Neurodegenerative diseases are characterized by distinct protein aggregates, such as those of α-synuclein and tau. Lysosomal defect is a key contributor to the accumulation and propagation of aberrant protein aggregates in these diseases. The discoveries of common proteinopathies in multiple forms of lysosomal storage diseases (LSDs) and the identification of some LSD genes as susceptible genes for those proteinopathies suggest causative links between LSDs and the proteinopathies. The present study hypothesized that defects in lysosomal genes will differentially affect the propagation of α-synuclein and tau proteins, thereby determining the progression of a specific proteinopathy. We established an imaging-based high-contents screening (HCS) system in Caenorhabditis elegans (C. elegans) model, by which the propagation of α-synuclein or tau is measured by fluorescence intensity. Using this system, we performed RNA interference (RNAi) screening to induce a wide range of lysosomal malfunction through knock down of 79 LSD genes, and to obtain the candidate genes with significant change in protein propagation. While some LSD genes commonly affected both α-synuclein and tau propagation, our study identified the distinct sets of LSD genes that differentially regulate the propagation of either α-synuclein or tau. The specificity and efficacy of these LSD genes were retained in the disease-related phenotypes, such as pharyngeal pumping behavior and life span. This study suggests that distinct lysosomal genes differentially regulate the propagation of α-synuclein and tau, and offer a steppingstone to understanding disease specificity.
This study was conducted to determine the protein requirement level in growing Jindo dog through nitrogen balance experiment. Twelve female dogs aged 18~20 weeks old were allotted one of 3 dietary treatments containing 21, 23 and 25% of crude protein. Average daily gain of dogs fed experimental diets containing 21, 23 and 25% of crude protein were 65.42, 79.58 and 99.17g/d, respectively, and there was a significant difference between 21 and 25% of crude protein treatments(p<0.05). Retained nitrogen were calculated 0.74, 0.96 and 1.31g/kgBW.75/d for dogs fed diets containing 21, 23 and 25% of crude protein, respectively, and were significantly higher(p<0.05) in dogs fed 25% of crude protein diet then those of other dogs. A quadratic regression equation was calculated between nitrogen intake(x) and nitrogen retention(y); y=-2.519x2+12.79x-14.79, and it was found a significantly(p<0.05) higher regression coefficient of 0.782. From the above equation, it was estimated maintenance requirement of crude protein for growing Jindo dog is 11.25g/kg BW.75/d.
Three beef steers fitted with permanent cannulae in the rumen and duodenum were used to determine the effects of protein supply from soyhulls (SH) and wheat bran (WB) on ruminal metabolism, blood metabolites, nitrogen metabolism, nutrient digestion and concentrations of soluble non-ammonia nitrogen (SNAN) in ruminal (RD) and omasal digesta (OD). In a 3${\times}$3 Latin square design, steers were offered rice straw and concentrates formulated either without (control) or with two brans to increase crude protein (CP) level (9 vs. 11% dietary DM for control and bran-based diets, respectively). The brans used were SH and WB that had similar CP contents but different ruminal CP degradability (52 vs. 80% CP for SH and WB, respectively) for evaluating the effects of protein degradability. Ruminal ammonia concentrations were higher for bran diets (p<0.01) than for the control, and for WB (p<0.001) compared to the SH diet. Similarly, microbial nitrogen and blood urea nitrogen were significantly increased (p<0.05) by bran and WB diets, respectively. Retained nitrogen tended (p<0.082) to be increased by SH compared with the WB diet. Intestinal and total tract CP digestion was enhanced by bran diets. In addition, bran diets tended (p<0.085) to increase intestinal starch digestion. Concentrations of SNAN fractions in RD and OD were higher (p<0.05) for bran diets than for the control, and for WB than for the SH diet. More rumendegraded protein supply resulting from a higher level and degradability of CP released from SH and WB enhanced ruminal microbial nitrogen synthesis and ruminal protein degradation. Thus, free amino acids, peptides and soluble proteins from microbial cells as well as degraded dietary protein may have contributed to increased SNAN concentrations in the rumen and, consequently, the omasum. These results indicate that protein supply from SH and WB, having a low level of protein (13 and 16%, respectively), could affect ruminal metabolism and nutrient digestion if inclusion level is relatively high (>20%).
On the basis of the concept retained in nutition label(NL) the consumer's perception use and demand on NL nutrition knowledge(NH) purchase of nutrient controlled food and dietary modification for health were examined. The subjects were 1203 house wives mainly in the age of 30-40 and self administered questionnaire was employed. The results were as follows. Subjects' demand on nutrition information was greater while the availablity and usefulness of NL was unsatisfactory. The purchase frequencies of nutrient controlled foods were higher compared to NL reading. The use comprehenison reliability of nutrition information were better in high NK group compared to low NK group except the reliability on health claims. The required nutrients for content information were in the order of calorie Ca cholesterol Fe protein and total fat. The demand for nutrient content information was carrelated with intention of subjects' dietary modification but not the use of NL. These results indicate that NL be a good source of nutrition information and the consumers' demand for NL was based on their dietary purpose though the use of NL was unconfirmed.
One of the interesting trends in genome research is the study about epigenetic modification above single gene level. Epigenetics refers study about heritable change in the genome, which accompany modification in DNA or Chromatin besides DNA sequence alteration. We used to have the idea that the coding potential of the genome lies within the arrangement of the four bases A, T, G, C; However, additional information that affects phenotype is stored in the distribution of the modified base 5-methylcytosine. This form of information storage is flexible enough to be adapted for different somatic cell types, yet is stable enough to be retained during mitosis and/or meiosis. Epigenetic modification is a modification of the genome, as opposed to being part of the genome, so is known as "epigenetics"(Greek for "upon" genetics). This modification could be methylation on Cytosine base or post translational modification on histone protein(methylation, acetylation, phosphorylation, Sumoylation)($Dimitrijevi\hat{E}$ et al 2005). In this review, we would like to focus on the relationship of DNA methylation and cancer.
The covalent conjugation of human recombinant superoxide dismutase (hrSOD) with trichloros-triazine activated polyethylene glycol (PEG) 5000 formed soluble conjugates with molecular weight of 92KD, which retained $90{\sim}98%$ of original activity with a markedly prolonged plasma half-life of enzyme activity. The effect of hrSOD-PEG conjugates on acetaminophen (ACP)-induced hepatotoxicity was tested in male rats which were pretreated with 3-methylcholanthrene. HrSOD-PEG conjugates inhibited the hepatotoxicity produced by ACP, on the other hand, native hrSOD had no protective effect. The above results indicated that oxygen radicals might participate in the mechanism of the ACP-induced hepatotoxicity and that polymer conjugated-protein drugs with prolonged half-lives could be employed as an effective therapeutic agent.
A modification of a microbiological assay of vitamin $B_{12}$ was made and used to determine the vitamin levels during kimchi fermentation. A cyanide-buffer solution of pH 6.0 replaced the metabisufite-buffer specified in the A.O.A.C. method. The vitamin $B_{12}$ activity was decreased by blending kimchi samples for 5 minutes and retained the activity by steaming for 10 minutes before blending. The alkali hydrolysis of kimchi at pH 12.0 for 30 minutes at $121^{\circ}C$ was sufficient to destroy the vitamin $B_{12}$ and permit the detection of analogs with the same assay organism. Vitamin $B_{12}$ reached a maximum of 47ng/100g during the fermentation of kimchi ${15}\;4^{\circ}C.$ Inoculation of the kimchi with Propionibacterium shermanii (ATCC 13673) increased the vitamin production to a maximum of 102ng/100g at 1 week of fermentation. Soy flour (0.5%) or beef extract (0.05%), which were regarded as protein sources, added to the inoculated kimchi further increased the vitamin $B_{12}$ activity to 197 and 203ng/100g.
Dietary powder from Plantaginis ovatae testa was prepared by mechnical milling/grinding of the outer layer of the seed. The crystalline/surface structures of its powder (100 mesh) were examined, and several physical functionalities including, water capacity, oil holding capacity, emulsion/foam properties and physiological functionality such as in-vitro glucose and bile acid retarding effects were also investigated. Water holding capacity(WHC) of psyllium powder was $33.71{\pm}0.10g$ water retained/g solid at room temperature, whileas oil holding capacity(OHC) for soybean or rice bran oil were about 1.80g oil retained/g solid. These values of WHC and OHC were about 5.6 times higher and 2.8 times lower than those of commercial ${\alpha}$-cellulose, respectively. Changes of pH showed a small effect on WHC, but WHC increased with temperature. Emulsion capacity of 2%(w/v) psyllium was about 60% level of 0.5%(w/v) xanthan gum but emulsion stability after incubation of 24 hours showed about 1.4 times improvement of xanthan gum(0.5%,w/v). Also, psylliume(above 2%, w/v) alone had higher foam capacity than that of xanthan(1.1 times) and especially, 1 or 2% addition of psyllium improved the foam stability of protein solution(1% albumin+0.5% $CaCl_2$) by factor of 3.3 and 6.0 times, respectively. The glucose and bile acid retarding effects of psyllium powder were relatively very excellent suggesting the prevention from diabetes and arteriosclerosis. Especially, psyllium showed the 3.7 and 3.3 times higher effect on in-vitro glucose and bile acid retardation than those of commercial ${\alpha}$-cellulose, respectively.
Kim, Kyung-Ju;Jung, Hae Yoen;Oh, Mee-Hye;Cho, Hyundeuk;Lee, Ji-Hye;Lee, Hyun Ju;Jang, Si-Hyong;Lee, Moon Soo
Journal of Gastric Cancer
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v.15
no.3
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pp.201-208
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2015
Purpose: The AT-rich interactive domain 1A (ARID1A ) gene encodes BRG1-associated factor 250a, a component of the SWItch/Sucrose NonFermentable chromatin remodeling complex, which is considered a tumor suppressor in many tumors. We aimed to investigate the prognostic significance of ARID1A expression in gastric cancers and explore its relationship with clinicopathologic parameters such as mismatch repair protein expression. Materials and Methods: Four tissue microarrays were constructed from 191 resected specimens obtained at Soonchunhyang University Cheonan Hospital from 2006 to 2008. Nuclear expression of ARID1A was semiquantitatively assessed and binarized into retained and lost expression. Results: Loss of ARID1A expression was observed in 62 cases (32.5%). This was associated with more frequent vascular invasion (P=0.019) and location in the upper third of the stomach (P=0.001), and trended toward more poorly differentiated subtypes (P=0.054). ARID1A loss was significantly associated with the mismatch repair-deficient phenotype (P=0.003). ARID1A loss showed a statistically significant correlation with loss of MLH1 (P=0.001) but not MSH2 expression (P=1.000). Kaplan-Meier survival analysis showed no statistically significant difference in overall survival; however, patients with retained ARID1A expression tended to have better overall survival than those with loss of ARID1A expression (P=0.053). In both mismatch repair-deficient and mismatch repair-proficient groups, survival analysis showed no differences related to ARID1A expression status. Conclusions: Our results demonstrated that loss of ARID1A expression is closely associated with the mismatch repair-deficient phenotype, especially in sporadic microsatellite instability-high gastric cancers.
Banik, Samudra Prosad;Pal, Swagata;Chowdhury, Sudeshna;Ghorai, Shakuntala;Khowala, Suman
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.4
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pp.412-420
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2011
Secretion of cellobiase occurred in a brefeldin A (BFA) uninhibited manner in the filamentous fungus Termitomyces clypeatus. Fluorescence confocal microscopy revealed that application of the drug at a concentration of 50 ${\mu}g$/ml caused arrest of Spitzenkorper assembly at the hyphal tip. This resulted in greater than 30% inhibition of total protein secretion in the culture medium. However, the cellobiase titer increased by 17%, and an additional 13% was localized in the vacuolar fraction en route secretion. The secretory vacuoles formed in the presence of the drug were also found to be bigger (68 nm) than those in the control cultures (40 nm). The enzyme secreted in the presence and absence of BFA revealed a single activity band in both cases in native PAGE and had similar molecular masses (approx. 120 kDa) in SDS-PAGE. The BFA enzyme retained 72% of native glycosylation. It also exhibited a higher stability and retained 98% activity at $50^{\circ}C$, 93.3% activity at pH 9, 63.64% activity in the presence of 1M guanidium hydrochloride, and 50% activity at a glucose concentration of 10 mg/ml in comparison to 68% activity, 75% activity, 36% activity, and 19% activity for the control enzyme, respectively. The observations collectively aimed at the operation of an alternative secretory pathway, distinct from the target of brefeldin A, which bypassed the Golgi apparatus, but still was able to deliver the cargo to the vacuoles for secretion. This can be utilized in selectively enhancing the yield and stability of glycosidases for a successful industrial recipe.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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