria, Helicteres angustifolia, and Euonymus sieboldianus did not show any of the mutagenic potential, regardless of the metabolic activation with rat hepatic microsomal fraction. Dianthus superbus, Eupatorium formosanum, and Euonymus sieboldianus exhibited suppressive activities on microbial mutagenesis of N-methyl-N'-nitrosoguanidine, a base-pair substitution mutagen, in TA1535 and TA100 tester strains. The antimutagenic activities of Dianthus superbus and Euonymus sieboldianus appeared to be dose-dependant.
This study was performed to determine the effects of antimutagenicity from Barley (Hordeum vulgare). In Salmonella typhimurium reversion assay (In vitro test), the extract of Barley (Hordeum vulgare) inhibited mutagenic activity of 4-NQO and Trp-p-1 with 59 mix. in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. In Micronucleus test (In vivo test), the methanol extract of Barley (Hordeum vulgare) inhibited micronucleus formation in bone marrow by cyclophosphamide. The $\beta$-glucan of Barley (Hordeum vulgare) showed inhibitory effects of 59-77% in mutagenic activity of 4-NQO by Salmonella typhimurium TA100. The mutagenicity of Trp-p-1 with S9 mix. by Salmonella typhimurium TA98 showed inhibitory effects of 24-56%. The methanl extract (M) was fractionated with ether (MI), ethylacetate (M2), buthanol (M3) and water (M4). The Antimutagenicity of Trp-p-1 with 59 mix. by Salmonella typhimurium TA98 in Barley fraction showed the following: methanol extract (99.58%)>ether fraction (98.05%)>buthanol fraction (56.90%)>water fraction (56.72%)>ethyl acetate fraction (28.72%). Among them, ether fraction in TA 98 showed strong antimutagenicity effects (85.56%, 98.05%) against mutation induced by 4-NQO and Trp-p-1. As concentration of the methanol extract increased (1.25~5 g/kg/10 cc), micronucleus formation in bone marrow by chemical mutagen (CP) showed inhibitory effects of 50% (p< 0.05).
The controversy on genotoxicity of molinate, an herbicide, has been reported in bacterial system, and in vitro and in vivo mammalian systems. To clarify the genotoxicity of molinate, we performed bacterial gene mutation test, in vitro chromosome aberration and mouse lymphoma $tk^{+/-}$ gene assay, and in vivo micronucleus assay using bone marrow cells and peripheral reticulocytes of mice. In bacterial gene mutation assay, no mutagenicity of molinate ($12-185{\mu}g/plate$) was observed in Salmonella typhimurium TA 98, 100, 1535 and 1537 both in the absence and in the presence of S-9 metabolic activation system. The clastogenicity of molinate was observed in the presence ($102.1-408.2\;{\mu}g/mL$) of metabolic activation system in mammalian cell system using Chinese hamster lung fibroblast. However, no clastogenicity was observed in the absence ($13.6-54.3\;{\mu}g/mL$) of metabolic activation system. It is suggested that the genotoxicity of molinate was derived some metabolites by metabolic activation. Molinate was also subjected to mouse lymphoma L5178Y $tk^{+/-}$ cells using microtiter cloning technique. In the absence of S-9 mixture, mutation frequencies (MFs) were revealed $1.4-1.9{\times}10^{-4}$ with no statistical significance. However, MFs in the presence of metabolic activation system revealed $3.2-3.4{\times}10^{-4}$ with statistical significance (p<0.05). In vivo micronucleus (MN) assay using mouse bone marrow cells, molinate revealed genotoxic potential in the dose ranges of 100-398 mg/kg of molinate when administered orally. Molinate also subjected to acridine orange MN assay with mouse peripheral reticulocytes. The frequency of micronucleated reticulocytes (MNRETs) induced 48 hr after i.p. injection at a single dose of 91, 182 and 363 mg/kg of molinate was dose-dependently increased as $10.2{\pm}4.7,\;14.6{\pm}3.9\;and\;28.6{\pm}6.3\;(mean{\pm}SD\;of\;MNRETs/2,000\;reticulocytes)$ with statistical significance (p<0.05), respectively. Consequently, genotoxic potential of molinate was observed in in vitro mammalian mutagenicity systems only in the presence of metabolic activation system and in vivo MN assay using both bone marrow cells and peripheral reticulocytes in the dose ranges used in this experiment. These results suggest that metabolic activation plays a critical role to express the genotoxicity of molinate in in vitro and in vivo mammalian system.
This study was carried out to perform genotoxicological safety evaluation of crude antifungal compounds produced by Bacillus subtilis SN7 (B. subtilis SN7) isolated from meju. Bacterial reverse mutation assay with Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, and TA1537 or Escherichia coli WP2uvrA in the presence and absence of the S9 metabolic activation system was carried out, and the crude antifungal compounds produced by B. subtilis SN7 showed no significant increase in the number of revertant colonies. In the chromosomal aberration tests using Chinese hamster lung (CHL) cells, sample treatment groups showed no increase in the frequency of chromosome aberrations compared to the negative control group. Furthermore, in the micronucleus formation test, the crude antifungal compounds showed no significance increase in the frequency of polychromatic erythrocytes with micronuclei. These results suggest that the crude antifungal compounds produced by B. subtilis SN7 isolated from meju showed no harmful genotoxic effects.
In spore rec-assay using B. subtillus H17(rec) and M 45(rec) , the ethanol extract of buckwheat leaves showed antimutagenicity in condition of low concentrations, but its did comutagenicity in condition of high concentrations. In Ames test, the ethanol extract of buckwheat leaves reduced the mtabenicity of N-methyl-N' -nitro-N-nitrosoguaidine (MNNG), benzo (a) pyrene(B($\alpha$)P), 2-amino-fluorene(2AF), and 3-amino -1, 4-dime-thyl-5-H-pyrido(4, 3-b) indol(Trp-P-1) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. The ethanol extract was fractionated by hexane, ethylacetate, butanol and water. Among Them hexane fraction showed the highest inhibition rate on the mutagenicity of B($\alpha$)P, and so did chloroform fraction on the mutagenicity of MNNG in S. typhimurium Ta98 and TA100. To elucidate the antimutagenic mechanism of the ethanol extract, it was mixed and co-incubated with various metagens, S9 mix, and the bacteria with different experimental orders and different reaction times. The ethanol extract did not affect reversion rate of pre-mutated. S.typhimurium. However, when the ethanol extract was added to the mutagens before their interaction with S.typhimurium , it reduced the mutation rate to 152$\pm$12-273$\pm$18 colonies/plates in case of MNNG, and 135$\pm$13-195$\pm$10 colonies/ plates in case of B($\alpha$)P), showing strong desmutagenic activity.
Kim, Youn-Jung;Park, Hyo-Joung;Kim, Young-Soo;Kim, Mi-Kyung;Lee, Seung-Ho;Jung, Sang-Hun;Ryu, Jae-Chun
한국환경성돌연변이발암원학회지
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제21권2호
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pp.99-105
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2001
Sophoricoside was isolated as the inhibitor of IL-5 bioactivity from Sophora japonica (Leguminosae). It has been reported to has an anti-inflammatory effect on rat paw edema model. To develope as an anti-allergic drug, genotoxicity of sophoricoside was investigated in bacterial and mammalian cell system such as Ames bacterial reversion test, chromosomal aberration assay and single cell gel electrophoresis (Comet) assay. As results, in the range of 1,250~40 $\mu\textrm{g}$/plate sophoricoside concentrations was not shown significant mutagenic effects in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains in Ames test. The 80% cell growth inhibition concentration (IC/SUB 80/) of sophoricoside was determined as above 5,000 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell and L5178Y mouse lymphoma cell line for the chromosomal aberration and comet assay, respectively. Sophoricoside was not induced chromosomal aberration in CHL fibroblast cell at concentrations of 700, 350 and 175 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or 600, 300 and 150 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in the absence or presence of S-9 metabolic activation system, respectively. Also, in the comet assay, the induction of DNA damage was not observed in L5178Y mouse lymphoma cell line both in the absence or presence of S-9 metabolic activation system. From these results, no genotoxic effects of sophoricoside were observed in bacterial and mammalian cell systems used in these experiments.
The isolated plantamajoside from Plantago asiatica that is often used as a marker compound in chemotaxonomic studies has various bioactivites such as the inhibitions of cyclic AMP phosphodi-esterase and 5-lipoxygenase, microbial growth and inflammation, and currently demands the generation of toxicity data. The purpose of this study was to examine the toxicities of the single and 14 days repeated dose toxicity in Sprague-Dawley rats orally administrated with plantamajoside at dose levels of 0, 500, 1000, and 2000 mg of dried material/kg body weight/day. The results showed that there was no difference in body weight change, food intake, water consumption, or relative organ weight among different dose groups. Also we observed no death and abnormal clinical signs were observed during the experimental period. Between the groups orally administered Plantago asiatica and the control group, there was no statistical significance in hematological test or serum biochemical values. There were no gross findings at final sacrifice. There was no evidence of histopathological alteration mediated by 14 days treatment with Plantago asiatica. These results suggest that no observed adverse effect level (NOAEL) of the oral application was considered to be more than 2000 mg/kg in rats under the conditions employed in this study. Another observation was performed to investigate the safety of Plantago asiatica in respect of genotoxicity. This substance was examined that Salmonella typhimurium reversion assay (Ames test) in strain TA98, TA100, TA1535. In the reverse mutation test, Plantago asiatica did not induce mutagenicity in Samonella typhimurium with and without metabolic activation. These results indicated that Plantago asiatica had no genotoxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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