Kim, Yong-Tae;Oh, Kyu-Ha;Kim, Joo-Ho;Kang, Hee-Gyoo;Choi, Jin-Sub
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.32
no.6
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pp.1975-1979
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2011
The modification of a gas diffusion layer (GDL), a vital component in polymer electrolyte fuel cells, is described here for use in the electrochemical detection of antibody-antigen biosensors. Compared to other substrates (gold foil and graphite), mouse anti-rHBsAg monoclonal antibody immobilized on gold-coated GDL (G-GDL) detected analytes of goat anti-mouse IgG antibody-ALP using a relatively low potential (-0.0021 V vs. Ag/AgCl 3 M NaCl), indicating that undesired by-reactions during electrochemical sensing should be avoided with G-GDL. The dependency of the signal against the concentration of analytes was observed, demonstrating the possibility of quantitative electrochemical biosensors based on G-GDL substrates. When a sandwich method was employed, target antigens of rHBsAg with a concentration as low as 500 ng/mL were clearly measured. The detection limit of rHBsAg was significantly improved to 10 ng/mL when higher concentrations of the 4-aminophenylphosphate monosodium salt (APP) acting on substrates were used for generating a redox-active product. Additionally, it was shown that a BSA blocking layer was essential in improving the detection limit in the G-GDL biosensor.
Native grass carp (Ctenopharygodon idellus) growth hormone, has 5 cysteine amino acid residues, forms two disulphide bridges in its mature form. Recombinant grass carp growth hormone, when over-expressed in E. coli, forms inclusion bodies. In vitro oxidative renaturation of guanidine-hydrochloride dissolved recombinant grass carp growth hormone was achieved by sequential dilution and stepwise dialysis at pH 8.5. The redox potential of the refolding cocktail was maintained by glutathione disulphide/glutathione couple. The oxidative refolded protein is heterogeneous, and contains multimers, oligomers and monomers. The presence of non-disulphide-bond-forming cysteine in recombinant grass carp growth hormone enhances intermolecular disulphide bond formation and also non-native intramolecular disulphide bond formation during protein folding. The non-disulphide-bond-forming cysteine was converted to serine by PCR-mediated site-directed mutagenesis. The resulting 4-cysteine grass carp growth hormone has improved in vitro oxidative refolding properties when studied by gel filtration and reverse phase chromatography. The refolded 4-cysteine form has less hydrophobic aggregate and has only one monomeric isoform. Both refolded 4-cysteine and 5-cystiene forms are active in radioreceptor binding assay.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.37
no.1
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pp.15-20
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2018
Most proteins produced in the endoplasmic reticulum (ER) of eukaryotic cells fold via disulfide formation (oxidative folding). Oxidative folding is catalyzed by protein disulfide isomerase (PDI) and PDI-related ER protein thiol disulfide oxidoreductases (ER oxidoreductases). In yeast and mammals, ER oxidoreductin-1s (ERO1s) supply oxidizing equivalent to the active centers of PDI. We previously identified and characterized the ERO1 of Bombyx mori (bERO1) as a thioredoxin-like protein that shares primary sequence homology with other ERO1s. Here we compare the reactivation of inactivated rRNase and sRNase by bERO1, and show that bERO1 and bPDI cooperatively refold denatured RNase A. This is the first result suggesting that bERO1 plays an essential role in ER quality control through the combined activities of bERO1 and bPDI as a catalyst of protein folding in the ER and sustaining cellular redox homeostasis.
Gwon, Kihak;Lee, Seonhwa;Nam, Hakhyun;Shin, Jae Ho
Journal of Electrochemical Science and Technology
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v.11
no.3
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pp.310-317
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2020
A development of disposable strip-type galactose sensor for point-of-care testing (POCT) was studied, which was constructed using screen-printed carbon electrodes. Galactose levels were determined by the redox reaction of galactose oxidase in the presence of potassium ferricyanide as an electron transfer mediator in a small sample volume (i.e., less than 1 µL). The optimal performance of biosensor was systematically designated by varying applied potential, operating pH, mediator concentration, and amount of enzyme on the electrode. The sensor system was identified as a highly active for the galactose measurement in terms of the sensitivity (slope = 4.76 ± 0.05 nA/µM) with high sensor-to-sensor reproducibility, the linearity (R2 = 0.9915 in galactose concentration range from 0 to 400 µM), and response time (t95% = <17 s). A lower applied potential (i.e., 0.25 V vs. Ag/AgCl) allowed to minimize interference from readily oxidizable metabolites such as ascorbic acid, acetaminophen, uric acid, and acetoacetic acid. The proposed galactose sensor represents a promising system with advantage for use in POCT.
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2004.11a
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pp.687-690
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2004
Fabrication and characterization of dye-sensitized TiO2 solar cells(DSSC) consisting of spray-coated TiO2 electrode, an electrolyte containing I-/I3- redox couple, and a Pt-coated counter electrode carried out, using mainly FE-SEM and solar simulator. Also, effect of rapid thermal annealing(RTA) temperatue on I-V curves of DSSCS consisting of approximately 10m thickness and $5{\times}5mm2$ active area. No significant difference in the apparent size of TiO2 clusters was observed with increasing RTA temperature. Also, an open circuit voltage(Voc) of approximately 0.70V and a short-circuit photocurrent(Jsc) of 8 to 12mA/cm2 were observed in the TiO2 solar cell. With increasing RTA temperature upto 550oC, photocurrent density of dye-sensitized solar cells was enhanced, leading to enhancing the efficiency of dye-sensitized solar cells having Pt-electroplated counter electrode.
Manganese dioxide is the material which has a good characteristic property for a secondary cell. We have surveyed on rechargeable battery of zink-manganese dioxide using aqueous solution and we also surveyed on redox reversibility of zink-manganese dioxide for checking up possibility for a secondary cell. We have found out to be active for charging and discharging of those.
Arginyl-fructose (AF) and arginyl-fructosyl-glucose (AFG) were chemically synthesized and purified. Their in vitro and cellular antioxidant activity was investigated using oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and cellular antioxidant activity assay, respectively. The peroxyl radical scavenging activity of AF was much higher than that of AFG, which was in good agreement with their reduction capacity to donate electrons or hydrogen atoms. On the other hand, the hydroxyl radical scavenging activity of AF was weaker than that of AFG, which was consistent with their metal chelating activity, suggesting that AFG-$Cu^{2+}$ complex may be less redox-active than AF-$Cu^{2+}$ complex due to 1 glucose molecule attached. The cellular antioxidant activity of AF and AFG appeared to depend on both their permeability into cell membrane and the scavenging activity on peroxyl or hydroxyl radicals. These results indicate that AF and AFG, Maillard reaction products, may have a high potential as a material for the development of nutraceutical food with antioxidant activity.
The aim of this study was to determine if hydrogen peroxide ($H_2O_2$) generated by glucose oxidase (GO) induces apoptosis or necrosis of BJAB cells and which radical is the direct mediator of cell death. We found that GO produced $H_2O_2$ continuously in low concentrations, similar to in vivo conditions, and decreased proliferation and cell viability in a dose-dependent manner. The GO-mediated cytotoxicity resulted from apoptosis, and was confirmed by monitoring the cells after H33342/Annexin V/propidium iodide staining. Decreases of mitochondrial membrane potential and intracellular glutathione level were found to be critical events in the $H_2O_2$-mediated apoptosis. Additional experiments revealed that $H_2O_2$ exerted its apoptotic action through the formation of hydroxyl radicals via the Fenton rather than the Haber-Weiss reaction. Moreover, intracellular redox-active iron, but not copper, participated in the $H_2O_2$-mediated apoptosis.
Christwardana, Marcelinus;Chung, Yongjin;Tannia, Daniel Chris;Kwon, Yongchai
Korean Journal of Chemical Engineering
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v.35
no.12
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pp.2421-2429
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2018
Thiol-based self-assembled anchor linked to glucose oxidase (GOx) and gold nanoparticle (GNP) cluster is suggested to enhance the performance of glucose biosensor. By the adoption of thiol-based anchors, the activity of biocatalyst consisting of GOx, GNP, polyethyleneimine (PEI) and carbon nanotube (CNT) is improved because they play a crucial role in preventing the leaching out of GOx. They also promote electron collection and transfer, and this is due to a strong hydrophobic interaction between the active site of GOx and the aromatic ring of anchor, while the effect is optimized with the use of thiophenol anchor due to its simple configuration. Based on that, it is quantified that by the adoption of thiophenol as anchor, the current density of flavin adenine dinucleotide (FAD) redox reaction increases about 42%, electron transfer rate constant ($k_s$) is $9.1{\pm}0.1s^{-1}$ and the value is 26% higher than that of catalyst that does not use the anchor structure.
Rita E. Ampiaw;Muhammad Yaqub;Changyeon Woo;Wontae Lee
Membrane and Water Treatment
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v.14
no.4
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pp.181-189
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2023
The Covid-19 pandemic has increased demand for chlorine-based sanitizing solutions, most of which contain hypochlorous acid (HOCl) as an active agent. Free chlorine (HOCl) in these sanitizers is crucial for their efficacy. Disposable test strips are affordable and convenient tools for determining various qualitative and quantitative parameters. In this study, disposable opto-chemical test strips were developed by physically immobilizing 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine (TMB) and o-dianisidine (o-D) reagents on chromatography and filter paper-based test strips for the visualization and detection of free chlorine in the form of HOCl. The reagents undergo a rapid color change upon reaction with chlorine through a redox reaction. The paper-based test strips showed rapid color change within a minute and a low sample volume requirement (1 ml). This portable, disposable paper-based test strip is a simple and cost-effective way to rapidly detect the presence of HOCl sanitizers for home and field applications. Both TMB and o-D successfully detected chlorine. Chromatography paper proved to be the more efficient option among the two papers used as substrates for the reagents (TMB and o-D). It exhibited high retention capacity and high performance in terms of color transformation when reacting with HOCl, even after two months of storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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