Photodynamic effect of Photofrin and Radachlorin against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis

황색포도알균과 표피포도알균에 대한 포토프린과 라다클로린의 광역학 효과

The aim of this study was to evaluate the photodynamic therapy effects against staphylococci using Photofrin and Radachlorin with Light emitting diode(LED). Experimental methods, The bacterial suspensions containing Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis at $1{\times}10^5$ were prepared and diluted to different concentrations of photosensitizer, Photofrin or Radachlorin, on 1.25, 2. 5,5 and $10{\mu}g/ml$. The bacterial suspensions were exposed to 630 and 670 nm LED light at the energy density of 14.4 and $19.8J/cm^2$, respectively. The CFU results of S. aureus and S. epidermidis were showed 33 and 50 colony forming at $5{\mu}g/ml$ of Photofrin, respectively and both of them perfectely were dead at $5{\mu}g/ml$ of Radachlorin. The fluorescent intensity by flow cytometry was showed the increase in the dead cells than the normal cells. In the TEM photograph, the damage of bacterial membrane and the distortion of cell morphology were observed. These results suggest that photodynamic therapy combine with Photofrin and Radachlorin can be applied a new modality for antibacterial therapy.

이 연구의 목적은 광감작제인 라다클로린과 포토프린을 발광다이오드에 접목하여 포도알균의 광역학치료 효과를 평가하고자 하였다. 실험방법은 황색포도알균이나 표피포도알균의 $1{\times}10^5CFU/ml$이 되게 균주부유액을 준비하였고, 광감작제(포토프린 또는 라다클로린)를 1.25, 2.5, 5, $10{\mu}g/ml$가 되도록 희석하였다. 균주희석액은 에너지밀도 각각 $14.4J/cm^2$와 $19.8J/cm^2$로 630 또는 670 파장 발광다이오드 빛을 조사하였다. 황색포도알균과 표피포도알균의 집락형성수는 포토프린 $5{\mu}g/ml$ 농도에서 33, 50개의 집락이 각각 형성되었고, 두 세균 모두 라다클로린 $5{\mu}g/ml$ 농도에서는 완전한 살균을 나타냈다. 유세포분석에 의한 형광강도는 정상세포보다 죽은세포에서 증가를 보였다. 투과전자현미경의 사진에서는 세포막의 손상과 부분적으로 세포형태의 파괴가 관찰되었다. 이 결과로 포토프린과 라다클로린을 이용한 광역학치료는 항균치료의 새로운 방법이 될 수 있음을 제의한다.