Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein hormone secreted from primarily cells of the peritubular capillary endothelium of the kidney, and is responsible for the regulation of red blood cell production. We constructed and expressed dimeric cDNAs in Chinease hamster ovary (CHO) cells encoding a fusion protein consisting of 2 complete human EPO domains linked by a 2-amino acid linker (Ile-Asp). We described the activity of dimeric hyperglycosylated EPO (dHGEPO) mutants containing additional oligosaccharide chains and characterized the function of glycosylation. No dimeric proteins with mutation at the $105^{th}$ amino acid were found in the cell medium. Growth and differentiation of the human EPO-dependent leukemiae cell line (F36E) were used to measure cytokine dependency and in vitro bioactivity of dHGEPO proteins. MIT assay at 24 h increased due to the survival of F36E cells. The dHGEPO protein migrated as a broad band with an average molecular mass of 75 kDa. The mutant, dHGEPO, was slightly higher than the wild-type (WT) dimeri-EPO band. Enzymatic N-deglycosylation resulted in the formation of a narrow band with a molecular mass twice of that of of monomeric EPO digested with an N-glycosylation enzyme. Hematocrit values were remarkably increased in all treatment groups. Pharmacokinetic analysis was also affected when 2.5 IU of dHGEPO were intravenously injected into the tails of the mice. The biological activity and half-life of dHGEPO mutants were enhanced as compared to the corresponding items associated the WT dimeric EPO. These results suggest that recombinant dHGEPO may be attractive biological and therapeutic targets.
This study investigated that exposure of male mice to estrogen receptor $\alpha$-selective agonist, 4,4',4"-(4-propyl-[1H]-pyrazole-1,3,5-triyl)tris-phenol (PPT) induce morphological changes of accessory genital glands. The male reproductive organs were fixed and processed for light microscopy. The PPT induced decreases of ventral prostates, seminal vesicles and preputial glands weights with experimental time. The glandular lumen of ventral prostate was atrophied compared with control group. Type of epithelial tissues in the prostate was changed from simple columnar epithelium to stratified cuboidal or squamous epithelium. Treated group with the agonist showed that increased connective tissue underlying epithelium in the prostate and seminal vesicle. Especially, the glandular lumen of the seminal vesicle was contracted when PPT-treated animals were compared with control group. Secretion cells of preputial gland were smaller than that of control group. On week 8, PPT treatment caused decrease of epithelial cell height lining the lumen of preputial gland. These results provide information useful in researching the physiological function of estrogen mediated by estrogen receptor $\alpha$ in male accessory genital gland.
Kim, Joo-Heon;Lee, Young-Jeon;Lee, Sang-Un;Suzuki, Takao;Lee, Sang-Kil;Kang, Tae-Young;Hong, Yong-Geun
Reproductive and Developmental Biology
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v.34
no.2
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pp.81-88
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2010
Our objective of current study was to investigate the development of bone and heart in association with diabetes mellitus (DM). DM was induced by administering an intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ; 60 mg/kg) to 4-week-old Sprague-Dawley rats. Body weight and blood glucose were monitored, and rats were sacrificed after 2 or 5 weeks. The left ventricle (LV), including the interventricular septum, was weighed, and body weight and tibial bone length were assessed. Young diabetic rats showed reduced growth in terms of tibial length and body weight compared to controls. Moreover, diabetic males showed more significant growth suppression and reduced LV size than diabetic females. Morphometric analysis of tibiae from diabetic rats revealed suppressed bone growth at 2 and 5 weeks, with no difference between genders. STZ-induced diabetes decreased bone growth and retarded pre-pubertal heart development. As a result, diabetes may increase cardiovascular risk factors and lead to eventual heart failure. Therefore, new therapeutic approaches are required for diabetic children exhibiting growth retardation. Heart growth factor, exercise, and cardiopulmonary physical therapy may be required to promote heart development and physiological function.
Kim, Myeong-Ok;Koh, Phil-Ok;Kim, Jin-Hyun;Chung, Ki-Myung;Kang, Sang-Soo;Park, Wan-Sung
Animal cells and systems
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v.4
no.2
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pp.173-179
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2000
Evidence suggested that atypical antipsychotics (APs) such as clozapine show less side effects than those of typical APs such as haloperidol and sulpiride. However, little is known about chronic effects of these drugs on changes in gonadotropin releasing hormone (GnRH) mRNA expression and luteinizing hormone (LH) immunoreactivity. Male rats were divided into water-, haloperidol-, sulpiride-, and clozapine-treated groups, and these drugs were administered orally for 4 weeks. The changes in the expression of GnRH mRNA and the LH immunoreactivity were determined in the hypothalamus and pituitary, respectively, using in situ hybridization and immunohistochemistry. GnRH mRNAs were clearly expressed in the water-treated control vats. This was significantly reduced by the chronic treatments with the typical APs, especially with haloperidol, but not with atypical APs clozapine. Likewise, LH immunoreactivity was clearly stained in the control group. While its immunoreativity was significantly reduced by the chronic APs treatments, clozapine treatment showed only slight attenuation. The results show that the atypical APs clozapine has less side effects in the gonadal function than the typical APs haloperidol and the sulpiride. These results suggest that clozapine is a safer drug than the typical APs, at least in the reproductive system.
Endometritis is one of the primary reasons for reproductive failure. In order to investigate endometritis-associated marker proteins, proteomic analysis was performed on bovine endometrium with endometritis. In bovine endometritis, desmin, $\alpha$-actin-2, heat-shock protein (HSP) 27, peroxiredoxin-6, luteinizing hormone receptor isoform 1, collectin-43 precursor, deoxyribonuclease-I (DNase-I), and MHC class I heavy chain (MHC-Ih) were up-regulated. In contrast, transferrin, interleukin-2 precursor, hemoglobin $\beta$ subunit, and potassium channel tetramerisation domaincontaining 11 (KCTD11) were down-regulated in comparison to normal endometrium. The proteomic results were validated by semiquantitative-PCR and immunoblot analysis. The mRNA levels of desmin, transferrin, $\alpha$-actin-2, HSP27, KCTD11, and MHC-Ih were up-regulated by over 1.5-fold, and showed a pattern similar to their proteomic profiles. Desmin and $\alpha$-actin-2 protein showed positive correlations between proteomic analysis and immunoblot analysis. These results suggest that desmin and $\alpha$-actin-2 may play important roles in endometritis-related function, and could be useful markers for the diagnosis of bovine endometritis.
The principle objective of this study is to determine factors affecting social participation for physically disabled people with musculoskeletal conditions (spinal cord injury, muscular dystrophy, osteogenesis imperfecta, rheumatoid arthritis) in South Korea using ICF relevant categories of the international classification index by WHO. The subjects of this study 352 people with physical disabilities, the data were collected using ICF component(body functions, body structures, activities and participation and environmental factors) and the relevant categories deprived from ICF core sets. The collected data were evaluated with descriptive analysis, ANOVA, correlation analysis, and multiple regression analysis. The results of this study can be summarized as follow. The mental function, Neuromusculoskeletal and movement-related functions, Genitourinary and reproductive functions, Skin and related structures, Learning and applying knowledge, General tasks and demands, and Mobility positively influenced social participation in people with musculoskeletal conditions. However individual factors and environmental factors didn't statistically significant affect on social participation. The implications of the study is to examine by ICF components of universal approach on disability study and utilized the relevant ICF categories as measurement tools.
We investigated the effects of maternal and paternal parentage, and ovule position in a pod on seed development, weight, and progeny performance, using an annual crop commonly called cowpea (Vigna unguiculata L.). The experiment was conducted in a greenhouse. Nine maternal parents were randomly selected, and 3 individuals were chosen as paternal parents based on the male fitness components. Five types of hand-pollination were attempted on each flower of the maternal plants to evaluate the influence of paternal identify. Independent variables such as parentage and ovule position affected the pattern of seed development. Ovules in the middle position of the pod exhibited a much higher probability of seed maturation than those at the stylar and basal positions, confirming the position effect. These independent variables also appeared to exert a significant effect on seed weight, although it was not possible to evaluate the relative importance of those variables due to a significant interaction between parents. Mixed pollination tended to yield heavier seeds than other paternal parents. Ovules in the middle and basal end positions produced heavier seeds than those at the stylar end regardless of maternal and paternal parentage. Seed weight was independent of all measurements of progeny performance. At week 2 after germination significant paternal effects were found to be mediated through the ovule position in a pod. In particular, the progeny derived from self-pollination performed worse than the progeny from other paternal parentage. The progeny performance at week 4 after germination was affected by maternal parents independently of seed weight. These results show that paternal and maternal effects were quite consistent from the seed development to early growth of the progeny. Consequently, maternal and paternal effects on seed development and weight, and progeny performance may reflect, at least to some extent, genetic contribution of both parents. If so, it is possible for sexual selection on maternal and paternal function to generate the evolution of reproductive traits related to seed production.
Seo, Hee-Won;Kim, Min-Goo;Choi, Yo-Han;Ka, Hak-Hyun
Reproductive and Developmental Biology
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v.33
no.3
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pp.147-152
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2009
Lysophosphatidic acid (LPA), a simple phospholipid-derived mediator implicated in diverse biological actions, acts through the specific G-protein coupled receptors, LPA receptor (LPAR) $1{\sim}5$. Our previous study showed that LPAR3 is expressed in the uterine endometrium in a cell type- and stage-specific manner and LPA via LPAR3 increases PTGS2 expression in the uterine endometrium during the period of implantation. Although LPAR3 is considered to be predominant LPA receptor in the uterine endometrium, other LPA receptors might playa role to mediate LPA functions in the uterine endometrium during pregnancy. Among LPARs, we investigated expression of LPAR1 during the estrous cycle and pregnancy in this study. Uterine endometrial tissue samples were collected from day (D) 12 and D15 of the estrous cycle and from D12, D15, D30, D60, D90 and D114 of pregnancy. Northern blot analysis determined that LPAR1 mRNA was constitutively expressed in the uterine endometrial tissues during the estrous cycle and pregnancy of all stages. Analysis by immunoblotting revealed that LPAR1 proteins were present in the porcine uterine endometrium during the estrous cycle and pregnancy. Immunohistochemical experiments demonstrated that LP AR1 protein was localized to endometrial epithelium and stromal cell, specifically to nuclei of these cell types. Results in this study show that LPAR1 is constitutively expressed in the uterine endometrium during the estrous cycle and pregnancy. These results suggest that LPA via LPAR1 may playa role in the uterine endometrial function throughout pregnancy in pigs.
Park, Sun-Ae;Kim, Lee-Kyung;Park, Chang-Min;Kim, Seung-Chang;Lee, Seung-Hwan;Lee, Ji-Woong;Choi, Bong-Hwan
Reproductive and Developmental Biology
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v.37
no.4
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pp.199-203
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2013
This experiment was conducted to investigate the genetic effects of candidate genes on the growth of spleen and liver tissues using dietary Curcuma longa (C. longa) supplementation. Expression analyses of candidate genes regarding animal growth was performed in order to determine the factors affecting the growth related to immune components of Curucumin, Turmerone, and Zingiberene as the bile secretion Paratolyl methyl carbinol (PTMC). The animals were divided into four groups of five chicks supplied with experimental diets of C. longa at 0.25, 0.5 and 1% and controls. The 19 growth-related genes were known to cell maturation, differentiation significant expression patterns in this analysis. Expression of growth response-related genes in chicks supplemented with 1% of C. longa showed better growth performance than chicks with 0.25 and 0.5% in spleen (p<0.05). The IGF1, MSTN, POU1F1, ADCYAP1 gene were known to central roles in mediating gonadotropin function, regulating steroidogenesis and promoting oocyte growth and maturation. Sex steroids, androgen and estrogen can affect sex differentiation and also can affect muscle development. On the other hand, GHSR and FABP3 gene showed significant expression patterns in this analysis. The results would be used as basic information for the variation of growth-related genes expression on the cell growth, sex cell growth, and sex hormones according to dietary supplementation with C. longa in chickens.
Objective: This study was undertaken to evaluate the dose dependent effects of Epimedii Herba extract solution on the spermatogenic abilities such as concentration, motility and morphological normality of sperm from the testis, and the activities of spermhyaluronidase and antioxidants. Materials and Method: We choose the 2-month-old mice, and administered the extract powder of Epimedii Herba in the different concentration once in a day for 60 days. The control group was administerde to normal water in the isolated testis tissue. Also we observed changes of isolated testis at the before and after administration of Epimedii Herba extracts in the mice. And we compared to the testicular tissue especially seminiferous tubules between control and treated group by histochemical methods. Results: The significant dose dependent differences were observed in the concentration of total sperm, the motility and normality of spermatozoa of the Epimedii Herba extract administered groups compared than that of control group, respectively. In the histological analysis of the testicular lobes were observed in the Epimedii Herbaextract administered groups than control group, respectively. Also, the activity hyluronidase was significantly increased in the Epimedii Herba extract administered groups than that of the control group. In case of antioxidant activity analysis, the activity of peroxidase and catalase were significantly increased in the Epimedii Herba extract administered groups than that of control group, respectively. Conclusion: This study shows that Epimedii Herba can effect the count and motility of sperm, the important ractor in male fertility and also promote the activity of antioxidants, catalase and peroxidase, which is the important factor in spermatogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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