The purpose of this study is to develop a new preparation process of ginseng berry extracts having high concentrations of ginsenoside Rh1, Rg2, Rg5, F4, a special component of red and black ginseng. Chemical transformation from ginseng saponin glycosides to prosapogenin was analyzed by the HPLC. Extracts of ginseng (Panax ginseng) berry was processed under several treatment conditions including ultrasonication treatments. The content of total saponin reached their heights at 6 hr (UGB-6, 61.760%) of ultrasonication treatment, followed by 10 hr (UGB-10, 53.009%) and 9 hr (UGB-9, 50.652%) of ultrasonication treatment at $100^{\circ}C$. Results of those treatments showed that the quantity of ginsenoside Rh1 increased by over 15% at 10 hr of ultrasonication treatment at $100^{\circ}C$. The results of processing with UGB-10 indicate that the ultrasonication processed ginseng berry extracts that had gone through 10 hr treatments were found to contain the largest amount of ginsenoside Rh1 (15.358%), Rg2 (6.301%), Re (4.567%) and F4 (2.658%). In addition, UGB-6 contained ginsenoside Rg3 (13.632%) at high concentrations. It is thought that such results provide basic information in preparing ginseng berry extracts with functionality enhanced.
고기능성 홍삼사포닌성분의 함량을 증대시키기 위한 목적으로 홍삼엑스에 열처리, 산(acid)처리하여 그 가능성을 조사하였다. 산도를 조정하지 않은 무처리구(control, pH 4.4)에 $120^{\circ}C$ 열처리한 경우 ginsenoside-$Rg_3$의 함량이 약 2배 정도 증가였다. 구연산으로 pH 2.0으로 조정하고 온도처리한 처리구에서는 2.8배나 많은 ginsenoside-$Rg_3$ 성분이 증가하였으나 다른 유효한 사포닌의 파괴가 두드러져 처음 홍삼엑스에 함유되어 있던 총사포닌의 65% 정도가 소실되었다. $80^{\circ}C$에서 12시간 처리를 한 경우에는 pH를 2.5와 2.0로 조정한 처리구에서는 11.20 mg과 12.50 mg으로 홍삼엑스의 3.3 mg보다 3.3배 이상 ginsenoside-$Rg_3$ 성분이 변환되었다. Ginsenoside-$Rb_1,\;Rb_2$, Rc, Re, $Rg_1$의 함량이 산도가 높아짐에 따라서 급격히 소실되었고 홍삼 특이성분(ginsenoside-$Rg_3,\;Rh_2,\;Rh_1$)의 함량은 현저히 증가되었다. 매실엑스로 pH를 2.5로 조정한 처리구에서는 13.34 mg으로 홍삼엑스의 3.3 mg보다 4배 이상 변환된 것으로 분석되었다. 비록 31%정도의 total saponin의 감소가 있었으나 $120^{\circ}C$의 고온처리에서 처럼 다른 유효한 사포닌의 큰 손실 없이 $60^{\circ}C$에 12시간 처리하는 것만으로도 다량의 ginsenoside-$Rg_3$를 생산하는 것을 확인하였다.
This study compared the contents of ginseng prosapogenin depending on the extracting conditions of Ginseng Radix palva(Panax ginseng) to provide basic information for developing Ginseng Radix palva-based functional foods. Our findings show that the content of crude saponin peaked at 18 hours of extraction and when extracted twice at $100^{\circ}C$ (GRP-18). However, the content of total saponin reached its height at 6 hours of extraction at $100^{\circ}C$ (GRP-6) and when extracted twice. On the other hand, the content of ginsenoside $Rg_3$, $Rg_5$ and $Rk_1$ from Red and Black ginseng reached their heights at 18 hours of extraction, followed by 72 hours and 15 hours of extraction at $100^{\circ}C$. And at $100^{\circ}C$ the main prosapogenin of the content of Black ginseng ginsenoside $Rg_5$ and $Rk_1$ reached their heights at 18 hours of extraction, followed by 72 hours and 15 hours of extraction.
Background: Ginseng is believed to have antitumor activity. Autophagy is largely a prosurvival cellular process that is activated in response to cellular stressors, including cytotoxic chemotherapy; therefore, agents that inhibit autophagy can be used as chemosensitizers in cancer treatment. We examined the ability of Korean Red Ginseng extract (RGE) to prevent autophagic flux and to make hepatocellular carcinoma (HCC) cells become more sensitive to doxorubicin. Methods: The cytotoxic effects of total RGE or its saponin fraction (RGS) on HCC cells were examined by the lactate dehydrogenase assay in a dose- or time-dependent manner. The effect of RGE or RGS on autophagy was measured by analyzing microtubule-associated protein 1A/1B-light chain (LC)3-II expression and LC3 puncta formation in HCC cells. Late-stage autophagy suppression was tested using tandem-labeled green fluorescent protein (GFP)-monomeric red fluorescent protein (mRFP)-LC3. Results: RGE markedly increased the amount of LC3-II, but green and red puncta in tandem-labeled GFP-mRFP-LC3 remained colocalized over time, indicating that RGE inhibited autophagy at a late stage. Suppression of autophagy through knockdown of key ATG genes increased doxorubicin-induced cell death, suggesting that autophagy induced by doxorubicin has a protective function in HCC. Finally, RGE and RGS markedly sensitized HCC cells, (but not normal liver cells), to doxorubicin-induced cell death. Conclusion: Our data suggest that inhibition of late-stage autophagic flux by RGE is important for its potentiation of doxorubicin-induced cancer cell death. Therapy combining RGE with doxorubicin could serve as an effective strategy in the treatment of HCC.
팽화처리가 홍미삼의 사포닌 성분, 당류, 페놀성분, 미세구조 및 소화율 등에 미치는 영향을 조사하였다. 홍미삼의 추출된 조사포닌 함량은 팽화처리후 약 26.5% 증가하였다. 사포닌 조성에서 팽화홍미삼은 홍미삼에 비해 $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Re, $Rg_1$함량이 다소 감소하였으나 Rd와 $Rg_3$함량은 증가하였고, 특히 $Rg_3$함량은 0.49 mg/g에서 0.72 mg/g로 증가하였다. 가용성 총당은 팽화전후 비슷하였고, 산성다당체 함량은 각각 7.15, 6.44%로 팽화후 다소 감소하였다. 총페놀함량은 7.86%에서 9.94%로 증가하였다. 개별 페놀산의 경우 gentisic acid는 홍미삼에서만, salicylic acid는 팽화후 홍미삼에서만 검출되었고, gallic acid, p-coumaric acid, caffeic acid 및 ferulic acid 등은 팽화로 크게 감소한 반면 syringic acid는 약 6배 증가하였다. 팽화후 홍미삼의 절단면 미세구조는 팽화전보다 훨씬 균일화한 입자모양을 나타내었으며, 팽화전후 펩신소화율은 각각 22.4, 46.2%로 통계적으로 유의한 차이가 있었다 (p<0.05). 본 결과는 팽화처리에 의해 홍미삼의 생리활성성분의 증가와 기호성 및 소화율을 높일 수 있음을 시사하는 것으로 판단되었다.
Red cell glycolytic intermediates, metabolites and metabolic ratios were studied. Glycolytic intermediates were measured in neutralized perchloric acid extracts of red cell suspensions after 3 hr incubation at $37^{\circ}C$ in the presence and absence of saponin. Adenosine triphosphate(ATP), adenosine diphosphate(ADP), pyruvate and lactate were measured by enzymatic procedures involving stoichiometric oxidation or reduction of a pyridine nucleotide. Glucose was determined using glucose oxidase after zinc hydroxide extraction. The redox state was calculated from the lactate dehydrogenase equilibrium. Adenosine triphosphatase activity(ATPase) was measured by determining the amount of phosphate released from ATP by washed erythrocyte membranes(ghost) during 20 min. incubation. Both total hydrolysis and the amount of hydrolysis that occured in the presence of ouabain were measured. The second measurement yields Mg-ATPase and represents nonspecific ATPase activity of the membranes. The difference between total and Mg-ATPase activity can be attributed to Na-K-ATPase. For the measurement of sodium fluxes, human erythrocytes were preincubated in $^{22}Na$ for 3 hr at $37^{\circ}C$, washed and suspended in a tracer-free medium. The amount of $^{22}Na$ transported out of cells at any time was determined by analysis of supernatant samples taken at various time after addition of the labeled cells to isotope-free medium. The cells and medium were separated and the radioactivity appearing in the medium was measured. From the total radioactivity in the suspension and the radioactivity appearing in the medium at known time, the rate constant for sodium release was computed. The results are summarized as follows: 1) ATP and ATP/ADP were found to increase at every concentration of saponin tested whereas ADP declined at every cone. of saponin. The increase in pyruvate and lactate were observed at every cone, of saponin and thus $NAD^+/NADH$ computed from pyruvate/lactate also increased. Glucose utilization was stimulated by saponin. 2) $Na^+-K^+-ATPase$ activities showed a biphasic response to saponin, first increasing in lower concentration and then decreasing in higher concentration of saponin. 3) The efflux of sodium was significantly increased by saponin in the range of 5 to 10 mg%. The stimulatory effect of saponin on the rate constants for active(ouabain-sensitive) sodium efflux was inhibited by addition of ouabain.
부패된 홍미삼엑기스로부터 분리동정한 내삼투압성 효모인 C. parapsilosis가 홍미삼엑기스의 성분에 미치는 영향을 알아보기 위하여 C. parapsilosis를 배양하면서 pH의 변화, ginsenoside의 함량, 지방산, phenol 화합물 등의 변화를 조사하였다. 엑기스를 소량 첨가하였을 때는 배지의 pH에 다소 영향을 주었으나 엑기스를 다량(10~20%) 첨가하였을 때는 pH에 큰 영향을 미치지 못하였다. C. parapsilosis는 홍삼엑기스의 사포닌의 함량에 영향을 주지 않았고 사포닌을 탄소원으로 이용하지 못하였으며 사포닌 중량 첨가에 따른 생육 촉진경향 혹은 저해현상도 없었다. C. parapsilosis의 홍미삼엑기스의 유리당 이용 패턴은 glucose, fructose 등 단당류를 먼저 흡수 이용하고 다음에 sucrose, maltose 등을 2차적으로 이용하였다. 홍미삼엑기스의 대부분의 지방산은 C. parapsilosis 생육에 의하여 현저히 감소하였으며 이중결합이 없는 stearic acid, palmitic acid는 변화가 거의 없었다. 또한 페놀화합물 중 maltol은 현저히 감소하였고 그 외에 vanillic acid, m-coumaic acid의 함량은 거의 변화가 없었다. 비휘발성 유기산의 함량은 거의 변화가 없었으며 아미노산은 배양 전에 비하여 현저히 감소하였고 특히 arginine은 완전 소진되었다.
본 연구는 수삼의 저장기간 (무저장, 2일, 6일, 8일, 10일) 및 저장온도 $(20^{\circ}C,\;34^{\circ}C,\;-10^{\circ}C)$로 구분하여 제조된 홍삼의 품질 및 이화학적 특성변화를 비교 조사하였다. 수삼의 수분함량은 저장일이 길어질수록 감소하는 경향이었다. 수삼을 10일동안의 단기간 저장온도는 $34^{\circ}C$의 냉장저장이 적합하다고 생각한다. 전질소 함량은 저장일 10일로 갈수록 무저장구에 비해 다소 증가하는 경향이었다. 저장온도별로는 실온, 냉동, 냉장저장 순으로 무저장구보다 전질소 함량이 증가함을 보였다. 각각의 저장구별 페놀성 화합물의 함량은 무저장구에 비하여 저장기간이 길수록 증가하는 경향이었다. 저장 온도별로는 냉장 저장구가 실온, 냉동 저장구에 비하여 다소 페놀성 화합물의 함량이 높았다. 저장조건별 홍삼의 사포닌 Rf 에 대한 8종의 $ginsenoside\;Rb_1,\;Rb_2,\;Rc,\;Rd,\;Re,\;$Rg_3,\;Rg_1,\;Rg_2$의 상대적 함량 (%)비 변화를 분석한 결과, 각각 저장조건에서 Rf 대한 $Rb_1,\;Rg_1$의 상대적 함량비가 저장기간이 늘어날수록 감소하는 경향이었다. 기타 ginsenoside 함량변화는 시료간의 차이에서 나타난 것으로 판단되며 저장조건에 따른 변화 경향은 뚜렷하지 않았다. 관능적 성질에서 각각 저장구별로 홍삼의 품질, 맛과 향을 종합적으로 평가하여 볼 때, $34^{\circ}C$에서 냉장저장 운반하는 것이 홍삼 향미의 안정적 유지에 가장 적합한 것으로 평가되었다.
홍삼제품 제조 과정중의 부산물인 홍삼박의 활용 가능성을 조사하기 위하여 여러 가지 담자균의 배양에 홍삼박 추출물을 첨가하여 배양한 후 균체 증식량, 단백질 및 amino acid함량 등을 조사하였으며 그 결과를 보고하는 바이다. 수집 된 담자균 중 G. lucidum과 P. ostreatus가 액체배양에서 균체증식이 양호한 균주로 선발되었으며, 홍삼박 추출물을 0.2% 첨가하였을 때 균체증식량이 가장 많았으며 단백질 함량은 0.5% 첨가하였을 때 l-3%가 증가하였다. Amino acid함량은 인삼박 추출물을 0.2% 첨가하였을 때는 거의 변화가 없었으나 0.5% 첨가하였을 때에는 G. lucidum, P. ostreatus 모두 상당히 증가하였으며 그 증가폭 중 cysteine이 가장 컸다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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