This study aimed to explore whether photodynamic therapy using Radachlorin and diode laser is an effective inhibitor of Candida albicans. Suspensions of Candida albicans were obtained, inoculated in petri dishes with Radachlorin, and incubated for 30 min. Then, the laser light of a diode laser was irradiated at at energy densities of 3 J/cm2, 5 J/cm2, 7 J/cm2. As a result, Candida albicans showed a killing rate of 91.5% at an energy density of 7 J/cm2. This study found that photodynamic therapy using a Radachlorin and diode laser was effective for the inhibition of Candida albicans.
광역학 요법(photodynamic therapy)은 특정 파장의 빛에 의해 활성화되는 광민감제(photosensitizer)를 사용하여 세포 내 산소를 활성화시키는 치료 방법으로, 항생제 내성균에 의한 상처 감염의 치료에 유망한 접근 방법이다. 일반적으로 건강한 사람에게 비병원성인 녹농균(Pseudomonas aeruginosa, P. aeruginosa)은 특정 병원성 징후를 보이지 않지만, 피부 손상이나 면역력이 저하된 사람들에서는 패혈증과 같은 심각한 질병을 유발할 수 있다. 항생제는 P. aeruginosa 감염에 대한 전통적인 치료법이나 약물 오용으로 인한 항생제 내성의 증가는 이러한 감염을 관리하는 데 큰 어려움을 준다. 본 연구에서는 P. aeruginosa의 억제제로서 광민감제(PhotoMed, Methyl pheophorbide A, Radachlorin®)와 다이오드 레이저를 이용한 광역학 치료 효과를 조사하는 것을 목표로 했다. P. aeruginosa 현탁액과 광민감제(PhotoMed, Methyl pheophorbide A, Radachlorin®)를 페트리 접시에 접종하여 30분 후 다이오드 레이저를 사용하여 3 J/cm2의 에너지 밀도로 조사했다. 그 결과, P. aeruginosa는 PhotoMed에서 79.65%, Methyl pheophorbide A에서 47.36%, Radachlorin®에서 40.91%의 사멸률을 보였다. 이번 연구는 P. aeruginosa를 억제하기 위한 가장 효과적인 접근법이 PhotoMed와 다이오드 레이저를 이용한 광역학 치료임을 보여준다.
이 연구의 목적은 광감작제인 라다클로린과 포토프린을 발광다이오드에 접목하여 포도알균의 광역학치료 효과를 평가하고자 하였다. 실험방법은 황색포도알균이나 표피포도알균의 $1{\times}10^5CFU/ml$이 되게 균주부유액을 준비하였고, 광감작제(포토프린 또는 라다클로린)를 1.25, 2.5, 5, $10{\mu}g/ml$가 되도록 희석하였다. 균주희석액은 에너지밀도 각각 $14.4J/cm^2$와 $19.8J/cm^2$로 630 또는 670 파장 발광다이오드 빛을 조사하였다. 황색포도알균과 표피포도알균의 집락형성수는 포토프린 $5{\mu}g/ml$ 농도에서 33, 50개의 집락이 각각 형성되었고, 두 세균 모두 라다클로린 $5{\mu}g/ml$ 농도에서는 완전한 살균을 나타냈다. 유세포분석에 의한 형광강도는 정상세포보다 죽은세포에서 증가를 보였다. 투과전자현미경의 사진에서는 세포막의 손상과 부분적으로 세포형태의 파괴가 관찰되었다. 이 결과로 포토프린과 라다클로린을 이용한 광역학치료는 항균치료의 새로운 방법이 될 수 있음을 제의한다.
Staphylococcus aureus is a major pathogen that causes clinical infections in humans and can also cause massively colonized in lesion skin, particularly in atopic dermatitis patients. This study investigated the effects of photodynamic inactivation with radachlorin and diode laser irradiation on the viability of S. aureus in vitro and assessed the effects of the dose of laser transmission. In the PDI group, 5 𝜇L of S. aureus suspension and 5 𝜇L of radachlorin were inoculated in a 55 mm petri dish (63.6 cm2). The samples were placed in a 37° incubator for 30 min and then irradiated with light (660 nm diode laser). After laser irradiation, the cells were stored for 24 h at 37° in an incubator with 5% CO2, and the number of colonies was counted. All CFU/mL of S. aureus were reduced by diode laser in the presence of radachlorin, with a killing rate of 87.9% at an energy dose of 9 J/cm2. This study contribute to treat colonized with S. aureus in atopic dermatitis patients and wound infections by providing information on the optimal dose of laser transmission using PDI to eliminate S. aureus.
Photodynamic therapy (PDT) apply photosensitizers and light. The purpose of this study was to evaluate the in vitro efficacy of PDT using blue LED (light emitting diode) with photofrin and radachlorin for Propionibacterium acnes. The colony forming units method was used to assess the antibacterial activity. Suspension (1 mL) containing P. acnes at $1{\times}10^5CFU/mL$ were prepared and then 2 fold serial diluted to $12.5{\mu}g/mL$ from $50{\mu}g/mL$ concentration of photofrin and radachlorin. After 60 minutes incubation, light was irradiated for 10 to 30 minutes using the following light source of wavelength 460 nm, each energy density 36, 72 and $108J/cm^2$. Bacterial growth was evaluated after 72 hours incubation in a Phenylethanol Blood Agar (PEBA) culture. In addition, flow cytometric analysis were performed to measure the live cell after PDT. Also transmission electron microscopy (TEM) was employed to evaluate the effect of pathogens by PDT. The PDT Group was perfectly killed to all kind of photosensitizers dose of $12.5{\mu}g/mL$ with irradiation of 10 minutes. Also other Groups were killed to all kind of photosensitizers dose of $6.25{\mu}g/mL$ with irradiation time of 20 and 30 minutes. The flow cytometry showed a lower number of viable bacteria in the PDT group compared to the control group. The images of the TEM results were showed in cytoplasmic membrane damage and partially deformed to cell morphologies. These results suggest that radachlorin and photofrin combine blue LED PDT can be effectively treated when was proved treatment for acnes therapy.
The aim of this study was to evaluate the photodynamic effect of various photosensitizing agents against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). MRSA was exposed to light from a 632 urn diode laser (15 J/$cm^2$) in the presence of various photosensitizer, such as photofrin, photogem, radachlorine and ALA. In vivo study was performed using ICR mice. Twenty eight mice had a standard wound ($100\;mm^2$) created on the dorsum, and MRSA was inoculated into the wound region. The four groups were classified as follows: (1) the untreated control group (bacteria alone), (2) the bacteria plus light group (15 J/$cm^2$), (3) the bacteria plus photofrin group (kept in the dark), and (4) the photodynamic therapy (PDT) group (bacteria, photofrin, and light). After photofrin (dose 1 mg/kg) injection, the experimental group was irradiated with 632 urn diode laser (15 J/$cm^2$) for 30 minutes after In vitro results of PDT showed the complete killing of MRSA at the photofrin, radachlorine, and photogem However, ALA-PDT was ineffective on MRSA viability. In vivo results showed that photofrin has therapeutic effect on the wound infection. These results demonstrate that selective lethal photosensitization of MRSA can be achieved using phofrin, photogem and radachlorin. Thus, PDT can inactivate MRSA survival.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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