The human papillomavirus E7 protein can form a specific complex with a retinoblastoma tumor suppressor gene product (p105-Rb) that results in the release of the E2F transcription factor, which is critical for the growth-deregulation and transforming properties of the viral E7 oncoprotein. In an attempt to apply interaction between the E7 oncoprotein and a target cellular protein Rb for an in vitro screening system for drugs against human papillomavirus infection, we primarily investigated the E7Rb binding through a pull down assay and enzyme-linked immunosorbent assay. The pull down assay showed that both glutathione S-transferase-tagged E7 and His-tagged E7 immobilized on resins specifically produced complexes with bacterially expressed Rb in a dose-dependent manner, as determined by immunoblot analyses. This result coincided with that of an enzyme-linked immunosorbent assay, which is a useful system for the mass screening of potential drugs. Taken together, this screening system (based on the interaction between E7 and Rb) can be a promising system in the development of drugs against cervical cancers caused by human papillomavirus infection.
This study was carried out to evaluate the manufacturing characteristics of organic liquid fertilizer with poultry manure, soybean meal, and rice bran at plastic house in Chungbuk Agricultural Research and Extension Service. Treatment was given 3 treatments; poultry manure+soybean meal (PM+SM), poultry manure+rice bran (PM+RB), and soybean meal+rice bran (SM+RB). The obtained results from this study were summarized as follows; The pH in liquid fertilizer was consistently increased in PM+SM treatment, and was increased after decreased at early season in PM+RB and SM+RB treatments. The electriacl conductivity(EC) in liquid fertilizer was rapidly increased from $2^{nd}$ weeks to $4^{th}$ weeks after fermentation in PM+SM and PM+RB treatments, and was rapidly increased from $4^{th}$ weeks to 6th weeks after fermentation in SM+RB treatment. The amount of $H_2S$ gas occurrence was the highest as $1,200\;mg{\cdot}kg^{-1}$ in early season, and was the lowest as $50\;mg{\cdot}kg^{-1}$ at $12^{th}$ weeks after fermentation of organic liquid fertilizer. The temperature of organic liquid fertilizer was stabilizing in $4^{th}$ weeks after fermentation. The yield of well of nitrogen, phosphate, and potassium was increased with increasing fermentation periods. It was not change from $4^{th}$ weeks after fermentation in content of calcium, magnesium and sodium in organic liquid fertilizer.
후두 편평세포암은 종양세포의 생물학적 특성과 발생부위별 미세환경이 다르기 때문에 임상적 병기만으로 예후를 추정하는 것은 다소 문제점이 있다. 이에 저자들은 종양세포의 유전정보에 의한 증식능이 예후와 연관성이 있는지 규명하고자 EGFR, p53 단백 및 pRB의 표현양상을 후두 편평세포암 40례의 임상적 특성과 비교 검토하여 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. p53 단백의 양성 표현율은 임상적 병기, 원발병소의 병기, 경부 림프전이절의 병기, 병리조직학적 분화도, 재발이나 원격전이 흑은 이차암이 있었던 경우와 연관성이 높았다. 2. pRB의 음성 표현율은 침습성이 강한 성문상분, 임상적 병기, 원발병소의 병기, 병리 조직학적 분화도, 재발이나 원격전이 혹은 이차암, 치료에 실패한 경우와 연관성이 높았다. 3. 3년생존율은 p53의 양성표현율과 관계가 있었다. 4. EGFR은 특별한 상관관계가 없었다. 이상의 결과로 보아 p53 단백과 pRB의 암억제유전자 단백의 면역조직화학적 염색을 통한 표현양상은 후두 편평세포암의 생물학적인 특성을 잘 반영하고 있을 뿐만 아니라 종양 즉 인자들과 밀접한 상관관계가 있어 후두 편평세포암의 악성도를 예측하는데 도움을 주는 예후인자로서 적용시킬 수 있을 것으로 생각된다.
Background: Culturing wild ginseng adventitious root using plant factory technology provides genetic safety and high productivity. This production technology is drawing attention in the fields of functional raw materials and product development. The cultivation method using elicitors is key technology for controlling biomass and increasing secondary metabolites. Methods and Results: Elicitor treatments using methyl jasmonate, pyruvic acid, squalene, β-sistosterol were performed to amplify total ginsenosides (Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd) of cultured wild ginseng adventitious root. Thereafter, fermentation and steaming processes were performed to convert total ginsenosides into minor molecular ginsenosides (Rg3, Rk1, and Rg5). The result indicated that methyl jasmonate minimizes the reduction in fresh weight of cultured wild ginseng adventitious root and maximizes total ginsenosides (sum of Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd). Ginsenoside conversion results showed a maximum degree of conversion of 131 mg/g. Conclusions: In this study, we demonstrated that the optimal elicitor treatment method increased the content of total ginsenosides, while the steaming and fermentation processing method increased the content of minor ginsenosides.
The chemical and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity changes of ginsenoside $Rb_1$-glycine and ginsenoside $Rg_1$-glycine mixtures by Maillard reaction were investigated to identify the role of Maillard reaction in the increased antioxidant activity of ginseng by heat-processing. The DPPH radical scavenging activity of $Rg_1$-glycine mixture was more strongly increased by heat-processing than that of $Rb_1$-glycine mixture. From the analyses of ginsenosides, $Rb_1$ was gradually changed into 20(S)-$Rg_3$, 20(R)-$Rg_3$, $Rk_1$ and $Rg_5$ by heat-processing. $Rg_1$ was gradually changed into 20(S)-$Rh_1$, 20(R)-$Rh_1$, $Rk_3$ and $Rh_4$ by heat-processing. However, the generation of these less-polar ginsenosides was not related to the increased DPPH radical scavenging activity of $Rb_1$-glycine and $Rg_1$-glycine mixtures because their DPPH radical scavenging activities were already significantly increased when dried at $50^{\circ}C$, which temperature induce no structural changes of ginsenosides. In the comparison of browning compound levels of $Rg_1$-glycine and $Rb_1$-glycine mixtures, the extents of Maillard reaction were positively correlated with their increased free radical scavenging activities. Based on the chemical and DPPH radical scavenging activity changes of $Rg_1$-glycine and $Rb_1$-glycine mixtures by heat-processing, we clearly identified that the increased free radical scavenging activity of ginsenoside is mediated by the Maillard reaction between sugar moiety of ginsenoside and amino acid.
인삼 성분이 prostaglandin 등 arachidonic acid 대사산물 생성에 미치는 영향을 실험함으로써 인삼의 약리학적 작용기전을 간접적으로 모색하였다. 즉, [$^3H$]-arachidonic acid를 기질로 넣어주고 토끼 신장 micorsome, 소의 대동맥 microsome, 정상 성인의 혈소판 homogenate 등을 효소원으로 한 in vitro 생합성 과정에 변화를 주는 수종 인삼 saponin 성분의 효과를 검정하였다. 실험에 사용한 인삼 saponin 성분은 panaxadiol, panaxatriol 및 protopanaxadiol계 soponin류인 Ginsenoside $Rb_2$(G-$Rb_2$), Ginsenoside Rc(G-Rc) 및 protopanaxatriol계 saponi류인 Ginsenoside (G-$Rb_2$)이었다. 1. Arachidonic acid로부터 생성된 총 cycoloxygenase 반응생성물 및 malondialdehyde의 양은 실험에 사용한 인삼 saponin 성분의 전 농도 범위에서 유의적인 변화를 보이지 않았는데 이는 인삼 saponin 성분들은 cyclooxygenase에 직접 작용하지 않는다는 것을 설명해 준다. 2. Panaxdiol($500{\mu}g$/ml)은 $PGE_2$ 생성에는 영향이 없으나 $PGF_2$ 및 $TXB_2$의 생성을 감소시켰으며 동시에 6-keto-$PGF_{1{\alpha}}$의 생성은 증가시켰다. Panaxatriol도 유사한 양상을 보였다. 3. G-$Rb_2$, Rc, Re에 의해 $TXB_2$의 생성은 농도 의존적으로 감소하였으나 6-keto-$PGF_{1{\alpha}}$의 생성은 유의적으로 증가하였다. 또한 arachidonic acid와 $TXA_2$ 유사제인 U46619(9,11-methanoepoxy $PGH_2$)로 유도한 혈소판 응집 현상은 세 ginsenoside에 의해 억제되었다. G-Re의 6-keto-$PGF_{1{\alpha}}$생성증가 효과는 prostacyclin 합성효소억제제에 의해 길항하였다. 이상의 결과와 같이 인삼saponin 성분들은 arachidonic acid로부터 cyclooxygenase를 통해 일단 생성된 endoperoxide에서 각각의 prostaglandin을 생성하는 효소, 특히 G-$Rb_2$는 $TXA_2$ synthetase에 강력한 억제제로, G-Re는 prostacyclin 생합성에 촉진데로 심혈관계 균형에 기여하리라 생각된다.
본 연구에서는 인공광 광질에 따른 곰보배추의 생육, 엽형 및 항산화능을 비교하였다. 정식 후 56일째에 측정된 엽장, 엽폭 및 엽수는 적색 LED(R)와 대조구인 형광등(FL) 처리구에서 유의적으로 높았고 혼합광(RB2:1)과 백색 LED(W) 처리구에서 낮았다. 엽형지수(엽장/엽폭)도 적색 LED(R)와 대조구인 형광등(FL) 처리구에서 유의적으로 높았고 혼합광(RB2:1)과 백색 LED(W) 처리구에서 낮았다. 지상부 생체중, 건물중 및 엽면적 모두 적색 LED(R) 처리구에서 가장 높았고 형광등(FL)과 청색 LED(B) 처리구가 그 다음으로 높게 나타났으며 혼합광(RB2:1)과 백색 LED(W) 처리구에서 낮았다. 잎의 수하현상은 정식 21일 이후부터 적색 LED(R)와 혼합광(RB2:1) 처리구에서만 발생하였다. 엽록소 함량은 적색 LED(R) 처리구에서 가장 낮았다. 비엽중은 청색 LED(B) 처리구에서 가장 높았고 형광등(FL) 처리구에서 가장 낮았다. DPPH free radical 소거활성은 처리 간 유의차가 없었다. 위의 결과들을 종합하여 볼 때 형광등이 곰보배추를 실내에서 인공으로 재배 시 적합한 광원으로 판단된다.
The crystal structure of dehydrated $Ag_{5.6}K_{6.4}-A$, zeolite A ion-exchanged with $K^+\;and\;Ag^+$ as indicated and dehydrated at 360$^{\circ}$C, has been determined by single-crystal X-ray diffraction techniques. Also determined were the structures of the products of the reactions of this zeolite with 0.1 Torr of Cs vapor at 250$^{\circ}$C for 48 h and 72 h, and with 0.1 Torr of Rb vapor at 250$^{\circ}$C for 24 h. The structures were solved and refined in the cubic space group Pm3m at 21(l)$^{\circ}$C (a= 12.255(l) ${\AA}$ , 12.367(l) ${\AA}$, 12.350(l) ${\AA}$, and 12.263(l) ${\AA}$, respectively). Dehydrated $Ag_{5.6}K_{6.4}$-A was refined to the final error indices $R_1= 0.044\;and\;R_2=0.037$ with 202 reflections for which I>3${\sigma}$(I). The crystal structures of the reaction products were refined to $R_1=0.087\;and\;R_2= 0.089$ with 157 reflections, $R_1=0.080\;and\;R_2= 0.087$ with 161 reflections, and $R_1= 0.071\;and\;R_2=0.061$ with 88 reflections, respectively. In the structure of $Ag_{5.6}K_{6.4}-A,\;K^+$ ions block all 8-oxygen rings, and one reduced Ag atom is found per sodalite cavity. Also, ca. 4.6 $Ag^+ ions\;and\;3.4 K^+ ions$ are found at 6-ring sites in the large cavity. The crystal structures of the reaction products show that all $K^+$ and $Ag^+$ ions have been reduced, and that all K^+$ atoms have left the zeolite. Cs or Rb species are found at three different crystallographic sites: 3.0 $Cs^+\;or\;3.0Rb^+$ ions per unit cell occupy 8-ring centers, ca. 8.0 $Cs^+ ions\;or\;5.7 Rb^+$ ions, are found on threefold axes opposite 6-rings deep in the large cavity, and ca. 2.5 $Cs^+\;or\;2.3 Rb^+ ions are found on threefold axes in the sodalite unit. Also, 1 $Rb^+$ ion lies opposite a 4-ring. Silver atoms, corresponding to 75% or 40% occupancy of hexasilver clusters stabilized by coordination to $Cs^+\;or\;Rb^+$ ions, are found at the centers of the large cavities. In the crystal structures of dehydrated Ag_{5.6}K_{6.4}-A$ reacted with Cs vapor, excess Cs atoms are absorbed and these form (locally) cationic clusters such as $(Cs_4)3^+\;and\;(Cs_6)4^+$.
Ceramide. a product of sphingomyelin hydrolysis, has been proposed as a lipid second messenger mediating antiproliferative activation. In this study, we examined the role of the cell cycle-related proteins in the ceramide-mediated growth suppression. Treatment of U-937 cells with C$_2$-ceramide(N-acetylsphingosine) resulted in growth suppression in a time- and concentration dependent manner. Ceramide induced concentration dependent dephosphorylation of retinoblastoma gene product (Rb). Rb remains hypophosphorylated in synchronized cells even after serum stimulation in the presence of ceramide. Ceramide decreased the expression of cyclin D$_1$ and cyclin E levels. These results suggest that antiproliferative effect of ceramide is associated with hypophosphorylation of Rb and decreased expression of cyclin D1 and cyclin E.
Rice wine (makgeolli) containing various amounts of mountain ginsengs (MG) are being prepared with nuruk and yeasts, and the physicochemical characteristics and contents of ginsenosides in MG-makgeolli were analyzed. Average particle size of MG powder is $29.1{\mu}m$. MG slice (20 g) or powder (0~20 g) and rice (3,000 g) were used for 12 days fermentation of makgeolli, makgeolli containing slice of MG (SW-makgeolli), makgeolli containing 2 g (PW1-makgeolli), 10 g (PW2- makgeolli), 20 g (PW3-makgeolli) of powder of MG, respectively. Soluble solids and pH levels show no differences between five kinds of makgeolli groups, whilst the presence of high amounts of MG (PW3-makgeolli) caused decreases in ethanol and acidity. Major free amino acids in MG-makgeolli are glutamic acid and arginine. Total contents of 14 ginsenosides are approximately 2.5 g/100 g of dried MG powder and major ginsenoside were ginsenosides Re, Rb1, Rb2, Rg1, Rc and Rf. During the propagation of makgeolli containing MG, the ginsenosides Rb1, Rb2, Rb3, and Rc decreased, whilst ginsenosides Rg3 and compound K increased highly. It indicates that ginsenosides in MG are metabolized to different forms of ginsenosides by brewing microorganisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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